Diapositiva 1

1
EVALUACION DE LA TÉCNICA DE ELISA INDIRECTA COMO
TEST DIAGNÓSTICO PARA LA DETECCION DE
LEPTOSPIROSIS HUMANA, ICA-LNDV,2006
2
DOCENTE DIRECTOR MARIA CRISTINA VASQUEZ
ESTUDIANTES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTO
EDWARD JOHNNY ZAMBRANO MORA ELIDA MAYERLITH
PINTO SAAVEDRA ENITH CASTILLA GOMEZ
INSTITUCIONES PARTICIPANTES UDES
ICA BIOGENIX
3
INTRODUCCION
4
SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS REPRESENTATIVOS DE
L. Interrogans
SEROGRUPOS SEROVAR (ES)
Australis australis , bratislava , lora
Autumnalis autumnalis , forbragg , bim , weerasinghe
Ballum ballum , aroborea
Bataviae bataviae
Canicola canicola
Celledoni celledoni
Cynopteri cynopteri
Djasiman djasiman
Grippotyphosa grippotyphosa , canalzonae, ratnapura
Hebdomadis hebdomadis , jules , kremastos
Hurstbridge hurstbridge
Icterohaemorrhagiae icterohaemorrhagiae , copenhageni , lai
Zimbabwe  
5
SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS REPRESENTATIVOS DE
L. Interrogans
SEROGRUPOS SEROVAR (ES)
Javanica javanica , poi
Louisiana louisiana , lanka
Manhao manhao
Mini mini , georgia , swajizak
Panama panama , mangus
Pomona pomona
Pyrogenes pyrogenes
Ranarum ranarum
Sarmin sarmin
Sejroe sejroe,saxkoebing,hardjo
Semaranga patoc
Shermani shermani
Tarassovi tarassovi
Pumarola, 1994 Levett, 2001. (Modificado)
6
RESERVORIOS Y SUS SEROVARES
ESPECIE SEROVAR
Ganados y búfalos hardjo, pomona, icterohaemorragiae, bratislava, canícola, tarassovi
Cerdos pomona, tarassovi, bratislava
Perros Canicola,bratislava, pomona, grippotyphosa, icterohaemorragiae
Caballos grippotyphosa, icterohaemorragiae
Pumarola, 1994 Levett, 2001. (Modificado)
7
(No Transcript)
8
EPIDEMIOLOGIA
Los países tropicales y subtropicales son los más
afectados por sus condiciones climáticas.
Precipitación Temperatura Humedad relativa El
pH, estructura La composición de suelo
Son favorables para la presentación de Leptospira.

• La OMS ha estimado una tasa de incidencia en
  humanos entre 4-100 casos por 100 000 habitantes
  en estos países (22).

9
EPIDEMIOLOGIA
La seropósitividad de estudios hechos indican
(2)
El salvador 17.5,
México 14.1,
Colombia 18.5,
Brasil 9.8
Argentina 3.8
10
EPIDEMIOLOGIA
SEROVARES MAS FRECUENTES ENCONTRADOS EN COLOMBIA
TOMADO DE Acosta Helbert, Moreno Carlos Hugo,
Viafara B Daniel. Leptospirosis. Revision de
tema, Colombia médica, Universidad del Valle,
Cali, 1994 25 36-42.
11
TRANSMISION
12
PATOGENIA Y SINTOMAS
FORMA ICTERICA
FORMA ANICTERICA
13
SINTOMATOLOGIA
ANIMAL
14
(No Transcript)
15
(No Transcript)
16
DIAGNOSTICO
TECNICAS O METODOS
DIRECTOS
INDIRECTOS
Observacion de campo oscuro Tinciòn
argenica Tinciòn inmunohistoquimica Deteccion
de acidos nucleicos Aislamiento
MAT Msat Fijación del complemento ELISA Aglutin
ación microscópica Aglutinación en
microcapsula Hemoaglutinación indirecta
17
DIAGNOSTICO
TECNICA DE MICROAGLUTINACION (MAT)
Detectar anticuerpos aglutinantes en
sueros
Enfrentar a Ag (cultivos vivos de
Leptospiras). Se divide en dos etapas
Cualitativa

Cuantitativa Determinar el titulo exacto
de un suero si este contiene anticuerpos contra
Leptospiras,
NEGATIVO
POSITIVO
18
DIAGNOSTICO
MAT
FASE CUALITATIVA
FASE CUANTITATIVA
Determina la presencia de Ac sin precisar el
titulo exacto del suero.
Determina el titulo exacto del suero.
Si se observa el 50 de las Leptospiras
aglutinan se reporta el resultado con un titulo
de 1100
Es la mayor dilución en la que se observa una
aglutinación del 50.
19
DIAGNOSTICO
DESVENTAJAS MAT

