Diapositiva 1

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LABORATORIO NACIONAL DE DIAGNÒSTICO
VETERINARIO (LNVD)
Marcela Antolìnez
Dra. Maria Cristina Vásquez Directora Practica
Industrial
Facultad de Bacteriología y Laboratorio
Clínico Universidad de Santander UDES
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• BRUCELOSIS
• Rinotraqueitis
  Infecciosa
  
  Bovina (IBR)
• LEUCOSIS BOVINA
• Diarrea Viral Bovina DVB
• Tuberculosis Bovina TBC

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BRUCELOSIS
Enfermedad zoonótica, intracelular, afecta a
diferentes especies de animales domésticos y
silvestres.
Barreras en comercialización de los animales y
sus productos. Altera desarrollo socioeconómico
del sector rural más vulnerable.
Distribución mundial. Incidencia variable de unas
áreas a otras. Algunos países del centro y del
norte de Europa han conseguido su erradicación.
En Sudamérica
y países mediterráneos, (europeos y
africanos) la
Enf. continúa siendo frecuente.
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División BXII. Proteobacteria Clase I
Alphaproteobacteria Orden I
Rhodospirillales Familia II
Acetobacteraceae Género I Acetobacter
Género IX Gluconobacter Orden II
Rickettsiales Familia I Rickettsiaceae
Género I Rickettsia Orden VI
Rhizobiales Familia I Rhizobiaceae Género
I Rhizobium Género II Agrobacterium Familia
III Brucellaceae Género I Brucella
Brucella spp.
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POBLACIÒN SUSCEPTIBLE
C
Consumidores de leche cruda o de subproductos
lácteos o cárnicos contaminados con la Brucella.
Veterinarios, manejadores de ganado, vacunadores,
operarios en matadero.
Población infantil rural y urbana marginal
Microbiólogos, Bacteriólogos, Auxiliares de
laboratorio
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AGENTE CAUSAL Brucella spp.
Gram negativa, Facultativa, Intracelular Capaz de
sobrevivir y multiplicarse en las clls del S.
RE No móvil, No esporulado, No posee
cápsula Variable en su forma (bacilos muy cortos,
cocos o cocobacilos, con una longitud de 0.5 a
0.7 u A por 0.5 a 1.5 L
Crece lentamente en medios aeróbicos
(parcialmente dependiente de tensiones bajas de
CO2) Colonias de tipo mucoso T. Op. crecimiento
37 C, pH entre 6,6 a 7,4. Es catalasa ,
Reacciones bioquímicas según cepa sea lisa o
rugosa A pesar de ser considerado un
organismo fastidioso por sus requerimientos en el
cultivo puede crecer en medios nutritivos
mínimos
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ESPECIES DEL GÉNERO Brucella spp.
Brucella melitensis
Brucella abortus
Especies lisas
Brucella maris
Brucella suis
Brucella neotomae
Especies rugosas
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• Brucella melitensis

Agente responsable de la mayoría de los casos
humanos. Biotipos (1-3) La especie más patógena
e invasiva en el humano. Afecta comúnmente a las
cabras, pero puede afectar a bovinos y cerdos.
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• Brucella abortus

• Principal responsable de la brucelosis bovina
• Ocho biotipos (1-7 y 9)
• Menor patogenicidad para los humanos.
• Afecta principalmente a bovinos, puede afectar a
  búfalos, alces, jabalíes, zorros, caballos,
  ciervos, camellos, perros y cerdos.

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• Brucella suis

Se subdivide en 4 biotipos (1-4). Afecta
principalmente a los cerdos. También puede
afectar a los humanos.

• Brucella neotomae

Afecta a roedores silvestres rata del desierto
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• Brucella ovis

Afecta a ovinos. Estos no se infectan fácilmente
con B. abortus pero pueden portarla y excretarla
40 meses después de la infección

• Brucella canis

Afecta a caninos. Su afección en humanos es rara
vez reportada.
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• Brucella maris

