ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE MIELES Y PROP LEOS Lic. Miriam

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ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE MIELES Y PROPÓLEOS

• Lic. Miriam Iurlina

Departamento de Química Facultad de Ciencias
Exactas y Naturales UNIVERSIDAD NACIONAL DE MAR
DEL PLATA
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COMPOSICION DE LA MIEL

• Carbohidratos (75-80)
• Glucosa y fructosa (monosacáridos reductores,
  85-95)
• Disacáridos sacarosa, maltosa e iso-maltosa
• Oligosacáridos
• Agua (14-20)
• Otros compuestos (1-5)
• Ácidos orgánicos (0.1-0.5)
• Proteínas y aminoácidos (0.2-2)
• Sales minerales (0.1-1.5) y vitaminas
• Enzimas
• Compuestos fenólicos, sustancias aromáticas y
  pigmentos
• Cera, granos de polen

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La miel a través de la historia.alimento,
elixir, medicina

• 1892 ? La actividad antibacteriana de la miel
• 1919 ? Se establece que la miel posee actividad
  antibacteriana
• 1930 ? Tratamiento de heridas con infecciones
  bacterianas
• 1940 ? Estudios de las propiedades biológicas de
  la miel
• En la actualidad
• tratamiento de heridas infectadas, quemaduras y
  úlceras
• desórdenes gastrointestinales
• en el tratamiento de asma
• acción anti-inflamatoria y antioxidante

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• DESDE ENTONCES ...
• Actividad antibacteriana
• Sensibilidad de distintos microorganismos
• Comparar en mieles de distinto origen la potencia
  de su acción inhibitoria
• La naturaleza de las sustancias antibacterianas

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FACTORES RESPONSABLES DE LA ACTIVIDAD
ANTIMICROBIANA DE LA MIEL

• Osmolaridad, baja actividad de agua (aw)

• Acidez, bajo pH

• Sistema glucosa-oxidasa
• 
  glucosa-oxidasa
• Glucosa H2O ½ O2 ------------------? Acido
  glucónico H2O2
• H2O2 -?
  glucosa-oxidasa, catalasa
• 
  iones metálicos y/o ácido ascórbico

• Componentes fitoquímicos aportados por el néctar
  
• Compuestos fenólicos
  Pinocembrina y ácidos fenólicos
• Lisozima Terpenos
  Compuestos volátiles

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• Otros factores que contribuirían a la naturaleza
  antimicrobiana de la miel
• Bajo contenido proteico
• Alta relación carbono/nitrógeno
• Bajo potencial de óxido-reducción
• Viscosidad

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• ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA EN MIELES
• Actividad antimicrobiana total
• Peróxido de hidrógeno
• Compuestos no peróxido de hidrógeno

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• ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA
• Métodos microbiológicos estándar
• Métodos de difusión Métodos de dilución
• Difusión en agar por Macro
  o micro dilución
• discos de papel en
  caldo
• Difusión en agar
  Dilución en agar
• por pocillos

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EVALUACION DE LA ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA EN MIEL

• Actividad antibacteriana total de la miel
• H2O2
• componentes no H2O2
• Método de difusión en agar en placa
• Staphylococcus aureus
• osmotolerante

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ESPECIES MICROBIANAS SENSIBLES A LA ACTIVIDAD
ANTIBACTERIANA DE LA MIEL
Bacterias Gram negativas Escherichia
coli Proteus mirabilis Pseudomonas
aeruginosa Salmonella thyphimurium Salmonella
enteriditis Shigella flexneri Klebsiella
pneumoniae

• Bacterias Gram positivas
• Staphylococcus aureus
• Bacillus cereus
• Bacillus megaterium
• Bacillus pumilus
• Listeria monocytogenes
• Micrococcus luteus
• Streptococcus faecales

Mohos y levaduras Aspergillus sp., Candida sp.,
Penicillium sp., Saccharomyces sp.
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VARIACION EN LA ACTIVIDADANTIBACTERIANA DE LA
MIEL

• Origen floral
• Origen geográfico ? condiciones climáticas
  
• y
  ambientales
• Prácticas de manejo de la colmena

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VARIACION EN LA ACTIVIDADANTIBACTERIANA DE LA
MIEL

• Mieles oscuras ? elevada actividad
  antibacteriana
• Miel de manuka, una arbusto nativo de Nueva
  Zelanda Leptospermun scoparium
• Miel de brezo, miel de Erica spp.
• ? color -- contenido en pigmentos tales como
  
• carotenoides y de
  flavonoides ---- poder antioxidante

• Mieles claras ? baja actividad antibacteriana
• Miel de trébol (Trifolium spp.)

