Identification d’entйrobactйrie sur microgalerie - PowerPoint PPT Presentation

Title: Identification d’entйrobactйrie sur microgalerie


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Identification dentérobactérie sur microgalerie
Cupule
Microplaque de 96 puits
2
Préparation de la microplaque
Introduire à laide dune micropipette, dune
pipette graduée stérile de 1 mL ou dune pipette
Pasteur 200 µL (soit 4 gouttes) des différents
milieux dans les cupules, à proximité du bec
bunsen (dans la zone de stérilité).
3
Microgalerie avant ensemencement
aa
Cupules didentification pour une souche
Composés carbonés
4
Ensemencer avec löse ou avec la pipette Pasteur
stérile, chaque série de cupules avec la même
souche bactérienne. Ici 3 souches différentes
peuvent être étudiées en même temps.
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Microgalerie après culture de 24 heures à 37C

• Pour identifier lensemble des caractères
  biochimiques de ces différentes souches, il est
  nécessaire de pratiquer des tests complémentaires
  pour mettre en évidence
• La NR
• La production dindole
• La TDA
• La fermentation du glucose par la voie du butane
  diol

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Lecture de la 1ère partie de la plaque
H2S
ONPG
ADH
LDC
ODC
CIT

-
-
-



/-



/-
INO
SOR
SAC
MAN
RHA
MEL
-


-
-


-

-


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Lecture de la 2nde partie de la plaque
IND
VP
GEL
URE
TDA
GLU
1 gtte ?naphtol et NaOH
1 gtte FeCl3
1 gtte Kovacs
-
-

-
Identifier la souche par la méthode délimination
successive. Comparer avec lidentification
numérique donnée dans la livre API 20E.
1 gtte Nit 1 et Nit 2
BNit
AMY
-

-
-
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Identification des différentes espèces
dEnterobacteriaceae


Klebsiella pneumoniae

Serratia marcesens

Salmonella gallinarum
9

Citrobacter freundii
E coli



Klebsiella pneumoniae
10
Lecture des microplaques
Proteus vulagaris
Salmonella spp
Salmonella gallinarum
11
Proteus mirabilis
Providencia Stuartii
Salmonella spp