(B. Pinnipediae, B. Cetaceae) no hay reporte de
capacidad zoonótica. Ha extendido el rango
ecológico
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TRANSMICIÒN
RESERVORIO SALVAJE (liebre, rata, jabalí, venado)
RESERVORIO DOMÉSTICO (vaca,
búfalo, cabra, cerdo, oveja)
Contacto Directo
Contacto Indirecto Ambiente
LECHE Y DERIVADOS
Vía inhalatoria
Vía digestiva
INGESTIÓN
HUMANO
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PRINCIPAL Y MÁS COMÚN RUTA DE TRANSMISIÓN
Se adquiere por contacto con secreciones
infectadas producidas durante los abortos o por
ingestión de productos cárnicos o lácticos
contaminados
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BRUCELOSIS BOVINA
Enfermedad reproductiva caracterizada por aborto,
retención de placenta y problemas de fertilidad
en el hospedador principal.
Transmisión B. abortus en Bovinos
VÌA ORAL al lamer fetos y descargas genitales de
abortos partos e ingestión de pastos
contaminados. Exposición in utero o cuando
terneros nacidos de vacas sanas, son alimentados
con calostro o leche de vacas infectadas
Excreción bacterias en descarga vaginal hasta
40 días post exposición y pre-aborto. En
secreciones, excreción masiva , hasta por 15 días
después del aborto. Después de expulsión de
membranas fetales el número de microorganismos
eliminados disminuye. La descarga cesa 2-3 meses
después de la infección. Quedan portadoras que
excretan bacterias intermitentemente por muchos
años
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Produce importantes pérdidas económicas En
Colombia se han estimado alrededor de 44.000
millones de pesos/año.
En los bovinos, puede cursar asintomática o
severa
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La dosis, raza, edad, sexo, tiempo de gestación,
y la resistencia natural a la enfermedad,
influencian la evolución de la infección.
RESISTENCIA / SUSCEPTIBILIDAD A LA INFECCIÓN
Condiciones de supervivencia de Brucella abortus
Suelo frío 48-73 días Agua 8-37 ?C 1-57
días Heces 1-120 días Desperdicios 12?C 1-8
meses Concentrado gt 100 días Lana 12 ?C 110
días
18
DETECCIÒN DE LA INFECCIÒN

• Análisis en suero de hembras gt18 meses. Machos gt
  8 meses
• Serología para animales en movilización (venta,
  exportación, ferias, matadero)
• Si hay reactores positivos aislar y solo
  movilizar para matadero.
• Tomar medidas conjuntas para su control y
  prevención entre Propietario y Veterinario.

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DIAGNÒSTICO
ELISA indirecta en suero y leche en
bovinos ELISA competitiva Fijación de
complemento Rosa de bengala en sueros PCR
(tejidos, leches, cultivos)
Cultivo y pruebas bioquímicas
Biología molecular PCR
Detección directa
ELISAs indirecta y competitiva
Fijación de Complemento
Rosa de Bengala
Detección indirecta
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BRUCELOSIS HUMANA
Síntomas,1 gripe, puede incluir fiebre,
sudoración, cefaleas, mialgias artralgias y
debilidad física. Los sistemas osteoarticulares
son los más afectados, pero en las fases agudas
de la enfermedad, el corazón y el sistema
nervioso se pueden afectar. También puede causar
síntomas crónicos que incluyen fiebres
recurrentes, dolores comunes y fatiga
Transmisión

• Inoculación por cortes o abrasiones de piel en
  contacto con placenta o secreciones vaginales
  contaminadas.
• A través de conjuntivas.
• Inhalación de aerosoles.
• Consumo de leche cruda, derivados lácteos no
  pasteurizados, carne cruda.
• Inoculación accidental de la vacuna animal C19.
  Dosis infectiva 10 a 100 bacterias
• Ha sido sugerida la transmisión sexual .

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BRUCELLAS QUE CAUSAN LA INFECCIÓN EN HUMANOS
Brucella melitensis
Brucella abortus
Brucella suis
Brucella canis
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BRUCELOSIS HUMANA
Sin tratamiento, la tasa de letalidad es menor
al 2 y por lo común, sucede como consecuencia de
la endocarditis. Como la duración de la
enfermedad varía desde una pocas semanas a varios
meses, se necesitan pruebas de laboratorio para
confirmar el diagnóstico clínico.
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DIAGNÒSTICO EN HUMANOS
Cultivo y pruebas bioquímicas
Biología molecular PCR
Detección Aislamiento Sangre o MO
ELISA Competitiva
Fijación de Complemento
Rosa de Bengala
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Definición de caso (OMS) Caso Presuntivo caso
compatible con la descripción clínica, vinculado
epidemiológicamente a casos presuntos o
confirmados en animales o a productos de origen
animal contaminados. Caso Probable caso
presunto con resultado positivo en la prueba de
Rosa de Bengala. Caso Confirmado caso presunto
o probable que es confirmado en laboratorio por
pruebas F.C o ELISA
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TRATAMIENTO La terapia antibiótica óptima está
aún en discusión. Debido a la localización
intracelular de la Brucella, se requiere la
asociación de varios antimicrobianos durante
varias semanas.
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CONTROL Y PREVENCIÓN DE BRUCELOSIS EN
HUMANOS Control y eliminación de la infección de
los reservorios animales. (Resolución ICA
000119) Exigencia de pasteurización de
leche. Métodos diagnósticos sensibles y
específicos disponibles
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CONTROL Y PREVENCIÓN DE BRUCELOSIS EN
HUMANOS Prevención en grupos ocupacionales
capacitación, educación continuada, uso de
equipo de protección. Vacunas en humanos tienen
eficacia limitada. Las vacunas vivas, se asocian
con potencial de reactivación de patogenicidad.
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TÈCNICAS DE DIAGNOSTICO