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CARACTERIZACIÓN FISICOQUÍMICA, BOTÁNICA Y
BIOACTIVIDAD DE MIELES ARGENTINAS

• Muestras
• 41 mieles obtenidas desde apiarios, 2003 2005
• Análisis de polen
• Contenido polínico según el método de Loveaux y
  col., 1978
• Determinaciones fisicoquímicas
• color, humedad, pH y acidez total,
  hidroximetilfurfural, actividades de
  glucosa-oxidasa y diastasa
• Actividad antimicrobiana
• Staphylococcus aureus ATCC 25923

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• Aromas suaves a intensos
• Mieles liquidas, cristalizadas (excepción de la
  miel de caatay)
• Análisis de polen
• Mieles mixtas ? tipos polínicos Eucalyptus
  sp., Lotus sp., t. Fabáceas
• Mieles monoflorales ? miel de caatay,
  Helianthus sp., Eucalyptus sp., Lotus sp., t.
  Fabáceas
• Mieles poliflorales

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Características fisicoquímicas de mieles
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Color (420nm), acidez (meqNaOH/kg) y pH para
mieles de Lotus sp., Eucalyptus sp. y Fabáceas.
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Distribución de las mieles mixtas, mono- y
poliflorales de acuerdo a la actividad
antimicrobiana
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• CONCLUSIONES
• Todas las mieles presentaron bioactividad,
  ejerciendo un efecto variable de inhibición del
  crecimiento de S. aureus
• No habría una asociación con la fuente floral.
• No habría una asociación clara entre el color de
  la miel y el potencial de su acción
  antimicrobiana.
• La profundización de este tipo de estudios
  resulta de interés en la búsqueda de mieles de
  alta actividad que podrían ser usadas como
  alternativa natural frente a sustancias
  antimicrobianas.

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• EL PROPÓLEOS, GOMO-RESINA ELABORADO POR LAS
  ABEJAS DE LA MIEL (APIS MELLIFERA L.) A PARTIR DE
  EXUDADOS RESINOSOS DE CIERTOS ÁRBOLES
• FUNCIONES EN LA COLMENA
• fortalecimiento de las celdas
• impermeabilización de la colmena
• bloqueo de grietas y agujeros
• acción antibiótica
• recubrimiento de los cadáveres
• de invasores

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• COMPOSICION DEL PROPOLEOS
• 50-55 de resinas (compuestos polifenólicos)
• 30-40 de ceras
• 5-10 de aceites esenciales
• 5 de polen
• 5 minerales, vitaminas, aminoácidos
• Se detectaron más de 250 elementos constitutivos
  y unos 50 principios biológicamente activos

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PROPIEDADES DEL PROPOLEOS

• Actividades farmacológicas
• antitumorales, anti-inflamatoria,
• antibacteriana, antioxidante, antiviral,
• antifúngica, regeneradora de tejidos,
• inmunomoduladora, analgésico,
• hipotensor y termoestabilizador

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PROPIEDADES DEL PROPOLEOS

• Las propiedades antimicrobianas
• ? fracción polifenólica
• ? flavonoides y ácidos fenólicos,
  cumarinas
• apigenina, kaempferol, pinocembrina,
• galangina, quercetina, y hesperidina.
• Propiedades antioxidantes
• minimizando la peroxidación lipídica y el
  efecto
• de los radicales libres, reducen el
  riesgo de afecciones cardiovasculares,
  previenen el envejecimiento.

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ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL PROPOLEOS

• El propóleos no puede ser utilizado como material
  crudo siendo necesaria su extracción con
  solventes ? preservar la fracción fenólica
• El extracto etanólico de propóleos es el más
  estudiado
• La actividad antimicrobiana -?bacterias Gram
  positivas gt negativas

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ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DEL PROPOLEOS

• El mecanismo de acción ? sinergismo entre
  componentes fenólicos y otras sustancias de la
  resina
• Actividad antimicrobiana de ciertos flavonoides
• Formación de agregados celulares
• Inhibición en la síntesis de ácidos nucleicos
• Cambios en la integridad y funcionalidad de la
  membrana citoplasmática
• Inhibición del metabolismo energético

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Inhibición del crecimiento de Escherichia coli en
presencia de extractos etanólicos y extractos
acuosos de propóleos

• Muestras de propóleos ? Apiarios de la región
  sudeste
• de
  la provincia de Bs Aires
• Extractos de propóleos ? Maceración en una
  solución etanol-agua y en agua destilada
• Actividad antibacteriana ? Disminución de la
  viabilidad de E. coli ATCC 25922 en presencia de
  los extractos se determino por ensayos de
  dilución en agar.

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Disminución de la viabilidad de E. coli con
distintas concentraciones de extractos etanólicos
de propóleos
Extractos etanólicos de propóleos Compuestos
polifenólicos totales --gt 190-250 mg/g de
extracto
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Disminución de la viabilidad de E. coli con
distintas concentraciones de extractos acuosos
de propóleos
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GRACIAS !