Anticuerpos conjugados de 7-etil-10-hidroxicamptotecina (SN-38) dirigida hacia la quimioterapia del c

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Anticuerpos conjugados de 7-etil-10-hidroxicamptot
ecina (SN-38) dirigida hacia la quimioterapia del
cáncerSung-Ju Moon,Serengulam V. Govindan,
Thomas M. Cardillo, Christopher A. DSouza, Hans
J. Hansen, and David M. Goldenberg
Immunomedics, Inc., Morris Plains, New Jersey
07950, Garden State Cancer Center at the Center
for Molecular Medicine and Immunology,
BelleVille, New Jersey 07109 ReceiVed June 16,
2008

• Estudiantes
• Eduviges Bustos A
• Karina Díaz López
• Laura Gurdián L.

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Objetivo

• Aumentar la selectividad del SN-38 hacia los
  sitios tumurales, utilizando anticuerpos
  monoclonales selectivos para incrementar la
  solubilidad y el índice terapeutico.

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Contenidos

• Descripción de la síntesis de los derivados
  bifuncionales del SN-38.
• Características in vitro de los anticuerpos
  conjugados.

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Fármaco base
Irinotecán (CPT-11)
En el artículo se trabaja con el SN-38
directamente, ya que el Irintecán tiene muchos
EA. El SN-38 es un inhibidor de la Topoisomerasa
I
Metabolito Activo
Pertenece a la clase de 20(s)camptotecina (CPTA)
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INHIBIDOR DE TOPOISOMERASA I

• Topoisomerasas del ADN enzimas nucleares que
  controlan, mantienen y modifican estructuras y
  topología del ADN durante los procesos de
  replicación y traslación del material genético.
• Topoisomerasa I. Corta una hebra y permite que la
  molécula de ADN rote alrededor del enlace
  fosfodiester, liberando la tensión producto del
  superenrollamiento del ADN. No dependiente de
  ATP.
•  

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• Fármacos anticancerosos que ejercen su acción a
  este nivel, estimulan y estabilizan complejos
  ADN-enzima provocando la ruptura mantenida de la
  cadena de ADN y la pérdida de su función.
• Irinotecán específico en la fase S del ciclo
  celular y detiene el ciclo celular en la fase G2.
  

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COMPLEJO DROGA mAb CONJUGADO
RECEPTOR CELULAR
ANTICUERPO
DROGA
ESPACIADOR
?
?
RECEPTOR EN CELULA TUMORAL
?
Esto es lo que se busca Hacer modificaciones a
la droga para aumentar su hidrosolubilidad,
proteger el anillo de lactona en la posición
20. Buscar un espaciador adecuado para que se una
el anticuerpo más apropiado (selectivo) y así
tener el efecto de la droga sobre el receptor
tumoral
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RESULTADOS
9
DERIVADOS DEL SN-38 (10 Y 20)
Lactona intacta actividad farmacológica
10
SINTESIS DEL SN-38 BIFUNCIONAL,CL-SN-38 (3)
El grupo fenólico fue protegido con BOC porque
puede ser removido selectivamente por TFA en
corto tiempo.
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Anticuerpos utilizados
                                                                                                                                                                                   

• Anti-CEACAM5 mAb, hMN-14, (labetuzumab)
• Anti-EGP-1 mAb, Hrs7
• Anti-CD22 mAb, hLL2 (epratuzumab) CONTROL

• Selectivo y significante efecto terapéutico en
  carcinoma de colon y pulmón de ratones

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Ensayo de Ellman

• El reactivo Ellman es utilizado para medir la
  cantidad de grupos tiol en el anticuerpo.
• El compuesto reacciona con un grupo tiol para
  liberar 2-nitro-5-tiobenzoato (TNB).

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Espaciadores
Azida
PEG
Maleimida
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DERIVADOS BIFUNCIONALES DEL SN-38
15
Resultados
16
Resultados
PBS Buffer de Fosfatos
17
Resultados
7
28
16
Buffer de fosfatos
21
17
25
Cinetica de liberación de SN-38 para varios
derivados bifuncionales
Suero
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Resultados
Células LoVo línea de células de adenocarcinoma
de colon humano
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Diferencias no significativas
Resultados
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Conclusiones

• La presencia de un corto espaciador de PEG en el
  sitio de enlace facilita la solubilidad acuosa.
• Existe una correlación entre la estabilidad
  biológica y la aparente hidrofobicidad del
  espaciador.
• Varios de los anticuerpos conjugados podrían ser
  sustituidos en un rango de 5-7 por la droga.

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MUCHAS GRACIAS!!!