• Cultivo de especimenes para el aislamiento
  
• Cultivo masivo de bacterias para la preparación
  de reactivos diagnósticos
• Amplificación de DNA por PCR

Cultivos PCR
DIRECTAS

• Rosa de Bengala
• Fijación de Complemento
• Elisa Indirecta
• Elisa Competitiva.

INDIRECTAS
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ROSA DE BENGALA
Antígeno células completas e inactivadas de
Brucella abortus
Tinción con el colorante Rosa de Bengala a pH 3
para favorecer la actividad de la IgG1
Anticuerpos anti Brucella abortus presentes en
suero
Negativa No Formación de la red de aglutinación.
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FIJACIÓN DE COMPLEMENTO
Antígeno Brucella abortus inactivada
Anticuerpos presentes en suero
Complemento factor sérico presente en el suero.
Función lisis del complejo antígeno-anticuerpo.
(Fuente suero de cobayo)
Glóbulos Rojos Ovinos (GRO)
Hemolisina anticuerpos anti- GRO
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Cantidad mínima de anticuerpos detectados 200
ng/ml
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ELISA Indirecta
Antígeno sLPS de Brucella abortus
Cultivos PCR
Anticuerpos anti sLPS Brucella abortus en suero
(o en leche)
Conjugado monoclonal anticuerpo Anti IgG1 bovina
unido a peroxidasa
Revelador Substrato (H2O2) Cromógeno
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Cultivos PCR
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ELISA Competitiva
Detecta TODOS los isótopos y ayuda a diferenciar
entre animal infectado y animal vacunado en
reglamentariamente con C19
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
Es causada por un herpesvirus (BHV - 1)
Es causa también de Vulvovaginitis pustular
infecciosa
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)

• Herpesvirus bovino tipo - 1 Se presenta
• Como enfermedad fatal en terneros nonatos no
  protegidos,
  interesando una o más superficies de
  mucosas del tracto
  respiratorio y gastrointestinal, y
  menos frecuentemente de
  otros órganos(hígado, bazo, timo y
  suprarrenales).
• Con formas abortivas al infectar animales
  preñados no inmunizados.
• Como IBR enfermedad del aparato respiratorio.
• Como vulvovaginitis pustular infecciosa También
  suele provocar pústulas vulvo vaginales, además
  de conjuntivitis, enteritis y encefalitis.

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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
Síntomas

Anorexia, fiebre,
abundantes secreciones nasales y oculares. Baja
producción Láctea
La enfermedad comienza con un estado gripal, con
descarga nasales e inflamación de conjuntiva. En
adultos se limita a la infección de las vías
respiratorias, con complicaciones en los animales
preñados. Estas afecciones respiratorias, hace a
algunos susceptibles a Pasteurella haemolitica,
que causa severas neumonías.
Las neumonías por pasteurellas son enfermedades
muy frecuentes en feedlots, y son las que
provocan mayores pérdidas en el mercado de la
carne.
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
Este virus tiene la característica de mantenerse
en el bovino en forma activa, es decir, sin
causar enfermedad después de una infección
inicial. Pero por problemas de estrés puede
reactivarse y ser nuevamente excretado. Hecho que
sumado a los numerosos reservorios, mantiene la
enfermedad en los rebaños. 
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
De no producirse infecciones secundarias, la
recuperación es rápida.La presencia de IBR en un
rodeo predispone a los animales a la infección
por otros virus y bacterias, especialmente de
Moraxella bovis (causante de queratoconjuntivitis
infecciosa), bacteria oportunista que aprovecha
la enfermedad causada por IBR para instalarse en
la conjuntiva.
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
PATOGÉNESIS Presenta una amplia variedad de
signos clínicos, como consecuencia de la acción
del virus sobre los sistemas respiratorio,
genital, digestivo y nervioso, por lo que se
describen cinco formas de presentación. 
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)

