Metabolismo del Eritrocito

1
Metabolismo del Eritrocito

• Fundatal 2006

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Eritroblasto
Pérdida del núcleo

• Reticulocito

Pérdida de ARN y mitocondrias
Eritrocito
3
Eritrocito

• Metabolismo reducido

Ausencia de núcleo y ribosomas
Ausencia de mitocondrias
Ausencia de síntesis de proteínas
Ausencia de Ciclo de Krebs
No se produce renovación del stock de enzimas

Glicólisis anaerobia
Agotamiento progresivo de enzimas que limitan la
sobrevida del GR
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VIA EMBDEN-MEYERHOF
Glucosa
Glucosa 6P
Fructosa 6P
Fructosa 1-6P
Reducción Meta Hb
1,3DPG
5
VIA EMBDEN MEYERHOF
1,3DPG
Shunt Rapoport Luebering
PGK
2,3DPG
3PG
PGM
Degradación Nucleótidos y Vías de rescate
2PG
ENOL
PEP
PK
LDH
PIRUVATO
LACTATO
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Funciones del ciclo de EMP
Producción de intermediarios de la glicólisis
anaerobia

• 1. Inicia y mantiene la glicólisis
• 2. Síntesis de GSH
• 3. Activación de ribosa -5P (PRPP)
• 4. Mantenimiento de integridad y plasticidad de
  la membrana
• 5. Mantenimiento de bomba cationes ATPasa dep
• Modulación de la curva de disociación de oxiHb
• 1. Interviene en la reducción de piruvato a
  lactato
• 2. Reducción de MetaHb

ATP
2,3 DPG
NADH
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CICLO DE LAS PENTOSAS
Glucosa
NADPH
NADP
6P-gluconato
Glucosa 6P
G6PDH
NADP
6PGDH
NADPH
Ribulosa 5P CO2
Xilulosa 5P
Ribosa 5P
Fructosa 6P
F6P G3P
Gliceraldehído 3P
()
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SÍNTESIS y REGENERACIÓN DE GLUTATIÓN
Ácido glutámico
Cisteína
ATP
g GCS
ADP
g glutamilcisteína
Glicina
Stress oxidativo
ATP
Glutatión Sintetasa
ADP
G6PD
GSH
G6P
NADP
H2O2
O2
SOD
6PG
NADPH
GSSG
H2O
Glutatión Peroxidasa
Glutatión Reductasa
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CAPACIDAD REDUCTORA
Vía principal

• NAD Cit b5
  Hb
• NADH Cit b5 red Meta Hb

MetaHb R NADHdep
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Vías accesorias
NADP AM oxid Hb NADPH
AM red Meta Hb
5
MetaHb R NADPHdep
NADP GSH dehidroasc
Hb NADPH GS-SG ascórbico
MetaHb
16
GSH R
NADP GSH Hb NADPH
GS-SG MetaHb
GSH R
12
10
MetaHb - prevención - reducción
Glucosa Glu H2O ½
O2 Cys
? GC Catalasa G6P
Gly NADP 2 GSH
H2O2 Hb Cb5 NADH

NADPH
Cb5 NAD
6PG NADP
AzMet
NADPH

NADPH GSSG 2 H20 Hb AzMet
NADP R5P
PRPP G3P
Fe
6PGD G6PD HK
GSSG-R GSH-P (FAD) (Se)
ox red
F1-6DP F6P
Fe
Hemicromos reversibles Hemicromos
irreversibles Cuerpos de Heinz
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VÍA DE RESCATE DE PURINAS
ATP
ATP-asa
ADP
AK
Adenosina Quinasa
APRT
AMP
Adenina
ADP
PPi
ADENOSINA
PRPP
ATP
UMP
PPi
CMP
P5N
Pi
IMP
ADA
H2O
RPPK
AMP
Uridina
NH3
ATP
Citidina
Hipoxantina
Shunt HMP
Inosina
R-5-P
Pi
R-1,5-P2
R-1-P
PRM
PNP
12
ARN ribosomal
ribonucleasa
nucleótidos purínicos
pirimidínicos AMP GMP
UMP CMP
P5N
Pi
Uridina
Citidina
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Anemias Hemolíticas

• Pruebas de laboratorio

14
ANEMIA HEMOLÍTICA Pruebas de Laboratorio

• Objetivos
• Destrucción acelerada de G. R.
• Eritropoyesis acelerada
• Diagnóstico diferencial

