DITIOCARBAMATO EM MAM

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DITIOCARBAMATO EM MAMÃO

• Simpósio Brasileiro sobre Resíduos de Agrotóxicos
  em Alimentos
• Agência Nacional de Vigilância Sanitária
• Abril 2006

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PARCERIAS

• CENTRO PLURIDISCIPLINAR DE PESQUISAS BIOLÓGICAS
  QUÍMICAS E AGRÍCOLAS (CPQBA) UNICAMP
• EMBRAPA MANDIOCA E FRUTICULTURA
• EMBRAPA MEIO AMBIENTE
• EMPRESA BAIANA DE DESENVOLVIMENTO AGRÍCOLA (EBDA)
• INSTITUTO ADOLFO LUTZ
• INSTITUTO CAPIXABA DE PESQUISA E EXTENSÃO RURAL
  (INCAPER)
• UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA
• LABORATORIO THONSOM DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
  UNICAMP
• MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E
  ABASTECMENTO (MAPA)

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• 25da produção mundial
• 1.5 milhões de ton./ano (FAO, 2002)
• Nordeste e Sudeste são as principais regiões
• da produção nacional
• Espírito Santo - 420.500 ton/ano
• Bahia 860.000 ton/ano
• Rechaço de frutos no mercado internacional
• Diferenças nos Limites Máximos de Resíduos (MRLs
  )
• Brasil 3,0 mg kg-1
• Estados Unidos 10,0 mg kg-1
• União Européia 0,05 mg kg-1

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A produção de mamão requer o uso constante de
fungicidas e mancozebe é o mais importante

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ANÁLISE DE RESÍDUOS DE DITIOCARBAMATOS

• Faz uso de métodos indiretos baseados na
  quantifcação de CS2 gerado numa hidrólise ácida

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ANÁLISE DE RESÍDUOS DE DITIOCARBAMATOS

• Problema é a formação fitogênica de CS2 na
  cultura analisada
• Algumas espécies podem alcançar os LMR

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SISTEMA GLICOSINOLATO/MIROSINASE NAS PLANTAS
Glicosinolatos são compostos derivados de uma
oxima contendo enxofre Nas plantas são
acompanhados por uma enzima hidrolítica,
mirosinase. Acredita-se que detêm herbívoros e
patógenos. Característicos de todas as
Brassicaceae mas ocorrem em outras famílias
(Akaniaceae, Bataceae, Brassicaceae,
Bretschneideraceae, Capparaceae, Caricaceae,
Gyrostemonaceae, Koeberliniaceae, Limnanthaceae,
Moringaceae, Pentadiplandraceae, Resedaceae,
Salvadoraceae, Tovariaceae, and
Tropaeolaceae). Fonte Rodman, J.E. et al.
American Journal of Botany 85 (7) 9971006.
1998.
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FORMAÇÃO DE NITRILA E ISOTIOCIANATO A PARTIR DE
GLICOSINOLATOS
Danos aos tecidos da planta ativam a enzima
mirosinase que hidrolisa o glicosinolato
Um intermediário instável perde sulfato e sofre
rearranjo não enzimático para ITC, TC ou Nitrila
Nitrila é favorecida a baixo pH e em meio neutro
é favorecida a formação de isotiocianato
Esses produtos de degradação dos glucosinolatos
funcionam como aleloquímicos na proteção das
plantas.
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DECOMPOSIÇÃO DE ISOTIOCIANATOS
Pechácek, R. et al. J. Agric. Food Chem. 45,
4584-4588, 1997
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AREAS DE EXPERIMENTAÇÃO EM CAMPO
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EXPERIMENTOS DE CAMPO
Mudas obtidas a partir de sementes sem qualquer
tratamento com agroquímicos sulfurados
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EXPERIMENTOS DE CAMPO
Aspecto da cultura , Junho 2003, Teixeira de
Freitas Sunrise Solo e Golden
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EXPERIMENTOS DE CAMPO
Cultivar Golden, Janeiro 2003, Barreiras,
BA
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EXPERIMENTOS DE CAMPO Áreas de reflorestamento
e pastagem vizinhas a parcela do mamão,
Linhares, ES

• B

• A

• D

• C

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ANÁLISE

• Três métodos analíticos foram utilizados
• espectrofotométrico, headspace, partição
  isooctano
• Unidades de frutos inteiros
• Cortados e homogeneizados
• Fração dos frutos
• polpa, casca e sementes

