CULTIVO CELULAR

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CULTIVO CELULAR

• Proliferación de Linfocitos con Concanavalina A

1065. Inmunología Aplicada Dra. Ana Esther
Aguilar Cárdenas
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Obtención de células esplénicas.
Extracción del bazo
Perfundir con 5 mL de RPMIss
Suspensión celular en tubo de 15 mL
Ratón
Centrifugar 1500 rpm, 10
Decantar sobrenadante
Resuspender en 5 mL RPMIss
Centrifugar 1500 rpm, 10
Decantar sobrenadante
Resuspender en 5 mL RPMIs
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Conteo de Linfocitos
10 mL suspensión 90 mL azul tripano
Dilución 120
Llenar cámara de New Bauer
Realizar conteo de linfocitos (40x)
Ajustar suspensión con RPMIs (106 cel/mL)
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Muestreo en Placas
  Incubar la placa a 37C durante 24 horas.
Realizar las observaciones