Etude de deux sous-classes de g

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Etude de deux sous-classes de gènes PR-10 chez le
pommier induction par des facteurs abiotiques
et par lagent de la tavelure Venturia inaequalis
UMR Pathologie Végétale 77 Université-INRA-INH
ANGERS
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Plan de la présentation
1. Généralités sur la famille PR-10 chez les
plantes
2. Connaissances actuelles chez le pommier
3. Résultats
-Caractérisation de deux sous-classes de gènes
PR-10 -Induction par différents stress
abiotiques et par V. inaequalis
4. Conclusions et perspectives
3
La famille PR-10

• Famille multigénique
• Protéines PR acides intracellulaires
• Poids moléculaire 16-19 KDa
• Caractère allergénique
• Bet v 1 (pollen bouleau)
• Mal d 1 (pomme)
• -Induction par des stress abiotiques ou biotiques
• -Expression variable avec les stades de
  développement
• -Fonctions suspectées
• Activité ribonucléase?
• Activité protéine-kinase?
• Protéines de liaison à des cytokinines?

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Les protéines PR-10 du pommier connaissances
actuelles
-Identification et régulation du gène AP15 1,2
(fruits matures et feuilles)
-Travaux liés aux allergies Mal d 1 et isoformes
3 Relation allergie/ accumulation PR-10
/cultivars pommier
-Identification de 4 transcrits AP1 à AP4
4 (feuilles semis Golden Delicious x Granny
traitées par un activateur de résistance)
2 Pühringer et al. 2000
1 Atkinson et al. 1996
3 Vanek-Krebitz et al. 1995
4 Ziadi et al. 2001
5
Représentation des séquences génomiques
6
Représentation schématique des séquences
protéiques
P-loop
1
159
Signature PR-10
P-loop
1
159
Signature PR-10
P-loop
1
159
Signature PR-10
AP2
APb
P-loop
7
Expression constitutive des gènes PR-10
8
Induction de lexpression après application dASM
1 mM
Au niveau transcriptionnel
Au niveau traductionnel
24 h
8 h
48 h
H
H
H
A
A
A
APa
9
Induction de lexpression après application dASM
1 mM
Induction au niveau local et systémique
APa
10
Localisation in situ des protéines PR-10
Induction de lexpression après application dASM
1mM
A p
C y
200 nm
25 µm
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Induction de lexpression après application dun
générateur déthylène
Application foliaire déthéphon 1 ou 10 mM
12
Induction de lexpression en réponse à un stress
mécanique
Blessure des limbes
8 h
24 h
48 h
T
T
B
B
B
T
APa
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Induction de lexpression par V. inaequalis
Accumulation des transcrits après contamination

cv. Golden Delicious (Vg) / interaction
compatible (C race 1-souche 104) ou
incompatible (IC race 7-souche 1066)
Apa
14
Induction de lexpression par V. inaequalis
Analyse protéique à 44h et 166h après
contamination
cv. Golden Delicious/ interaction compatible (C
race 1-souche 104) ou incompatible (IC race
7-souche 1066)
166h
Apa
18KDa
17 KDa
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Conclusions
Induction significative de lexpression dune
sous-classe de gènes PR-10 chez le pommier
-par des analogues dhormones végétales (acide
salicylique, éthylène) et par blessure
-par V. inaequalis en situation compatible ou
incompatible
Incompatibilité (7 j après contamination) Acc
umulation plus importante des transcrits et
protéines Apparition des symptômes de
résistance
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Voies de signalisation chez les plantes
(daprès Pieterse and van Loon 1999 modifié)
Blessure
Infection par un agent pathogène
Nécroses
Production dAJ et C2H4
Production dAS
Protéines PR inductibles par lAJ/C2H4
Protéines PR inductibles par lAS
Protéines PR inductibles par différentes voies
de signalisation
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Perspectives
AP1 (sous-classe APa) AP2 (sous-classe APb)
Production de protéines recombinantes
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Perspectives
AP1 (sous-classe APa) AP2 (sous-classe APb)
Production de protéines recombinantes
Synthèse danticorps monoclonaux/polyclonaux
Analyse fonctionnelle Activités
RNase? Protéine-kinase? CBP?
Expression et localisation cellulaire/tissulaire a
près infection par V. inaequalis
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Contributions
UMR pathologie végétale 77
Claire Campion Pascal Poupard Philippe
Simoneau Isabelle Pontais (DEA) Smaïl Ziadi
(thèse)
Université dAngers, UFR Sciences
Luciana Parisi Jacqueline Gaudin
Unité de pathologie végétale
Robert Filmon (Microscopie électronique, Faculté
de Médecine, Université dAngers)
Agnès Marot, Raymond Robert (Production
danticorps,Faculté de Pharmacie, Université
dAngers)