DDP Double Digest Problem

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DDPDouble Digest Problem

• présenté par
• Patrick Charbonneau

Cours IFT 6100 Université de Montréal
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Au menu

• Définition des enzymes.
• Définition, origine et utilisation des
  endonucléases.
• Définition et utilisation des cartes de
  restriction.
• Théorie des Cassettes.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Les enzymes

• - Molécules de nature protéique.
• Agissent comme catalyseur en augmentant la
  vitesse de réaction.
• Possèdent une grande spécificité pour le
  substrat sur lequel elles
• agissent.

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Origine des enzymes
La vie a eu plusieurs millions dannées pour
créer ces enzymes. Cest surtout au niveau des
bactéries que ces enzymes ont été créées et
testées. Les enzymes actuelles sont optimales et
ne laissent aucune place à lamélioration.
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Les nucléases
Ce sont des enzymes spécialisées dans la
dégradation des acides nucléiques et ce sont ces
enzymes qui ont permit à la science deffectuer
des découpages non aléatoire de génome in
vitro. Il existe deux grandes catégories de
nucléases caractérisées selon leur mode
d'action. les exonucléases qui dégradent par
excision du nucléotide situé en extrémité de
chaîne. Habituellement, a partir du coté 3. Et
les endonucléases qui coupent des liaisons
phosphodiester à lintérieur même de la chaîne
dADN.
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Les endonucléases
Parmi ces endonucléases, certaines sont non
spécifiques et hydrolysent des liaisons
phosphodiester au hasard, tandis que d'autres
hydrolysent des liaisons phosphodiester
uniquement à lintérieur de site spécifique
reconnue par lenzyme.Autrement dit, cette
dernière est communément appelée endonucléase de
restriction.
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Les endonucléases
Parmi ces endonucléases, certaines sont non
spécifiques et hydrolysent des liaisons
phosphodiester au hasard, tandis que d'autres
hydrolysent des liaisons phosphodiester
uniquement à lintérieur de site spécifique
reconnue par lenzyme.Autrement dit, cette
dernière est communément appelée endonucléase de
restriction.
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Les endonucléases
Parmi ces endonucléases, certaines sont non
spécifiques et hydrolysent des liaisons
phosphodiester au hasard, tandis que d'autres
hydrolysent des liaisons phosphodiester
uniquement à lintérieur de site spécifique
reconnue par lenzyme.Autrement dit, cette
dernière est communément appelée endonucléase de
restriction.
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Les endonucléases
Parmi ces endonucléases, certaines sont non
spécifiques et hydrolysent des liaisons
phosphodiester au hasard, tandis que d'autres
hydrolysent des liaisons phosphodiester
uniquement à lintérieur de site spécifique
reconnue par lenzyme.Autrement dit, cette
dernière est communément appelée endonucléase de
restriction.
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Les endonucléases
On remarque ici que les extrémités sont décalées
et débordantes du cotés 5. Ces extrémités sont
appelées extrémités cohésives car, en raison de
la structure palindromique des séquences de
reconnaissance, elles ont tendance à s'hybrider
en solution, surtout en présence de ligase. Utile
pour la recombinaison in vitro et pour la
construction de molécules chimères.
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Cartes de restriction(cartes physiques)
En utilisant les propriétés des enzymes de
restriction, qui reconnaissent des points précis
du génome au nucléotide près, l'identification
des sites de coupure permet d'établir une carte
extrêmement détaillée appelée carte de
restriction.
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MERCI!!!