ANALISIS MIKROBIOLOGI AIR

1
ANALISIS MIKROBIOLOGI AIR

• Dr. Nimatuzahroh

2
Tujuan survai dan analisis air secara mikrobiologi

• Untuk mencari, menemukan dan kemudian dapat
  menerangkan penyebab terjadinya pemasalahan di
  dalam badan air
• Untuk membantu menunjang interpretasi hasil
  analisis biokimia yang diakibatkan aktivitas
  mikrobiologis di dalam badan air
• Untuk melakukan penelitian sifat alami air serta
  akibatnya dengan kehadiran pencemar yang kemudian
  pengaruhnya terhadap kehidupan didalamnya
• Untuk melakukan pengukuran terjadinya proses
  purifikasi sendiri dari aliran air dan bagian
  lain dari badan air
• Untuk membantu pemecahan terjadinya mekanisme
  pengolahan buangan yang dilakukan secara
  mikrobiologis
• Untuk penentuan indeks efektifitas pengolahan

3
Hasil survai dan analisis air secara
mikrobiologis dapat diarahkan untuk kepentingan

• Pengumpulan data dasar
• Evaluasi kehadiran pencemar
• Pengontrolan pencemar
• Penunjang dan pendorong aktifitas lanjutan
• Pengawasan kualitas air
• Pengumpulan data untuk pengembangan dan
  monitoring

4
ANALISIS MIKROBIOLOGI AIR

• Harus menggunakan pendekatan ekologis
• Pelaksanaan analisis dilakukan berdasarkan
  modifikasi dari metoda yang didapat di dalam
• Modern Methods in the Study of Microbial Ecology
  (Rosswall, 1973)
• Standard Methods (APHA, 1973)
• Isolation Methods for Microbiologist (Shapton
  Gilbert, 1968)
• Hasil analisis berguna untuk
• Kepentingan pengelolaan lingkungan
• (berhubungan dengan masalah sanitasi, kebersihan,
  kesehatan dan estetika)
• Kepentingan bidang industri
• (pengelolaan buangan limbah dll)

5
METODA ANALISA AIR

• Penghitungan jumlah total mikroba (alga, bakteri,
  khamir dan kapang)
• Total Plate Count (TPC) ? CFU/ml
• Haemositometer (Sel/ml)
• Penghitungan Jumlah Perkiraan terdekat (JPT)/
  Most Probabable number (MPN) ?
• MPN/100 ml
• Penentuan nilai IPB (Indeks Pencemar Biologi)
• Identifikasi mikroba perairan (alga, bakteri,
  khamir dan kapang)

6
METODA ANALISA AIR

• Analisis kondisi perairan secara mikrobiologis
• Pencemaran kotoran manusia
• MPN coliform fecal/non fecal
• Deteksi mikroba patogen
• Pencemaran limbah domistik
• MPN mikroba selulolitik/proteolitik/lipolitik/dete
  rjen
• Pencemaran limbah industri
• MPN bakteri hidrokarbonoklastik
• MPN bakteri pendegradasi logam berat

7
Prosedur bakteriologis yang rutin dilakukan

• Hitungan cawan (plate count)
• Untuk menetapkan jumlah bakteri yang ada
• Uji keberadaan bakteri koliform
• Penggunaan media selektif dan differensial
  digunakan untuk mempercepat deteksi koliform
• Pemeriksaan terdiri dari 3 langkah
• Uji pendugaan (persumtive test)
• Uji penguat (confirmative etst)
• Uji pelengkap (completed test)

8
CARA PENGAMBILAN SAMPEL AIR

• Bahan yang tercampur baik
• Diambil contoh sebanyak 3X_at_100 ml, ditempatkan
  dalam botol Erlenmeyer seteril, dilakukan
  analisis sesuai metoda tertentu
• Pengenceran dilakukan sampai ke nilai tertinggi
  (10n) untuk mendapatkan hasil yang mendekati
  keadaan alami
• Dari sampel yang diambil bisa dilakukan
• A. Pemeriksaan langsung
• (pewarnaan Gram, negatif, tahan asam. dsb)
• B. Pemeriksaan tidak langsung
• (penanaman mikroba ke dalam media umum/selektif
• Analisa dilakukan minimal 5 X ulangan