•    Respiratoria.
• La más importante por su elevada morbilidad.
• Fiebre, anorexia, dificultad respiratoria,
  enrojecimiento
  de las mucosas nasal
  es acompañado de secreción, clara al principio y
  luego mucopurulenta.
• En algunos casos, acompañada de conjuntivitis,
  moderada o severa.
• El aborto puede ser elevado en hembras
  gestantes, acompañando
  los signos clínicos o
  hasta tres o cuatro meses después. 

Bovino en fase aguda. Secreción nasal cristalina.
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
PATOGÉNESIS Presenta una amplia variedad de
signos clínicos, como consecuencia de la acción
del virus sobre los sistemas respiratorio,
genital, digestivo y nervioso, por lo que se
describen cinco formas de presentación. 
Genital. Caracterizada por enrojecimiento, adema
y presencia de pústulas o úlceras mucopurulentas
lentas, tanto en la mucosa de la vulva como del
pene. Generalmente no acompañada de aborto. 
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
PATOGÉNESIS Presenta una amplia variedad de
signos clínicos, como consecuencia de la acción
del virus sobre los sistemas respiratorio,
genital, digestivo y nervioso, por lo que se
describen cinco formas de presentación. 
Ocular Puede presentarse sola o acompañada de
la forma respiratoria. Se observa inflamación y
enrojecimiento de la conjuntiva, así como
secreción ocular abundante, al principio clara y
después mucopurulenta. Puede causar opacidad de
la córnea y queratitis. El aborto en algunos
casos es elevado. 
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
PATOGÉNESIS Presenta una amplia variedad de
signos clínicos, como consecuencia de la acción
del virus sobre los sistemas respiratorio,
genital, digestivo y nervioso, por lo que se
describen cinco formas de presentación. 
  Nerviosa. Asociada a meningo-encefalitis,
mayormente en terneros menores de seis meses,
ocasionando ataxia, movimientos frenéticos,
salivación profusa, rechinar de dientes,
postración y muerte.  
Digestiva. Afecta terneros de una a tres semanas,
causando fiebre, dificultad respiratoria y
diarrea, lesiones necróticas de color blanco
aparecen en la mucosa del tracto digestivo. La
enfermedad evoluciona en forma aguda con alta
mortalidad.
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
IMPACTO SALUD PÚBLICA
El hecho de que existan informes de la existencia
de anticuerpos precipitantes en ciertos
individuos puede ser debido a las relaciones
antigénicas existentes entre los virus de la
familia Herpetoviridae
El hombre es refractario de la Enfermedad
Podemos decir que la presencia de Acps
neutralizantes contra el virus VHB 1 esta
limitada a las especies de la familia Bovidae, y
familias cercanas como cervidae la
susceptibilidad a la rinotraqueitis parece estar
limitada al orden de los artiodáctilos con
afinidad especial hacia la tribu de los bovinos
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
DIAGNÒSTICO
La muestra
Suero estéril
Técnicas
Virusneutralización Prueba de referencia
internacional para la cuantificación de
anticuerpos. El sistema utiliza virus de
referencia y cultivo de células vivas, las cuales
son mezcladas con la muestra de suero. (Exigente
en la calidad de la prueba). ELISA I Utiliza
antígeno viral pegado en una placa a la que se le
incorpora el suero problema y una enzima, para
luego ser revelado mediante la incorporación de
un sustrato específico. (Esta admite la
utilización de todos los sueros). Los resultados
del ELISA nos permiten determinar animales
positivos o negativos.
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IBR (RINOTRAQUEITIS VIRAL BOVINA)
DIAGNÒSTICO
Técnicas
Aislamiento viral En caso de encontrarse ante un
cuadro clínico agudo se pueden remitir muestras
al laboratorio para iniciar la marcha virológica
hisopado de conjuntiva y fosas nasales
sangre con anticoagulante (EDTA). Esta
muestra es aconsejable ante un cuadro febril
(viremia).
La muestra
De necropsia tonsilas y ganglios nerviosos
periféricos a las lesiones observadas, cerebro y
ganglio de gasser, ante síntomas nerviosos,
riñón, hígado, bazo y pulmón, sangre para
extracción de suero o colectas de los exudados de
cavidades, feto con membranas.
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LEUCOSIS BOVINA

