Leuc

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Leucémies aigues de lenfant
Service dOnco-Hématologie Pédiatrique

• A.Auvrignon
• A. Petit

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Plan

• Généralités sur les leucémies de lenfant
• Epidémiologie
• Mode de révélation
• Examens diagnostiques
• Classification des leucémies aiguës
• Deux risques majeurs
• Syndrome de lyse tumoral
• Neutropénie fébrile
• Leucémies aiguës lymphoblastiques
• Leucémies aiguës myéloblastiques

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Généralités sur les leucémies de lenfant

1. Physiopathologie
2. Epidémiologie
3. Mode de révélation
4. Examens diagnostiques
5. Classification des leucémies aiguës

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Leucémies aiguës

• Définition proliférations clonales de cellules
  hématopoïétiques malignes bloquées à une certaine
  phase de leur maturation.
• Processus malin impliquant un précurseur
  médullaire lymphoïde ou myéloïde
• Ensemble hétérogène de maladies
• Concepts généraux
• Anomalies génétiques acquises
• Activation doncogènes
• Répression de gènes suppresseurs de tumeurs
• ? dérégulation de programmes fondamentaux
  prolifération différenciation sénescence
  apoptose

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(No Transcript)
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Généralités sur les leucémies de lenfant

1. Physiopathologie
2. Epidémiologie
3. Mode de révélation
4. Examens diagnostiques
5. Classification des leucémies aiguës

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EPIDEMIOLOGIE

• 1ère cause de cancer chez lenfant en France
• 450 cas / an (lt 15 ans)
• Répartition
• Par type
• Leucémies aiguës lymphoblastiques (LAL) 83
• Lignée B 85
• Lignée T 15
• Leucémies aiguës myéloblastiques (LAM) 17
• Par âge
• avant lâge de 6 ans
• Avant 2 ans et après 15 ans LAM
• Entre 2 et 15 ans LAL

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(No Transcript)
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EPIDEMIOLOGIE

• Répartition inverse LAL/LAM par rapport adultes
• Formes primitives, rarement secondaires
• Facteurs de risque
• Non identifié
• Rôle du benzène, des radiations
• Chimiothérapies alkylants, Etoposide
• Trisomie 21 LAM(7)gtgtLAL
• Déficits immunitaires
• Infectieux EBV
• Syndromes myélodysplasiques, Fanconi

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Généralités sur les leucémies de lenfant

1. Physiopathologie
2. Epidémiologie
3. Modes de révélation
4. Examens diagnostiques
5. Classification des leucémies aiguës

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CIRCONSTANCES DU DIAGNOSTIC

• Signes dinsuffisance médullaire
• Asthénie, pâleur
• Syndrome hémorragique (surtout LAM3)
• Fièvre, infection
• Signes de prolifération blastique
• Douleurs osseuses, abdominales
• Adénomégalies, hépato-splénomégalie
• ? Médiastin (LAL T), atteinte testiculaire,
  atteinte méningée, infiltration rénale, peau,
  infiltration gingivale (LAM), leucostase

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(No Transcript)
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Généralités sur les leucémies de lenfant

1. Physiopathologie
2. Epidémiologie
3. Modes de révélation
4. Examens diagnostiques
5. Classification des leucémies aiguës

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EXAMENS DIAGNOSTIQUES BUTS

1. Affirmer le diagnostic
2. Evaluer le retentissement
3. Evaluer lextension
4. Affiner le diagnostic
5. Déterminer les paramètres biologiques
   pronostiques
6. Elaborer les outils de suivi

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Affirmer le diagnostic Hémogramme

• Anémie normocytaire arégénérative (quasi
  constante)
• Thrombopénie (souvent lt 20 000)
• Leucocytose variable
• normale (40 )
• lt 4000 GB/mm3 (30 )
• gt 50 000 GB/mm3 (30 )
• Frottis sanguin cellules blastiques présentes
  dans 90 des cas, absentes dans 10

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Affirmer le diagnostic Myélogramme

• Fait le diagnostic
• Précise le type cytologique
• Envahissement massif par des  blastes  (70 -100
  des cas)
• Frottis très riche et monomorphe
• Seuil diagnostique ? 20 BLASTES
• Envahissement partiel biopsie (fibrose)

