Coliformes, Coliformes Fecales and E. coli

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Coliformes, Coliformes Fecales and E. coli

• Laboratorio de Microbiologia de Alimentos

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Coliformes

• Aerobicos y facultativos anaerobicos
• Gram negativo
• No formadores de esporas
• Forma de bacilo
• Fermentan lactosa, con produccion de acido y gas
  dentro de 48 hr a 35 C

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Coliformes- Porque son importantes

• Organismo indicador (no necesariamente un
  patogeno)
• Coliformes fecales
• Potencial contaminate en carne
• Patogeno potencial
• Enterobacter en formula de infantes
• Coliformes no fecales agua, suelo, ambiente

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Métodos para Detectar Coliformes

• MPN
• Basado en probabilidad estadistica
• NO es contaje directo
• Técnica líquida
• Sólido
• Contaje directo en medio

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Coliforms
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MPN - Continuación

• El objetivo es diluir el organismo
• Seleccione la muestra más diluída con todos los
  tubos positivos y los próximos dos
• 3,2,1 Nuestra combinación
• Determine el MPN utilizando la tabla de MPN

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Coliformes
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MPN

• Puede tambien utilizarse 5 tubos para MPN
  Aumenta la exactitud
• EXACTITUD Cuan cercano a los valores reales
• PRECISION Cuan cercano son los números uno al
  otro
• Asegúrate de usar la tabla apropiada

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Se asume en MPN

• Distribución al azar de la bacteria
• Los organismos no se aglutinan
• Si hay un microorganismo presente, crecera
• Existen las condiciones apropiadas para crecer

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Ventajas sobre el uso de placas

• El tamano de la muestra puede ser mayor
• Mejor para números bajos de organismos
• El medio líquido es más suave para el organismo
  porque no se expone al calor
• Requiere preparación de medio con antelación

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Medio - LST

• Lauryl Sulfate Tryptose Broth
• Prueba PRESUMPTIVA para coliformes
• Se informa como presumptive coliforms/g
• Ingredientes
• Lauryl Sulfate Algunas bacterias no pueden
  crecer - Selectivo
• Lactosa Producción de gas Diferencial
  w/durham tubo
• NaCl Aumenta razón de reproducción
• Tryptona Fuente de Nitrógeno
• Incube a 35 C por 48 horas

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Medio - BGLB

• Brilliant Green Lactose Bile
• Incube a 35 C por 48 horas
• Producción de gas Positivo
• Ingredientes
• Oxgall forma de bilis
• Brilliant Green Dye Inhibe Gram
• Resultados son coliformes confirmados
• No utilize BGLB directamente Altamente
  inhibitorio

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Medio EMB Agar

• Eosine Methylene Bule Agar
• Placas ya servidas
• Estriado para aislar del MPN
• Ingredientes - Diferencial
• Peptona Proteina
• Lactosa Produccion de acido
• Tinte Eosine Inhibitorio
• Azul de metileno Indicador de pH
• E. coli and Enterobacer
• Nucleated, dark centered, with or without a
  metallic green sheen CONFIRMED COLIFORMS

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Coliforms
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Coliforms
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Método Sólido

• VRBA
• Violet Red Bile Agar
• Peptone Nitrogen Source
• Lactose Acid Production
• Neutral Red Indicator (6.8 red, 8.0 yellow)
• Crystal Violet Inhibits Gram
• NaCl Increase Growth Rate
• Bile Salts

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VRBA

• Típica Rojo-púrpura, Colonias Elípticas, puede
  ser una zona de precipitación
• Se recomiendan placas con 10-100 colonias
  Colonias más grandes
• Ponga una capa de agar luego que la primera
  solidifique
• Resultados Presumptive Coliformes

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Coliformes