• Virus
• Puede llegar a infectar a un elevado porcentaje
  
  de los bovinos de un establecimiento.
  Sin embargo
  sólo un bajo número
  de ellos, generalmente
  
  mayores de tres años, pueden desarrollar síntomas
  
  clínicos.
• Enfermedad caracterizada por la presencia de
  
  tumores (linfosarcoma) y es mortal
• Los bovinos infectados que no desarrollan la
  enfermedad clínica constituyen la principal
  fuente de contagio de la infección, puesto que
  son portadores de por vida del virus.

Existen algunas evidencias que las vacas
infectadas y sin síntomas clínicos de la
enfermedad pueden tener una menor producción de
leche y una disminución de la respuesta
inmunológica a otras enfermedades. Además, es una
limitante para la exportación de vacunos y la
comercialización de semen y embriones.
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TRANSMICIÒN
LEUCOSIS BOVINA

• Horizontal o Vertical Bovino a Bovino / Madre a
  Hijo)
• Traspaso de glóbulos blancos (linfocitos)
  infectados con el virus. (
  en sangre)
• Se pueden encontrar linfocitos infectados en
  secreciones y fluidos biológicos (sangre, leche,
  calostro, secreción nasal, saliva, semen y orina
  )
• Riesgo de infección por medio de la realización
  prácticas como extracción de sangre, vacunación,
  castración, descorche, inyección de medicamentos,
  cirugía, palpación rectal y tatuaje entre otras
  que se realicen sin respetar las medidas
  higiénicas.
• Los artrópodos hematófagos parásitos de los
  vacunos (tábanos, mosca brava, etc.) podrían ser
  otra vía de diseminación de la infección. 

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LEUCOSIS BOVINA
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LEUCOSIS BOVINA
DIAGNÒSTICO
Mientras que el diagnóstico de los bovinos con
linfosarcoma es relativamente sencillo para el
veterinario clínico, la detección de los animales
con linfocitosis persistente y de los bovinos
infectados sin signos clínicos requiere de la
ayuda del laboratorio.
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LEUCOSIS BOVINA
DIAGNÒSTICO (Detección de anticuerpos)

• Prueba de inmunodifusión en agar gel (IDA)
• Sencilla y de uso difundido para la detección de
  
  anticuerpos.
• Limitaciones de la prueba
• Detecta la presencia de anticuerpos como mínimo
  seis
  semanas después de la infección.
• No debe ser utilizada para detección de
  anticuerpos un mes antes del parto. Utilizarla
  después de los seis meses de edad ( porque antes
  revela anticuerpos maternos).
• Se necesitan 48 horas para obtener el resultado.
  Actualmente es la prueba oficial de SENASA
  (Servicio de Sanidad Animal y Calidad
  Agroalimentaria) para la certificación de
  establecimientos libres de leucosis (resolución
  337/94) y para la exportación de ganado en pie.

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LEUCOSIS BOVINA
DIAGNÒSTICO (Detección de anticuerpos)

• Enzimo-inmunoensayo (test de ELISA)
• Detectar la presencia de anticuerpos antes que
  IDA.
• Se puede realizar en forma automatizada y el
  resultado se obtiene dentro de las 24 horas.
• Es reconocida como prueba oficial, para la
  certificación de establecimientos libres de
  leucosis.