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CONCENTRAÇÃO MÉDIA DE CS2 EM AMOSTRAS DE MAMÃO
CONTROLE (mg kg-1)
Cultivar Local Isooctano Headspace Espectro fotométrico
Golden Barreiras 0,030,03 - 0,500,66
Golden Linhares 0,030,02 0,210,25 0,790,31
Golden Cruz das Almas 0,210,15 - -
Golden Teixeira de Freitas 0,020,02 0,060,03 -
Tainung Barreiras 0,010,02 - 0,240,25
Sunrise solo Cruz das Almas 0,020,01 - -
Sunrise solo Teixeira de Freitas 0,020,01 0,030,02 -
n 3 a 18
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PROBABILIDADE DE SE OBSERVAR CONCENTRAÇÕES DE
CS2 ACIMA DE 0.05 mg kg-1
Assumindo uma distribuição normal, essas
probabilidades seriam 35 para o método do
isooctano 61 para o método de headspace 88
para o método espectrofotométrico Pela
distribuição da probabilidade empírica acumulada
seriam 12 para o método do isooctano, 55
para o método de headspace 94 para o método
espectrofotométrico
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55 método headspace
12 método isooctano
De 16 amostras analisadas somente uma lt0.05 mg
kg-1
94 método espectrofotométrico
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CROMATOGRAMAS DE EXTRATOS EM ISOOCTANO DE
SEMENTES (A) E CASCA (B) DE MAMÃO MONITORANDO O
ION DE MASSA 76
B
A
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COMPOSTOS SULFURADOS IDENTIFICADOS NAS FRAÇÕES DE
MAMÃO CONTROLE DA CULTIVAR GOLDEN
Compostos Tempo de retenção (min) Tempo de retenção (min) Tempo de retenção (min) Tempo de retenção (min)
Compostos Sementes 1 Sementes 2 Casca 1 Casca 2 Casca 1 Casca 2
sulfeto de carbonila 1.27 1.26 - 1.26
dimetil sulfeto 3.15 3.12-3.16 3.06 3.06-3.13
dissulfeto de carbono 3.60 3.57 3.51 3.57
2-metiltiofeno 9.33-9.34 9.33 - 9.27
3-metiltiofeno 9.35-9.37 9.35 - -
2-etiltiofeno 11.72 - - 11.83
3-etiltiofeno 11.85 11.88 11.69-11.85 11.78-11.81
benzonitrila 15.35 15.39 15.45 15.34
benzilisotiocianato 19.99 19.87 20.93 -
benziltiocianato 27.87 27.87 27.94 27.83
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RESÍDUOS DE DITIOCARBAMATO EM MAMÃO EXPRESSOS EM
CS2 (mg kg-1), APÓS APLICAÇÕES DE MANZATE
Cultivar 0 DAT 0 DAT 3 DAT 3 DAT 7 DAT 7 DAT 14 DAT 14 DAT
Homog. picado homog. picado homog. picado homog. picado

Golden 2.30.8 1.70.5 2.21.3 1.40.6 1.90.7 1.00.4 1.40.4 1.10.4
Golden 4.71.1 3.71.3 2.00.9 1.71.2 3.81.3 3.43.4 2.00.4 4.45.5
Golden 2.70.8 1.80.5 1.30.3 1.00.6 0.80.3 0.60.1 0.50.2 0.50.1
Golden 3.50.9 4.61.3 3.00.5 3.61.5 2.40.8 2.81.4 1.70.8 2.01.1

Tainung 1.00.6 0.90.7 1.80,1 0.90.4 1.50.3 1.61.5 1.00,2 2.33.3

Sunrise 5.12.0 4.91.0 2.81.1 3.51.1 2.80.6 2.90.6 1.60.6 1.30.5
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DISCRIMINAÇÃO ENTRE CS2 ENDÓGENO E RESÍDUOS
VERDADEIROS DE DITIOCARBAMATO

• Estabelecida uma função de classificação que
  melhor discriminasse entre as amostras que
  receberam e que não receberam tratamento com o
  fungicida.
• A função de classificação foi obtida pelo uso
  conjunto das distribuições da probabilidade
  empírica acumulada das amostras tratadas e não
  tratadas com ditiocarbamato.
• A qualidade dessa função de classificação foi
  avaliada através de uma matriz de erro e com a
  estatística (KHAT).

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DISCRIMINAÇÃO ENTRE CS2 ENDÓGENO E RESÍDUOS
VERDADEIROS DE DITIOCARBAMATO

• Mamão tratado com ditiocarbamato
• buscar um valor de corte, acima do qual estaria a
  maioria dos resultados
• Mamão controle
• buscar um valor de corte, acima do qual estaria a
  minoria dos resultados
• Para encontrar o melhor valor de corte, ambas as
  restrições devem ser atendidas simultaneamente.

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DISCRIMINAÇÃO ENTRE CS2 ENDÓGENO E RESÍDUOS
VERDADEIROS DE DITIOCARBAMATO

• Do nosso conjunto de dados o valor da
  concentração de CS2 que atende essas restrições
  está entre 0.34 e 0.39 mg kg-1 de CS2.
• Nós adotamos o valor central de 0.365 mg kg-1
• 0,98873

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EFEITO DO TRATAMENTO COM AGROQUÍMICOS SULFURADOS
NA CONCENTRAÇÃO DE CS2 - MAMÃO GOLDEN E SUNRISE
SOLO
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DISCRIMINAÇÃO ENTRE CS2 ENDÓGENO E RESÍDUOS
VERDADEIROS DE DITIOCARBAMATO

• Inclusão de dados do tratamento do mamão com
  sulfocal
• 0.8944
• O valor de corte é razoavelmente adequado, porém
  haverá um numero de falso positivo

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CONCLUSÃO

• Carica papaya L.
• gera CS2 a partir de compostos endógenos
• considerado o método de partição em isooctano,
  para valores lt0.36 mg kg-1 as concentrações de
  CS2 podem ser confundidas como sendo resíduos de
  ditiocarbamatos.

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