• Necesidad de una infraestructura adecuada y de
  personal especializado y entrenado para su
  montaje, lectura e interpretación.
• Mantenimiento continuo de las cepas Ag.
• 7 a 15 días .
  aglutinante
• La selección de los antígenos es un punto de
  vital importancia, cuando se comienza a trabajar
  en una zona donde no se conoce la prevalencia
  serológica.
• Con respecto a los serovares utilizados en cada
  batería no existe estandarización en la selección
  de los mismos. Dif result

20
DIAGNOSTICO
VENTAJAS DEL ELISA
Los laboratorios tienen capacitación,
conocimiento y equipos necesarios para el
procesamiento de una prueba de ELISA . disminuye
los riesgos en Bioseguridad, además en el
mercado se encuentra un kit comercial con un
costo razonable. Elisa IgM se muestra mas
sensible que el MAT en el comienzo de la fase
aguda (11) permitiendo brindar un diagnostico
diferencial oportuno con otras patologías de
origen viral que presentan sintomatología
similar. Por su rapidez la prueba de ELISA
permite una confirmación diagnostica rápida y
segura, útil también en situaciones epidémicas o
brotes, posibilitando dirigir medidas de
vigilancia y control epidemiológico. (Manuel
Céspedes)
21
DIAGNOSTICO
22
(No Transcript)
23
(No Transcript)
24
(No Transcript)
25

• OTROS METODOS SEROLOGICOS
• LeptoTek Dri Dot Ensayo
• Aglutinacion en latex con suero.
• LEPTO Dipstick Ensayo
• Detecta rápidamente anticuerpos IgM específicos
  de Leptospira en sangre total.
• LeptoTek Flujo Lateral Ensayo
• Detecta anticuerpos IgM específicos-Leptospira
  en suero humano o las muestras de sangre total.
• FC y PCR DE LCR

26
DIAGNOSTICO
DIFERENCIAL
27

• FIEBRE AMARILLA
• Duración de la viremia mas corta
• DENGUE
• Intensidad de dolores musculares es mayor en
  dengue
• HEPATITIS
• Inicio de fiebre menos brusco y de menor
  intensidad, desaparece cuando comienza la
  Ictericia
• MENINGOENCEFALITIS
• LCR leucocitosis Meningitis bacteriana
• MALARIA
• Hepatoesplenomegalia y anemia

28
PREVENCION
Y
CONTROL
29

• Protección de trabajadores mediante el uso de
  calzado y vestimentas apropiadas (botas,
  delantal, guantes, antiparras, tapaboca).
• Higiene personal y del ambiente doméstico.
• Impedir el ingreso de animales al interior de los
  domicilios.
• Higiene y desinfección en los locales de ordeñe
  así como de las máquinas o instrumentos.
• Control de roedores.
• Inmunización.
• Antibioticoterapia.

30

• Educación a la poblaciones de riesgo.
• Limpieza y desinfección de los domicilios que se
  inundan con solución de hipoclorito.
• Vacunación de la población canina.
• Vigilancia epidemiológica de las poblaciones
  consideradas de mayor riesgo.
• Educación y difusión de las posibles formas de
  adquirir la enfermedad y como evitarla.

31

• Medidas de prevención, protección y control para
  los animales.
• Realizar el aislamiento de cepas de Leptospira
  spp. en distintas especies para conocer los
  serovalentes involucrados.
• Realizar estudios de reservorios silvestres.
• Realizar estudios epidemiológicos para estudiar
  la evolución de la enfermedad.
• Implementar programas de control de roedores e
  higiene ambiental.

32

• PLAN DE VACUNACIÓN
• Primo vacunación Se vacunan todos los animales
  del establecimiento,
• machos, hembras y terneros.
• 2da. Dosis a los 21 días de la 1ra dosis
• Revacunaciones en forma anual o semestral de
  acuerdo al laboratorio productor.
• Machos vacunar antes de entrar al servicio
  para proteger al rodeo.
• Hembras vacunar antes del servicio y previo a
  la parición.
• Terneros vacunar a los 2 meses de edad y luego
  revacunar.

33
VIGILANCIA
EPIDEMIOLOGICA
34

• Notificación obligatoria ( Brasil, Cuba y
  Uruguay).
• CASO SOSPECHOSO
• a) Caso notificado hasta demostración de lo
  contrario en la epidemiología.
• b) signos y síntomas sugestivos de la Enf mas
• Epidemiología compatible.
• CASO CONFIRMADO
• a) Aislamiento de leptospiras.
• b) Serología positiva mediante la prueba de
  aglutinación microscópica (MAT) 2 mx

35
PREGUNTAS? ? ? ? ? ? ? PREGUNTAS? ? ? ? ? ? ?
36
(No Transcript)
37
(No Transcript)
38
GRACIAS