Prsentation PowerPoint

1
Un organisme modèle en biologie du développement
lembryon de poulet
Le développement du tube neural au niveau de la
future moelle épinière
Progéniteur neural
Ectoderme non neural
1,5J
3J
Tube neural
Neurone différencié
Chorde
Analyse de lexpression des gènes et des
protéines dans le tube neural
Technique dhybridation in situ (détection des
ARNs) Technique dimmnunohistochimie (detection
des protéines)
Pax6 protéine
Pax6 transcrit
2
Analyse de la régulation ou de la fonction des
gènes par transgénèse transitoire
Technique lélectroporation in ovo
ADN
EGFP
_

-
Tube neural
Electrodes
Un exemple la régulation de Pax6 par Neurogenin 2
Neurogenin 2
Pax6
Protocole expérimental

• électroporation des embryons dans loeuf
• re-incubation des ufs à 37C (pendant 6h)
• prélèvement des embryons fluorescents
• fixation des embryons (2h, pour préserver les
  tissus, protéines, ARNs..)
• sections transversales des embryons au vibratome
  (après inclusion en agarose)
• immunodétection (2J) ou hybridation in situ (3J)
• montage des coupes entre lames et lamelles
• - observation du résultat au microscope

Résultat
Neurogenin 2
Fabienne PITUELLO pituello_at_cict.fr Sophie
BEL-VIALAR belviala_at_cict.fr 05 61 55 67 39