9
ANALISA UTAMA

• Total Count (TC)
• penghitungan jumlah tidak berdasarkan jenis,
  tetapi secara kasar terhadap golongan/kelompok
  besar mikroorganisme umum seperti bakteri, fungi,
  mikroalga, atau terhadap bakteri tertentu
• TC BAKTERI
• berdasarkan penanaman bahan/sampel dalam jumlah
  dan pengenceran tertentu ke dalam media yang umum
  untuk menumbuhkan bakteri.
• Inkubasi maksimal 4 X 24 jam

10
(No Transcript)
11

• TC FUNGI (kapang dan yeast)
• Metoda penanaman seperti bakteri
• Temperatur inkubasi 28 0C
• Penambahan asam laktat 3 untuk menghambat
  pertumbuhan bakteri
• TC MIKROALGA
• Media yang digunakan bersifat semisolid dengan
  penambahan tepung agar 50 dari yang diperlukan
• Biakan ditempatkan pada tempat yang terang
  dikenai cahaya matahari selama 5 -15 hari
• TC KELOMPOK MIKROORGANISME TERTENTU
• Berbentuk media selektif /pengaya
• Memerlukan waktu yang lebih lama (tergantung pada
  masa adaptasi /aklimatisasi

12
CONTOH

• TC bakteri pereduksi sulfat, bakteri belerang,
  bakteri besi
• TC bakteri patogen, khususnya penyebab penyakit
  perut, seperti (Tifus, paratifus, kolera dan
  disentri)
• TC bakteri penghasil racun khususnya yang
  menyebar melalui air dan mengenai bahan makanan
  yang disebabkan oleh bakteri
• Aerobik ( Pseudomonas, Staphylococcus)
• Anaerobik (Clostridium)
• TC jenis-jenis fungi penghasil mikotoksin dari
  kelompok Aspergillus, Penicillium, dan Fusarium
• dan fungi penyebab patogen

13
MIKROORGANISME SEBAGAI INDIKATOR KUALITAS AIR

• Keberadaan mikroorganisme patogenik dalam air
  bukan merupakan satu-satunya uji untuk menentukan
  aman tidaknya air untuk diminum
• Alasannya
• Mikroorganisme patogen masuk ke dalam air
  kemungkinan besar secara sporadis ? karena tidak
  dapat bertahan hidup lama maka mungkin tidak
  terdapat di dalam contoh air yang diuji
• Bila terdapat dalam jumlah amat sedikit, besar
  kemungkinannya untuk tidak terdeteksi di
  laboratorium
• Hasil pemeriksaan baru dapat diketahui setelah 24
  jam. Jika ditemukan adanya patogen, maka tidak
  dapat melakukan usaha pencegahan bila sudah
  banyak orang yang mengkonsumsi air tersebut

14
MIKROORGANISME INDIKATOR

• Mikroorganisme yang kehadirannya di dalam air
  merupakan bukti bahwa air tersebut terpolusi oleh
  limbah (bahan tinja dari manusia atau hewan
  berdarah panas.
• Terdapat peluang bagi berbagai macam
  mikroorganisme patogenik, yang secara berkala
  terdapat dalam saluran pencernaan untuk masuk ke
  dalam air

15
CIRI PENTING ORGANISME INDIKATOR

• Terdapat dalam air tercemar
• Terdapat dalam air bila ada patogen
• Jumlah mikroorganisme indikator berkorelasi
  dengan kadar polusi
• Mempunyai kemampuan bertahan hidup yang lebih
  besar dari mikroorganisme patogen
• Mempunyai sifat yang seragam dan mantap
• Tidak berbahaya bagi manusia dan hewan
• Terdapat dalam jumlah lebih banyak dari
  mikroorganisme patogen (membuatnya mudah
  dideteksi)
• Mudah dideteksi dengan teknik- teknik
  laboratorium yang sederhana

16
BAKTERI GOLONGAN COLI

• Digunakan untuk mengetahui adanya pencemaran air
• Bakteri golongan koli adalah
• Semua bakteri yang berbentuk batang
• Bersifat aerob/fakultatif aerob
• Tidak membentuk spora
• Bersifat gram
• Dapat meragikan laktosa, serta membentuk gas
  dalam kurun waktu 2 X 24 jam pada suhu 35 oC
• Tahan terhadap lingkungan yang kurang
  menguntungkan
• Penggunaan bakteri golongan koli sebagai
  indikator pencemaran masih perlu dilengkapi
  dengan analisa golongan koli fecal/tinja