Para el diagnóstico de bovinos con linfocitosis
persistente se debe hacer el recuento de glóbulos
blancos y la fórmula leucocitaria relativa en la
sangre de los animales con serología positiva.
Aquellos que presenten un marcado incremento en
el número de linfocitos, indicaría mayor
capacidad para dispersar la enfermedad. Este
sería un método complementario de la detección de
anticuerpos para definir la eliminación de
animales infectados.
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LEUCOSIS BOVINA
DIAGNÒSTICO ( Detección de l virus)
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
Esta técnica permite detectar la presencia del
ADN del virus en la sangre con anterioridad a la
detección de anticuerpos. Su alto costo y
complejidad la restringe a ser utilizada en
trabajos de investigación.
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DVB (DIARREA VIRAL BOVINA)
Taxonomía Género Pestivirus Familia Flaviviridae
19. Virus envueltos, esféricos y miden 40 a 60
nm de diámetro. Se componen de una cadena simple
de ARN compactado por una cápside proteica,
rodeada por una membrana fosfolipídica con tres
glicoproteínas ancladas a ella.
56
DVB (DIARREA VIRAL BOVINA)
Hospedador. Los Pestivirus infectan naturalmente
sólo a los ungulados del Orden Artiodáctila.
(porcinos, bovinos, ovinos, caprinos, alpacas,
llamas, camellos, búfalos de agua y rumiantes
silvestres).
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DVB (DIARREA VIRAL BOVINA)
Fuente de infección. La principal fuente de
infección y reservorio del virus en la naturaleza
son los bovinos. Ellos eliminan continuamente
durante toda su vida grandes cantidades del virus
en secreción nasal, saliva, orina, materia fecal,
lágrimas, semen y leche. Los animales con
infección aguda también son fuente de infección
aunque menos eficiente, ya que eliminan el virus
en cantidades más bajas y por cortos períodos
58
DVB (DIARREA VIRAL BOVINA)
Fuente de infección. Transmisión vertical. La
infección transplacentaria ocurre en hembras
susceptibles infectadas durante la preñez. Si el
feto es infectado antes de adquirir competencia
inmunológica (antes del día 125 de gestación,
aproximadamente) desarrollará una infección
persistente, Pese a la eleva tasa de mortalidad
de los animales en su primer año de vida (más de
50), muchos alcanzan la madurez sexual y se
reproducen.
59
DVB (DIARREA VIRAL BOVINA)

• Transmisión horizontal.
• El contacto directo con animales, especialmente
  contacto nariznariz. El contacto directo con
  animales que cursan una infección aguda también
  puede transmitir el virus. Aunque la transmisión
  aerógena no es la principal ruta de transmisión,
  puede tener consecuencias graves cuando cepas de
  alta virulencia afectan a poblaciones
  susceptibles y con alta densidad animal.
• Igualmente la infección se puede dar por contacto
  con
• Semen crudo o criopreservado de toros infectados.
• Transmisión indirecta uso de agujas, mocheta,
  palpación rectal y la acción de insectos
  hematófagos, minutos después de haber estado en
  contacto con animales infectados. (su importancia
  aún no está clarificada, ya que es un virus que
  se inactiva fácilmente)
• Uso de vacunas vivas, semen contaminado,
  cohabitación con ovinos, transferencia
  embrionaria y el contacto con bovinos con
  infección aguda

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DVB (DIARREA VIRAL BOVINA)

• MANIFESTACIONES CLÍNICAS Y PATOGENIA
• El vDVB es responsable de originar un amplio
  rango de manifestaciones clínicas y lesiones como
  resultado de la interacción de factores tales
  como cepa y biotipo viral, edad y estado inmune
  del hospedador, respuesta inmune inducida,
  factores estresantes y otros patógenos
  concurrentes.
• Diarrea viral bovina aguda.
• Infección subclínica.
• Complejo diarrea neonatal bovina.
• Infección aguda severa
• Síndrome hemorrágico
• Inmunodepresión.
• Enfermedades respiratorias.
• Trastornos reproductivos.

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DVB (DIARREA VIRAL BOVINA)
DIAGNÒSTICO
Únicamente aislamiento del virus o detección del
antígeno viral específico
Técnicas

• Aislamiento viral.
• Detección de antígenos mediante
  enzimoinmunoensayo (ELISA).
• Detección de antígenos mediante
  inmunohistoquímica (IHQ).

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TBC BOVINA
Enfermedad infecto-contagiosa crónica causada por
bacterias del genero Mycobacterium.
Es una de las enfermedades más importantes del
ganado bovino, tanto por su impacto en salud
pública como por sus consecuencias económicas
para un país. Su incidencia limita el
desarrollo de la ganadería y sus productos
asociados, incluyendo las exportaciones.
63
TBC BOVINA
IMPACTO SOCIAL
De acuerdo con lo informado recientemente por la
Organización Mundial de la Salud, el número de
casos de tuberculosis, en el hombre, supera los 8
millones al año y va en aumento. Los programas de
control y eliminación de animales infectados,
junto con la pasteurización de la leche, han
reducido drásticamente la incidencia de la
enfermedad causada por M. bovis, tanto en el
hombre como en los animales. Sin embargo, este
patógeno está presente en animales de países en
desarrollo donde no existen medidas de control
adecuadas.
64
TBC BOVINA
AGENTE CAUSAL
Mycobacterium bovis Afecta, además del bovino, a
varias especies animales como caprinos, ovinos
cerdos, perros, gatos, monos y al hombre por lo
tanto es una enfermedad zoonotica. Otras
micobacterias, como el M. tuberculosis (humano) y
el M. avium (aviar), también pueden infectar al
bovino. Las micobacterias son sensibles a los
desinfectantes a base de fenoles, y son
resistentes al medio ambiente y a los
desinfectantes solubles en el agua.
65
TBC BOVINA
SINTOMATOLOGIA

