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1Vivre et survivre au froid adaptations
moléculaires
Laboratory of Biochemistry Belgium
Gembloux Aout, 2007
2(No Transcript)
3 Types dadaptation au froid
1- Adaptations moléculaires permanentes
vie active
2-Résistance à la congélation vie active
3-Tolérance à la congélation dormance
4 Arrhenius law
kA. (exp) Ea/RT
Q10VT10/VT
5(No Transcript)
6Cold Enzymes Investigated From Antarctic
bacteria, yeast and fishes
Extracellular Intracellular - Alkaline
phosphatase - DNA ligase - a-amylase -
b-galactosidase - Cellulase - Phosphoglycerate
kinase - Elastase - b-lactamase - Lipase -
Ca2-Zn2 protease - Subtilisin - Trypsin -
Xylanase
7Cold Adaptation
PPA
AHA
8Monomers of b-galactosidases
P. haloplanktis E. coli
Domain 1
Domain 2
Domain 4
Domain 3
Domain 5
9a-amylase multiple mutants
T232V
Q58C
A99C
N150D
K300R
V196F
Q164I
10Kinetic parameters at 25C and melting
temperatures of multiple mutants of
cold-adapted a -amylase
Tm(C ) kcat (sec-1) Km (mM)
AHA 44.0 697 234 Mut 5 49.4 308
66 Mut 5CC 51.8 331 86 PPA
1 61.7 291 65 2 65.6
11Mesophilic multiple mutants
D
12 AFGP
ß-galactosyl-1, 3,-a-N-acetyl glucosamine
13(No Transcript)
14 AFP I a- Helix
DT ASDAAAAAALT AANAAAAAKLT ADNAAAAAAT AA
15(No Transcript)
16Principes de la tolérance à la congélation
1-La glace est confinée dans les espaces
extracellulaires
2-La formation de glace est contrôlée par
lorganisme
3-De fortes concentrations en cryoprotecteurs
sont produites
4-Mécanismes de résistance à lanoxie
fermentation ATP
5-Ajustements physiologiques- congélation/décongél
ation
17Types de cryoprotecteurs
Tréhalose
Glucose
Sorbitol
Ribitol
Glycérol
18(No Transcript)
19 Transamination du pyruvate
CH3-CO-COOH NH3-CH(COOH)-CH2-CH2-COOH?
Pyruvate
Glutamate
CH3-CH(NH3)COOH HOOC-CH2-CH2-CO-COOH
Alanine
a-Cetoglutarate
20(No Transcript)