Diagnostic biochimique et gntique des dyslipidmies

1
Diagnostic biochimique et génétique des
dyslipidémies

• A. Sassolas1, C. Marçais3, R. Cartier1,
• S. Bernard2, A. Lachaux4 , Ph Moulin2
• 1.UF Lipides, Biochimie, Hôpital Neurologique
• 2. U 11, Endocrinologie, Hôpital Cardiologique
• 3. Biochimie moléculaire, CH Lyon-Sud
• 4. Pavillon S, Hôpital Edouard Herriot

2
Organisation générale des diagnostics. Le centre
ARCOL.

• ARCOL Comité de coordination des recherches sur
  lathérosclérose et le cholestérol
• Créé en 1988
• But développer les connaissances sur les
  dyslipidémies et leur rôle comme facteur de
  risque majeur dathérosclérose et de maladies
  ischémiques.
• Création des Centres clinico-biologiques (CCBL)
  20 en France.
• Fusion prévue en Juin 2003 avec la SFA.
• Centre Clinicobiologique lyonnais
• Activité 2 centre français en terme dactivité
  et de prise en charge des dyslipidémies
• Travail en réseau avec dautres CCBL, doù
  optimisation des moyens de diagnostic et de
  recherche.

3
ACTIVITE DU CENTRE LYONNAIS

• Le groupe de travail lyonnais regroupe le CCBL
  (U11, UF Lipides Hopital Neurologique, Biochimie
  des lipides CHLS) et certains services de
  pédiatrie
• des liens existent par réseau (hypercholestérolémi
  es) ou avec des laboratoires Inserm certains
  séquençages ont pu être pratiqués grâce à la
  gentillesse de laboratoires lyonnais équipés..
• Le champ dactivité est double
• Diagnostic monogénique des dyslipidémies
  athérogènes ou non.
• Identification des polymorphismes associés au
  risque cardiovasculaire.

4
DIAGNOSTIC des DYSLIPIDEMIES

• Phénotype clinique (HCL, CHR, privé)
• U 11 Pédiatrie Autres
• Phénotype biologique (UF Lipides Neuro)
• Bilan lipidique spécialiséanalyse des
  lipoprotéines par électrophorèse et
  ultracentrifugation, activités enzymatiques,
  recherche de déficit (dosage ELISA, épreuve de
  charge)
• Diagnostic génétique (UF Lipides, CHLS,
  ailleurs..)
• HF (HCF) HTG Dyslipidémies Déficits
• Hypercholestérolémie Hypertrigly- Dyslipidémies
  Déficit en CT, HDL,
• familiale céridémies I,IV,V complexesIII,autre
  s apoprotéines
• Récepteur LDL LPL, ApoE ApoE, apoCIII ApoB,
  ApoA1
• ApoB ,ApoE ApoAV Autres MTP, ABCA1

5
HYPERCHOLESTEROLEMIES

• Mutation sur récepteur LDL
• Séquençage systématique (recherche en réseau)
• Envoi à Paris (P.Benlian) 48 demandes en 2002
• Environ 80 positifs (le plus souvent mutation
  isolée)
• Mutation sur apoB
• B3500 (ArggtGln ou gtTrp)
• Fait à Lyon (Neuro) 3 détectées en 2002 (10 des
  HF)
• B3531, B3405 Paris (rare)
• Polymorphisme de l apoE apoE4
• Allèle e4 hypercholestérolémiant
• Fait à Lyon par PCR-RFLP UF Lipides Neuro

6
HYPERTRIGLYCERIDEMIES

• Hyperchylomicronémie de type I
• Lipoprotéine-lipase (LPL) mutation homozygote
• A Lyon, C. Marçais à Lyon-Sud
• ApoCII (déficit) mutation. (lieu?)
• Hypertriglycéridémie de type V
• LPL mutation hétérozygote
• ApoCIII polymorphisme (C. Marçais)
• ApoAV mutation (C. Marçais)
• ApoE polymorphisme et recherche de mutation

7
DYSLIPIDEMIES COMPLEXESAugmentation importante
de CT et TG

• Dyslipidémie de type III
• Le bilan lipidique est très évocateur.
• Polymorphisme du gène apoE e2/e2
• UF Lipides Neuro 5 e2/e2
• Isoformes de la protéine apoE E2/E2
  (confirmation)
• UF Lipides Neuro
• Dyslipidémies complexes
• Il manque des critères pour le type III
  transmission souvent dominante.
• ApoAV mutation
• Polymorphisme du gène apoE et isoformes de
  lapoE il existe parfois des mutations
  provoquant des anomalies et/ou des différences
• 2 cas détectés en 2002 dissociation
  génotype/phénotype
• séquençage du gène (exons et promoteur) C.
  Marçais (Lyon-Sud)

8
Déficits en cholestérol et apoprotéines

• Déficit en apoA1 et en HDL
• Total Homozygote
• Mutation sur apoA1
• Tangier mutation sur ABCA1 (1 famille
  caractérisée à Lyon)
• Hétérozygote relativement fréquent, athérogène,
  mais non dépisté
• Déficit en apoB et en LDL
• Total homozygote
• Abetalipoprotéinémie mutation sur MTP (en cours
  à Lyon)
• Partiel hypobetalipoprotéinémie
• Fréquent, mais souvent bénin.
• Troncature de lapoB mise en évidence par
  électrophorèse de lapoB tronquée puis séquençage
  à Lyon.
• Déficit mixte en HDL et LDL
• Maladie dAnderson

9
Polymorphismes associés au risque cardiovasculaire

• Etudes autofinancées sur contrat de recherche et
  protocoles CCPPRB
• apoE à la fois diagnostic et facteur de risque
• Facteurs de risque CAV, Alzheimer
• 180 déterminations en 2002
• apoB XbAI, MspI, EcoRI, peptide signal, VNTR
• Lp(a) polymorphisme de taille et risque CAV
• apoCIII hypertriglycéridémies
• MTP diabète et stéatose hépatique
• apoAIV stéatose hépatique
• apoAV hypertriglycéridémies
• CETP , paraoxonase, Taq 1b diabète et risque
  vasculaire

10
Problèmes et perspectives

• Diagnostic des dyslipidémies travail dune
  équipe multidisciplinaire lyonnaise en réseau
  grâce à lARCOL avec dautres centres diagnostics
  ce qui a permis des avancées (apoAV par exemple)
• RLDL à Lyon?
• HypoHDLémie mieux recherchée
• Perspective du PGO
• Unité de nutrition pédiatrique à créer
• Pôle fort de diagnostic génétique des pathologies
  cardiovasculaires au CBE