Classe Bio 2

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Classe Bio 2

• Briday Justine
• Joly Sandrine
• Lazzarin Nathalie

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La chromatographie d'exclusion
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Principe

• La chromatographie d'exclusion permet la
  séparation des molécules à travers un gel poreux
  en fonction du poids moléculaire de la protéine.
• En fonction -de la taille
• -de la forme
• -poids moléculaire

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Il existe 2 types de phases

• La phase stationnaire elle est constituée de
  billes de polysaccharide

• La phase mobileelle est constituée d'un éluant
  (eau,tampon pH),il sert à entraîner les molécules
  du mélange.

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Passage à travers la colonne

• Les grosses molécules sont éluées en premier car
  leur volume est supérieur à celui du volume des
  billes.

• Les petites molécules sont exclus en dernier de
  part leur petit volume,elles subissent des
  frottements,leur migration est freinée.

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Durée de rétention dans la colonne

• La durée de séjour dans la colonne augmente
  lorsque le poids moléculaire de la molécule
  diminue

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Choix du type de gel

• Le choix du type de gel est effectué selon le
  domaine de fractionnement.

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Qu'est ce que le domaine de fractionnement?

• C'est la gamme des masses molaires possibles pour
  lesquelles il y a
• -diffusion partielle
• -diffusion totale
• -englobement
• de la masse molaire de la molécule

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Les différents volumes

• Ainsi on note plusieurs volumes lors de la
  chromatographie
• -le volume d'élution de la molécule
• -le volume d'exclusion du gel
  (volume d'élution d'une molécule non retardée par
  le gel)
• -le volume total du gel qui
  correspond au volume des billes.

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Conclusion

• La chromatographie d'exclusion va permettre la
  séparation de différentes molécules selon leur
  taille.