Clasificaci

1
Clasificación de las anemias hemolíticas

• Hereditarias (desórdenes intrínsecos)
• Defectos en la estructura y función de la
  membrana eritrocitaria SH, EH, etc.
• Defectos en el metabolismo eritrocitario
• En la vía de Embden-Meyergof
• En la vía de las pentosas
• Presencia de hemoglobinas anormales
• Síntesis incorrecta de las cadenas de globina de
  la hemoglobina

2
Clasificación de las anemias hemolíticas (cont.)

• Adquiridas (desórdenes extrínsecos)
• Anemias hemolíticas autoinmunes (AHAI)
• AHAI con anticuerpos calientes
• Idiopática
• Secundaria
• AHAI con anticuerpos fríos
• Idiopática
• Secundaria
• Hemoglobinuria paroxística fría

3
Clasificación de las anemias hemolíticas (cont.)

• Anemias hemolíticas adquiridas (desórdenes
  extrínsecos) (cont.)
• Anemias hemolíticas no autoinmunes (AHNAI)
• AHNAI secundarias
• AHNAI mecánicas
• Anemia hemolítica microangiopática
• Cardíaca
• Hemoglobinuria por la marcha

4
Clasificación de las anemias hemolíticas (cont.)

• Anemias hemolíticas adquiridas (desórdenes
  extrínsecos) (cont.)
• Anemias hemolíticas no autoinmunes (AHNAI)
  (cont.)
• Anemias hemolíticas inducidas por drogas
• Sobredosis
• Exposición accidental
• Idiosincrasia
• Hipersensibilidad
• Hemoglobinuria paroxística nocturna
• Anemias hemolíticas aloinmunes

5
Composición de hemoglobinas normal y en talasemia
Cadenas de globinas Hemoglobina Estado
?2?2 2?2 ?2A?2 ?2G?2 ?2?2 ?2?2 ?2?2 ?A ?A ?2 precipitado A A2 F F Gower 2 Gower 1 Portland H Bart - Adulto Feto Embrión ?-talasemia ? -talasemia
6
Cadenas no ?
Hb
Cadena ?
Cadena G?
Cadena ?
Cadena A?
Cadena ?
7
Cadenas ?-símiles
Hb
Cadena ?
Cadena ?
8
Cromosoma 16
A ?2?2
G ?2?2
A ?2?2
G ?2?2
?2?2
?2?2
?2?2
?2?2
Hb Gower 1
Hb Portland
Hb Gower 2
Hb F
Hb A2
Hb A
Cromosoma 11
9
Cadena de cromosoma 16
Cadena de cromosoma 11
30 31 104 105
?
??
??2
??1
?2
?1
?1
?
G?
A?
??
?
?
10
Desequilibrio de la cadena de globina
Síndromes clínicos de ? -talasemia Normal Rasgo
?-talasémico ?-talasemia intermedia ? -talasemia
mayor
Síndromes clínicos de ?-talasemia Normal Rasgo
?-talasémico Enfermedad de HbH HidropIs fetalis
de Hb de Bart
Expresión ? globina
Expresión ? globina
?
?
?
?
?
?
HbF (?2?2)
HbA (?2?2)
Hb de Bart (?4)
HbF (?2?2)
HbA (?2?2)
HbH (?4)
Exceso de ? globina
Adulto
Feto
Adulto
11
Talasemias y desórdenes relacionados
?-talasemia ?0 Deleción No deleción ? HbA2 normal tipo 1 silente HbA2 normal tipo 2 ??-talasemia (??)0 (A???)0 Hb Lepore(s) A?? HPFH y ?0talasemia en cis ?-talasemia (?)0 ????-talasemia (????)0 Persistencia hereditaria de Hb fetal Deleción (??)0 No deleción Unido al cluster del gen de ?-globina G??, A?? No unido al cluster del gen de ?-globina ?-Talasemia ?0 ? Deleción No deleción
12
Distribución mundial de ?talasemia y ?talasemia
?-Talasemia
?-Talasemia
13
AATAAA
CACCC
CCAAT
TATA
ATG
TAA
Gen
FLANQUEO
FLANQUEO
IVS1
IVS2
NC
NC
GT
GT
AG
AG
ARNm precursor
5
3
5 CAP
AAAA-A
Excisión de intrones Empalme de exones ARNm
procesado
Núcleo
AAAA-A
Citoplasma
AAAA-A
Traslación
UGG UUG AGG AAG
AUG UAC
Ribosoma
UAA
ARN transfer
Aminoácido
Cadena final
Cadena creciente
14
Secuencia de un fragmaneto en un intrón del gen
de la ?-globina para un caso normal y para la
?-talasemia
Normal
5 CCTATTGGTCTATTTTCCACCCTTAGGCTGC ?-Talasemia
_ _ _ _TTAG