• Generalmente tiene un curso crónico
• Síntomas variados afectados. La pérdida
  progresiva
  de peso y la reducción en
  la producción de leche o
  carne son
  constantes.
• Con alguna frecuencia se observa una tumefacción
  
  no dolorosa de los ganglios
  explorables clínicamente
• Cuando hay infección hepática o intestinal se
  presenta
  diarrea, al igual que infertilidad
  por endometritis
• Algunas veces la tuberculosis pulmonar cursa con
  
  signos respiratorios inespecíficos
  como tos crónica,
  casi nunca
  fuerte, sin mucha fuerza.
• Las lesiones predominan en pulmón y ganglios
  
  linfáticos, en forma de nódulos o granulomas
  o
  tubérculos de material
  purulento-caseoso

66
TBC BOVINA
La eliminación del M. bovis por parte de los
animales afectados es intermitente. Puede suceder
en las etapas tempranas de la enfermedad, cuando
aún no son detectables por la prueba de
diagnóstico. Vía más frecuente (80 a 90) de
infección vía aerógena. Aerosoles, toses y
secreciones de animales enfermos que expelen gran
cantidad de microgotitas que contienen la
bacteria. Vía digestiva (10 a 20 de los
casos) por el consumo de pastos y alimentos
contaminados con secreciones nasales, materia
fecal y orina que contienen el agente causal.
67
TBC BOVINA
Otras vías no usuales pero probables son la vía
cutánea, congénita y genital. Vía congénita
(madre-feto) puede ocurrir hasta en 5 de las
vacas afectadas Vía genital, los toros se
infectan sirviendo vacas con metritis
tuberculosa La transmisión más importante se
produce por medio de la inseminación artificial,
al utilizar semen de toros infectados
68
TBC BOVINA
POR QUÉ CONTROLAR LA ENFERMEDAD?   

• Hay tres razones claves para controlar y/o
  erradicar la TBC
• Porque se transmiten al hombre, principalmente a
  los que trabajan en contacto con animales
  infectados (veterinarios, trabajadores rurales y
  personal de frigoríficos).
• Porque limitan el comercio internacional de
  productos cárnicos y lácteos, influyendo
  negativamente en la rentabilidad de las
  explotaciones.
• Porque estas enfermedades generan importantes
  pérdidas económicas en la producción de carne y
  leche.

69
TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS DIRECTOS
En las plantas de sacrificio la inspección de
canales es una actividad básica en la vigilancia
epidemiológica de la tuberculosis bovina, ya que
es allí donde se detectan en los bovinos las
lesiones macroscópicas que se ven a simple vista.
La presencia de tumoraciones en los diferentes
órganos El foco de necrosis presenta una
coloración amarillenta con apariencia caseificada
y es posible detectar la presencia de calcio
durante la necropsia se perciben como pequeñas
granulaciones blanquecinas que crepitan al cortar
con el cuchillo. También puede observarse
exudado de apariencia purulenta en meninges.
Ganglios medianísticos medios aumentados de
tamaño y múltiples tubérculos pequeños de tipo
caseoso
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TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO

1. Coloración de Ziehl Nielsen identifica la
   presencia de bacilos acido alcohol resistentes,
   no formadores de esporas inmóviles y no
   encapsulados, características del género
   Mycobacterium.
2. Histopatalogía, proporciona resultados
   presuntivos. En cualquiera de las formas en que
   se presenta la tuberculosis, esta se caracteriza
   por la formación de granulomas. Se pueden
   detectar bacilos ácido alcohol resistentes libres
   en el citoplasma de los macrófagos, histiocitos y
   células gigantes de la lesión granulomatosa.