17
GOLONGAN BAKTERI FECAL

• Enterobacter
• Enterococci
• Lactobacilli
• Clostridia
• Bacteroides
• Bifidobacteria
• Eubacteria

18
Perbedaan bakteri enterik dan non enterik
ENTERIK ENTERIK NON ENTERIK
Memfermentasi laktosa Tidak dapat memfermentasi laktosa NON ENTERIK
Escherichia coli Salmonella typhimurium Corynebacterium xerosis
Enterobacter aerogenes Shigella dysentriae Micrococcus luteus
Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa Streptococcus lactis
Proteus vulgaris Staphylococcus aureus
Alcaligenes faecalis Bacillus cereus
19
PENGHITUNGAN NILAI JPT/MPN COLI

• JPT Jumlah Perkiraan Terdekat
• MPN Most Probable Number
• Penghitungan kelompok bakteri koli tanpa
  memperhatikan apakah jenis-jenis di dalam
  kelompok tersebut termasuk Koli fekal/FCB (Fecal
  Coliform Bacterial) atau non FCB
• Perbedaan kedua kelompok tersebut dilakukan
  berdasarkan temperatur inkubasi
• Untuk FCB ( 42 1 oC)
• Non FCB ( 37 1 oC)

20
Penghitungan jumlah bakteri koli (Prosedur
tabung ganda)

• Dilakukan dalam beberapa tingkatan
• 1. Pengujian perkiraan
• (Presumtive test)
• 2. Pengujian penegasan
• ( confirmative test)
• 3. Pengujian lengkap
• ( completed test)
• Pengujian perkiraan
• Uji pendahuluan untuk menduga apakah di dalam air
  terdapat bakteri golongan koli
• Dinyatakan () jika terbentuk gas pada tabung
  peragian
• Hasil yang () bisa juga disebabkan bakteri lain
  yang mampu meragikan laktosa dengan menghasilkan
  gas

21

• Pengujian penegasan
• Dilakukan dengan cara meneruskan pengujian
  perkiraan yang positif ke dalam media BGLB
  (Brilliant Green Laktosa Bila Broth) atau dengan
  menanam pada media EMB agar (Eosin Metilen Blue)
  agar dan Endo Agar
• Pengujian lengkap
• Dilakukan untuk meyakinkan hasil uji penegasan
• Pengujian lengkap dinyatakan ()
• Bila terbentuk gas pada medium laktosa broth
• Pada pengecatan Gram ? bersifat Gram (-)
• Bentuk sel batang dan tidak membentuk spora

22
(No Transcript)
23
(No Transcript)
24
(No Transcript)
25
Kekurangan metode penghitungan nilai JPT

• Hanya menggunakan sedikit contoh air
• Membutuhkan waktu beberapa hari untuk mendapatkan
  kultur yang baik
• Hanya mendapatkan jumlah perkiraan secara kasar
• Membutuhkan banyak media dan perlengkapan
• Tidak bisa langsung dianalisis di lapangan

26
PENENTUAN NILAI IPB

• IPB (Indeks Pencemar Biologis)
• BIP (Biological Indeks of Pollution)
• Nilai IPB/BIP suatu perairan dibutuhkan jika air
  dari perairan akan dipakai/dipergunakan sebagai
  bahan baku untuk kepentingan industri, rekreasi,
  dsb.
• Nilai IPB menggunakan rumus
• A Kandungan mikroorganisme yang
  mengandung klorofil
• B Kandungan mikroorganisme tanpa
  klorofil

IPB B X 100 A B
27

• Penghitungan nilai IPB/BIP dilakukan secara
  langsung dengan tidak melalui penanaman yaitu
  pada 500 1000 ml
• Contoh air dipekatkan sampai 50 ml melalui
  penyaringan/sentrifugasi (15.000 rpm)
• Endapan dianalisis kehadiran mikroorganismenya
  dengan menggunakan ruang/kolom hitung (untuk
  mikroalga) dan pewarnaan (untuk bakteri dan fungi)

28
Tabel nilai IPB/BIP Air
NILAI IPB NILAI AIR
0 - 8 Bersih, jernih
9 - 20 Tercemar - ringan
21 - 60 Tercemar - sedang
61 - 100 Tercemar - berat