15
Mecanismo de empalme de los precursores de RNAm
16
Técnica de Southern-Blot
17
Acción de las enzimas de restricción
5
3
3
5
5
3
5
3
5
3
5
3
18
Mecanismo molecular de la ?-talasemia
Gen ?
5
3
19
Deleciones ? y ??
20
G?
A?
?
?
Cromosoma normal
Cromosoma normal
G?
A?
?
?
A?
G?
?
?
Entrecruzamiento o crossing-over no homólogo
G?
A?
A?
G?
?
?
? ?
Cromosoma anti-Lepore
Cromosoma Lepore
G?
? ?
A?
21
Niña de 11 años con ?-talasemia homozigota
(frente y perfil)
22
Fracciones de Hb en variantes de
?talasemia mayor
Genotipo HbA () HbA2 () HbF () Otros
?0/ ?0 ?/ ? ?0/ ? ??Lepore/??Lepore 0 5-50 2-10 0 1-6 2-8 1-3 0 gt94 40-80 gt85 80 Cadenas ? libres Cadenas ? libres Cadenas ? libres Hb Lepore (20)
23
Fisiopatología de ?-talasemia homocigota (Tal May)
Exceso de cadenas libres
No síntesis de cadenas ?
Hb fetal
No síntesis de HbA
Precipitación intramedular
Precipitación circulante
Anemia hipocroma
T1/2
Hipoxia
Hipoxia
Hepato y/o esplenomegalia
Eritropoyesis ineficaz
?Eritropoyetina
?Absorción de Fe intestinal
Malformaciones óseas
Eritropoyesis extramedular
Hemosiderosis
24
Rasgo homocigota ?
Rasgo ?
Normal
Rasgo ?º
Hydrops fetalis
Enfermedad HbH
25
Deleción del complejo ?
26
Síndromes ?-talasémicos
Síndrome Genotipo Anormalidad hematológica Variantes de Hb Variantes de Hb
Síndrome Genotipo Anormalidad hematológica Al nacimiento Después
Normal ??/?? Nnguna Ninguna Ninguna
Portador silente (?-Tal2) -?/?? Ninguna Hb Bart (0-2) Ninguna
?-Tal menor (?-Tal1) heterocigota (?-Tal2) homocigota --/?? -?/-? Anemia moderada Morfología talasémica Hb Bart (2-10) Ninguna
Enfermedad de HbH (heterocigota) --/-? --/XX --/?CS Anemia hemolítica crónica Hb Bart (10- 40) HbH (5-30) Hb Bart (trazas)
Hydrops fetalis --/-- Anemia fatal en útero Hb Bart (gt80) (También HbH y Hb Portland) -
27
Formas clínicas de la ?-talasemia
Clínica Genotipo ?/? Expresividad electroforética
?-Tal2 heterocig Asintomática - ?/ ? ? 1 No
?-Tal2 homocig. Anemia discreta Microcitosis - ?/- ? lt1 Hb Bart 2-10 (RN)
?-Tal2 no delec. Anemia discreta Microcitosis - ?/ ? ?T lt1 Hb Bart 2-10 (RN)
?-Tal1 Anemia discreta Microcitosis --/ ? ? lt1 Hb Bart 2-10 (RN)
?-Tal1 Hidropesía letal --/-- Sólo ? Hb Bart 80-90
HbH Anemia moderada Microcitosis - ?/ ?-? --/ ? ?T ?T/? ?T --/?CS/? ?T lt1 Hb Bartt20-40 (RN) HbH 5-40 (adulto) Hb Constant-Spring
28
Historia Raza Historia familiar Edad de aparición Desarrollo
Examen Clínico Palidez Ictericia Esplenomegalia Deformidad esquelética Pigmentación
Hemograma y film Hb MCV MCH Retic Inclusiones de GR en sangre o MO Precipitación de HbH
Electroforesis de Hb Presencia de Hb anormal. Incluir análisis a pH 6-7 para HbH y Hb Barts
Estimación de HbA2 y HbF Confirmar ?-talasemia
Distribución intracelular de HbF Síntesis de cadenas de globina Análisis estructural de variantes de Hb, vg Hb Lepore
29
El laboratorio en las talasemias

• Recuentos automatizados
• Hb disminuida
• Hematocrito disminuido
• VCM muy disminuido
• HCM disminuido
• Eritrocitos normales o aumentados
• CHCM normal o aumentada
• RDW normal. En talasemia mayor muy aumentado

30
El laboratorio en las talasemias (cont.)

• Sangre periférica
• En ?-talasemia homocigota y doble heterocigota no
  ?, hay anisocitosis aumentada
• En la heterocigota hay punteado basófilo
• En el rasgo ?-talasémico hay sangre normal

31
El laboratorio en las talasemias (cont.)

• Tinciones supravitales
• Reticulocitos aumentados 10. En HbH, con
  coloración con azul brillante de crecilo ?
  pelotas de golf
• En ?-talasemia y en ?-talasemia también pueden
  aparecer
• En homocigota ?-talasémico o HbH, tinción con
  violeta de metilo ? cuerpos de Heinz

32
El laboratorio en las talasemias (cont.)

• Tinciones con elución ácida
• HbA, a pH 3,3, eluye en extendidos fijados con
  alcohol, HbF resistente
• Presencia de HbF en diferentes patrones
  pancelular y heterocelular, HPFH, controles
• Sirve para distinguir ?-talasemia de HPFH
  pancelular

33
El laboratorio en las talasemias (cont.)

• Fragilidad osmótica
• En homo y heterobetatalasemia, HbH y ?-talasemia
  disminuida. Es diagnóstico sólo para screening
  del estado de portador
• Electroforesis de Hb
• Aumento de Hb normales A2 y F
• Aparición de Hb anormales (HbH, Bart, Lepore y
  Constance Spring)

34
El laboratorio en las talasemias (cont.)

• Cuantificación de HbA2 y F
• Química
• Bilirrubina indirecta aumentada
• Hierro y TIBC aumentado
• Ferritina sérica aumentada

35
Acetato de celulosa pH 8,4
Citrato de agar pH 6,0
Acetato de celulosa pH 7,0
36
Lisis
AHAI
N
?-Talasemia
EH
SC
NaCl (g/l)
37
Diagnóstico diferencial de anemia microcítica
hipocrómica
RDW Fé sérico TIBC Ferri-tina sérica FEP Nivel A2
Deficiencia de hierro ?-talasemia ?-talasemia Enfermedad de HbE Anemia de enf. crónica Anemia sideroblástica Intoxicación por plomo ? N N N N ? N ? N N N ? ? N ? N N N ? N N ? N N N ? ? N ? N N N ? ? ? N N ? N N N N