METODOS DIRECTOS
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TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS DIRECTOS
El cultivo bacteriológico proporciona el
diagnóstico definitivo de la enfermedad. Las
micobacterias son aerobios obligados que crecen
en medios sintéticos simples, pero para el
aislamiento primario a partir de muestras
clínicas se requiere de un medio más complejo
como el medio Löwestein-Jensen, o como el medio
Middlebrook. El cultivo dura de 3 a 6 semanas
en desarrollarse, las colonias son pequeñas,
secas y con aspecto escamoso. El material
requerido para aislar el M. bovis debe ser
ganglios, pulmones, hígado, bazo, riñón, pleura o
cualquier otro tejido donde se aprecien las
lesiones características.
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TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Evalúan la Rta mediada por células. El PPD bovino
es un derivado proteico purificado producido a
partir de cultivos inactivados de Mycobacterium
bovis.
Prueba Tuberculinica Cervical Simple consiste
en la inoculación intradérmica de 0,1 ml de PPD
bovina, previa limpieza con un producto
no-irritante, en el tercio medio del cuello,
previo corte de pelo a maquina o tijera en el
lugar de inyección, en una superficie de 5 a 6
cm. La lectura se hace a las 72 horas (más o
menos 6 horas). Las reacciones se consideran
negativas cuando no se observa ni palpa ningún
cambio en la piel del sitio de aplicación y
reactoras cuando es visible y/o palpable un
engrosamiento de 4-5 mm.
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TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Prueba Tuberculinica Ano-Caudal Eesta prueba se
realiza en el pliegue ano-caudal interno a unos 6
cm. de la base de la cola y en el en el tercio
medio del pliegue ano-caudal interno. Esta zona
es menos sensible a la tuberculina que la piel
del cuello. Se inyectan 0.1 ml de PPD bovina,
previa limpieza con un producto no-irritante. La
lectura se hace a las 72 horas (más o menos 6
horas). Las reacciones se consideran negativas
cuando no se observa ni palpa ningún cambio en la
piel del sitio de aplicación y reactoras cuando
es visible y/o palpable un engrosamiento de 4-5
mm.
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TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Prueba tuberculínica comparativa La prueba
intradérmica comparativa se utiliza para la
realización de un diagnostico diferencial entre
animales infectados por Mycobacterium bovis y
aquellos sensibilizados a la tuberculina por
exposición a otras micobacterias. Esta prueba
consiste en la inyección de tuberculina bovina y
tuberculina aviar, previa limpieza con un
producto no irritante, en diferentes puntos del
cuello y en la subsiguiente evaluación de la
respuesta transcurridas 72 horas. Para esta
prueba comparativa la dosis de tuberculina no
debe ser inferior a 2.000 UI de tuberculina
bovina ni a 2.00 UI de tuberculina aviar. La
distancia entre ambas inyecciones debe ser de
aproximadamente 12 a 15 cm. Un animal se
considera positivo cuando en la zona de inyección
de la tuberculina bovina hay una reacción de 4mm
mayor que la tuberculina aviar y se considera
dudoso cuando esa reacción es entre 1 y 4mm mayor
que la tuberculina aviar. El animal es negativo
cuando no hay reacción o cuando la reacción es
igual o menor que la tuberculina aviar.
75
TBC BOVINA
Otras pruebas que estudian la respuesta de tipo
celular detectando la presencia de citocinas
circulantes incluyen
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
La prueba de gamma-Interferón Se realiza con
sangre completa y tiene mayor sensibilidad y
especificidad que la intradermo reacción. Se
emplean los mismos antígenos (PPD) y detecta el
mismo grupo de animales infectados. Las ventajas
con respecto a la intradermo reacción es que el
animal se maneja sólo una vez. Los inconvenientes
son su costo y la necesidad de procesar la sangre
inmediatamente después de su extracción. Prueba
de ELISA Indirecta Detección de anticuerpos
séricos. Posee baja sensibilidad, pero es muy
fiable en la detección de vacas "anérgicas" a las
pruebas de la tuberculina y gamma-Interferón.
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TBC BOVINA
DIAGNÒSTICO
METODOS NDIRECTOS
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Amplificación de secuencias génicas, Su
eficacia radica en la rápida identificación de
patógenos de difícil cultivo. En ese contexto, el
desarrollo de un procedimiento que identifica
directamente M. bovis en muestras de tejido y
secreción proveniente de animales tuberculosos
debe ser el objetivo de todos los países.
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GRACIAS
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(No Transcript)