Nurul Wiqoyah

1
MEDIA PERBENIHAN

• Nurul Wiqoyah

2
Media perbenihan

• Steril
• Mengandung bahan nutrient untuk pertumbuhan
  kuman
• pH
• Tujuan kultur kuman
• Diagnosis kuman penyebab infeksi
• Uji kepekaan antibiotika/ menentukan terapi
• Komposisi media
• Sintetic media sumber C, N, P, growth factor,
• Non sintetik/ Complex media material bahan alami
  extrak yeast, meat, ekstrak tanaman, blood

3
Media perbenihan

• Pengelompokan media berdasar fungsinya
• 1. Media enriched
• Media kaya dengan penambahan nutrien yang
  dapat
• memperbanyak kuman
• Blood Agar
• Chocolate Agar
• 2. Media Enrichment
• diperkaya bahan yang menguntungkan kuman
  ttt,
• Menghambat kuman lain/ flora normal
• Alkaline Peptone water 25 NaCl

4

• 3. Media differensial
• tambahan bahan yang mampu menseleksi sel yang
  diinginkan tetapi juga membantu mengidentifikasi
  mo tersebut yang memberikan ciri khas koloni
• Eosin Methylen Blue Agar
• indikator warna eosin methylen
  blue
• Gula laktosa dan sukrosa
• lectose fermenter Non lactose
  fermenter
• Mc Conkey Agar
• Mengandung laktosa, indikator warna
  netral red dan
• bahan kimia penghambat kuman Gram
  positif
• Membedakan
• Lactose fermenter Non lactose
  fermenter

5

• Thiosulfat Citrat Bile Salt (TCBS) media
• Thiosulfat dan citrat ,pH tinggi
• hambat enterobacteriaceae
• mengandung sukrosa
• 4. Media selektif
• bahan tertentu yang akan menghambat
  pertumbuhan
• kuman tertentu, tetapi memudahkan kuman
  yang
• diinginkan
• Bahan tambahan meningkatkan
  mikroorganisme yang diinginkan

6

• Salmonella dan Shigella (SS) Agar
• Brillian green bile salt menghambat flora
  normal
• Bismuth Sulfit Agar Salmonella
• indikator bismuth sulfit brilliant
• green hambat Gram positif dan coliform
  
• Disodium phosphat/Na2HPO4
• Fero fosfat /FeO4 untuk produksi H2SO4

7

• Thayer Martin Neisseria
• suplemen 1 vancomycin, kolistin,
  trimetoprim
• suplemen 2 faktor pertumbuhan
• Kuman anaerob
• Chopped Meat / Cooked Meat Media parafin
• Thioglikolat Agar ( mengandung reduktor)
• Media tansport
• Media Stuart
• Anaerob mengandung sodium Thioglicolat
• Amies , Cary and Blair

8

• Menurut bentuknya
• Media padat
• Media agar miring (slant) stok kuman
• Media agar plate untuk memperoleh koloni
  secara terpisah
• (isolated
  colony)
• Media setengah padat
• Uji pergerakan kuman
• Media cair
• perbanyakan kuman
• Uji biokimia

9
STERILISASI DAN DESINFEKSI

• Nurul Wiqoyah

10

• Beberapa istilah
• Sterilisasi suatu cara u/ membebaskan ahan/alat
  terhadap semua bentuk hidup mikroorganisme hingga
  mikroorganisme mati atau tidak mampu tumbuh
• Desinfeksi menggunakan bahan kimia secara
  langsung
• Desinfektan bahan kimia
• umumnya dipakai untuk benda benda mati
• Antiseptik umumnya dipakai untuk benda /
  jaringan hidup

11
Sterilisasi

• Cara sterilisasi
• A. Fisik/ mekanis
• I. Pemanasan
• 1. pemanasan kering/dry heat
• red heat
• Flaming
• Hot Air Oven termostat, suhu 160C selama 1
  jam
• 
  alat gelas, logam, bahan kering
• Sinar infra merah
• alat
  gelas, logam
• 2. Pemanasan basah

12

• II. Radiasi sinar UV 240-280nm efek
  bactericidal maksimum
• merusak asam
  nukleat timin dimer
• kuman Gram
  positif dan negatif
• ruangan
• sinar X, sinar gamma
• Filtrasi serum
• larutan antibiotik
• toksin dll
• pori 0,22 µm
• 0,45 µm
• IV. Cara lain pendinginan, ultrasonic wave
• B. Chemis

13

• Pemanasan di bawah 100ºC
• 1. Pasteurisasi
• 63C selama 30- menit
• 72C selama 20 detik
• Pemanasan basah dengan temperatur 100ºC
• ( boiling) min 10 menit
• Alat kedokteran, alat suntik, tabung dll

14

• Pemanasan basah diatas temperatur 100ºC
• Autoclave (t 121ºC, tekanan 15 lbs, 15- 30 menit
• Medium perbenihan
• Bahan kapas
• Tyndalisasi 100ºC selama 30 menit berturut
  turut selama 3 hari.
• interval 18-20 jam
• ex makanan kaleng, obat suntik
• Inspisator

15
B. CHEMIS

• DESINFEKTAN
• Desinfeksi dengan menggunakam bahan kimia
  Proses penghilangan semua microorganisme sampai
  dosis minimal ( dosis infektif)

16
Cara kerja desinfektan pada kuman

• Gangguan fungsi sel membran kuman
• 1.1. Menyebabkan perubahan permeabilitas
  menurunkan
• tegangan permukaan
• Cation agent
  triton
• Anionic
  agent Triton W30
• 
  
• 1.2. Perubahan permeabilitas membran sel
  akibat denaturasi protein
• Phenol Group lysol,
• cresol,

17

• creolin
• Hydrogen peroksida membentuk radikal bebas
  yang merusak lipid membran
• bakteri dan spora, jamur, virus
• Hydrogen peroksida 6-25 gtgt efektif

18

• 2. Mengganggu kerja ensim
• Logam berat berikatan dengan sulfhidril group
  (S-H)
• Mercurokhrom antiseptik kulit
• HgCl
• 3. Denaturasi protein akibat coagulasi
  presipitasi protoplasma or Menghambat sintesis
  protein
• Alkohol etanol 60-80 poten virucidal
• tidak sporicidal

19

• Chlorin sodium hypochlorite (cair)
• Calsium hypochlorire (padat)
• desinfektan air
• gliserol
• Formaldehyde Formalin 37
• microbicidal activity
  variasi
• Glutaraldehyde
• desinfektan level tinggi
• paling umum untuk alat alat
  medik 2 glutaraldehyd spora B
  anthracis