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CYTOLOGIE DES CELLULES BLASTIQUES

• Cellules jeunes
• Rapport nucléo-cytoplasmique élevé
• Chromatine fine, nucléolée
• Cytoplasme basophile
• Cellules malignes
• chromatine irrégulière
• nucléoles nbx et gros
• cytoplasme souvent vacuolaire

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Affirmer le diagnostic Cytochimie

• PAS (glycogène)
• Positif dans L1 et L2
• Négatif dans L3
• Myélopéroxydase et noir soudan
• Positifs dans la différenciation granuleuse
• Estérases (NASDA) naphtol ASD acétate
  estérases
• Positives dans les lignées granuleuses et
  monocytaires
• Inhibées par le fluorure de Na dans la ligne
  monocytaire (NASDA F)
• Butyrates estérases (BE)
• Spécifiques de la lignée monocytaire

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Evaluer le retentissement Rechercher latteinte
méningée

• Hémostase rechercher une CIVD (LAM3)
• Ionogramme sanguin (K, ac.urique, Ca, Ph) à la
  recherche dun syndrome de lyse tumorale
• Etude du LCR rechercher une atteinte méningée
• LDH évaluation indirecte de la masse tumorale
• Lysozyme sérique ? dans M4, M5

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Affiner le diagnostic Immunophénotypage

• Etude des antigènes de membrane et antigènes
  intra-cytoplasmiques
• Pas de marqueur spécifique de cellules tumorales
• Intérêt diagnostique
• LAL ? LAM0
• LAL B
• LAL T
• Intérêt pronostique
• Maladie résiduelle

Antigène membranaire
Antigène intra-cytoplasmique
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MARQUEURS LES PLUS SPECIFIQUES
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LAL T CD3, CD5, CD10, CD4/CD8 /-, CD19-
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Cytogénétique diagnostic, pronostic

• Principe
• Mise en culture
• Coloration GIEMSA
• Marquage en bandes G (trypsine), R(chaleur)
• Classement des chromosomes par paires
• But
• Visualiser des anomalies de nombre
• Visualiser des anomalies de structure
  translocation

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Cytogénétique diagnostic, pronostic

• Remaniements acquis (clonaux) 2/3 des LA
• gt 5000 anomalies
• Valeur diagnostique concordance avec cytologie
  et immuno-phénotypage
• Importance pronostique et thérapeutique majeure
• Avancées de la biologie moléculaire mise en
  évidence des oncogènes au niveau des points de
  cassure, suivi de la maladie résiduelle

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Chromosome Philadelphie dans LMC
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Cytogénétique moléculaire

• FISH
• CGH Array

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Biologie moléculaire

• Matériels utilisés
• ADN
• ARN
• Techniques utilisées
• PCR
• PCR-Quantitative
• Puces ARN
• Micro Array

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Biologie moléculaire

• Buts
• Etude du réarrangement clonal IgH/TCR
• Diagnostic moléculaire des transcrits spécifiques
  ou pronostiques
• Suivi de la maladie résiduelle

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Identification de transcrit spécifique

• Identification de gènes de fusion
• retrouvés dans ? 30 des LAL dans l enfant
• TEL-AML1 ? t(1221), bon pronostic
• E2A-PBX1 ? t(119)
• BCR-ABL ? t(922)
• MLL-AF4 ? t(411)..

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Généralités sur les leucémies de lenfant

1. Physiopathologie
2. Epidémiologie
3. Modes de révélation
4. Examens diagnostiques
5. Classification des leucémies aiguës

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LEUCéMIES AIGUËS LYMPHOBLASTIQUES (LAL)
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Classification cytologique des LAL French
American British (FAB)
L1 L2 L3
Taille des cellules
petites cellules grandes
cellules grandes cellules

hétérogènes
homogènes Chromatine
homogène
variable et
homogène nucléaire
hétérogène Nucléole non
visible un ou plusieurs
un ou plusieurs Rapport nucléo
cytoplasmique voisin de 1
moyen
moyen
(très peu de cytoplasme

visible) Basophile du
modérée
variable très
intense cytoplasme Vacuoles
non non
nombreuses cytoplasm
iques Commentaires
forme usuelle forme usuelle
type Burkitt
de
l enfant de l adulte