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ANEMIA HEMOLÍTICA Pruebas de Laboratorio

• Destrucción acelerada de Glóbulos Rojos
• Vida ½ eritrocitaria con 51Cr ?
• ? Bilirrubina indirecta
• ? LDH
• Signos de hemólisis intravascular

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ANEMIA HEMOLÍTICA Pruebas de Laboratorio

• Signos de hemólisis intravascular

• ? Haptoglobina y hemopexina
• ? Hemoglobina libre en plasma
• Metahemalbuminemia
• Hemoglobinuria
• Hemosideruria
• ? Estercobilinógeno y
  urobilinógeno

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ANEMIA HEMOLÍTICA Pruebas de Laboratorio

• Eritropoyesis acelerada
• SANGRE
• Reticulocitosis
• Policromatofilia
• Macrocitosis
• Punteado basófilo
• Eritroblastos circulantes
• M.O.
• Hiperplasia eritroide
• FERROCINÉTICA
• ? Turn over de Fe

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ANEMIA HEMOLÍTICA Pruebas de Laboratorio

• Diagnóstico diferencial
• Hemograma completo
• Examen del frotis de sangre periférica
• Recuento de reticulocitos
• Prueba de Coombs
• Electroforesis de Hb
• Resistencia osmótica globular
• Autohemólisis
• Test de Ham
• Test de isopropanol

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Déficit de Piruvato Kinasa
20
Déficit de Piruvato Kinasa

• Test de Screening
• Autohemólisis
• Fundamento Hemólisis por anomalía intrínseca del
  GR al someterlo a incubación a 37ºC / 48 hs. con
  y sin agregado de glucosa y ATP
• Resultado
• V.N lt 2.0 en ausencia de glucosa
• lt 0.9 en presencia de glucosa
• Desventaja
• Tiempo (laboratorista)
• No diagnóstico diferencial

21
Déficit de Piruvato Kinasa

• Test de Screening
• Técnica de Fluorescencia

PK
PEP


ADP
PIRUVATO
ATP
LDH
PIRUVATO


NADH H
LACTATO
NAD
Fluoresce
NO Fluoresce
22
Déficit de Piruvato Kinasa

• Test Diagnósticos
• Dosaje cuantitativo de la actividad enzimática de
  PK
• Desventajas
• Existencia de variantes cinéticas con ? afinidad
  por el sustrato (System Low)
• Reticulocitosis
• Biología Molecular

PK
PEP


ADP
PIRUVATO
ATP
LDH
PIRUVATO


NADH H
LACTATO
NAD
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Déficit de
Glucosa-6-Fosfato-dehidrogenasa
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Déficit de G6PDH

• Tests de Screening
• Test Brewer
• Pasos
• Hb (roja) NO2Na ? Hbi (marrón)
• Hbi Azul Metileno NADPH ? Hb NADP
  leucobase
• Desventaja
• No sirve para detección de heterocigotas

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MetaHb - prevención - reducción
Glucosa Glu H2O ½
O2 Cys
? GC Catalasa G6P
Gly NADP 2 GSH
H2O2 Hb Cb5 NADH

NADPH
Cb5 NAD
6PG NADP
AzMet
NADPH

NADPH GSSG 2 H20 Hb AzMet
NADP R5P
PRPP G3P
Fe
6PGD G6PD HK
GSSG-R GSH-P (FAD) (Se)
ox red
F1-6DP F6P
Fe
Hemicromos reversibles Hemicromos
irreversibles Cuerpos de Heinz
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Déficit de G6PDH

• Tests de Screening
• Test Citoquímico

Hb Hbi CNHbi (sol. con H2O2)
NO2Na
HCN
G6PDH
MTT
Formazan insol.
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Déficit de G6PDH

• Tests de Screening
• Electroforesis de isoenzimas de G6PDH

• B normal
• A normal africana
• A- población afroamericana
• Mediterránea población blanca

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Déficit de G6PDH

• Tests diagnósticos
• Dosaje cuantitativo de la actividad enzimática de
  G6PDH
• Biología Molecular

G-6-PDH
G6P NADP 6PG NADPH H
6-PGDH
6PG NADP Ribulosa-5-P NADPH H CO2
29
Hora de despertarse
Muchas Gracias!