Title: T
1Técnicas de Imunologia
- Citometria de Fluxo
- Aplicações
2Identificação Celular por Dispersão FS e SS
3Imunofenotipagem
4 IOTest 3 Combinations List
- 24 Relevant Tubes
- 2 Controls
- One tube is for intra-cellular testing
- Kappa Lambda polyclonals from Dako
- FITC- and PE-conjugations performed at IOT
5IOTest 3 Combinations List Target Diseases
6IOTest 3 Combinations List Target Diseases
7Quantificação antigénica
8Quantificação de antigénios em Citometria de Fluxo
9BioCytex MARQUIS TECHNIQUE
- Beads contain calibrated amounts of anti-mouse
IgG molecules. - Size mimics size of target molecule/receptor.
- Amount of molecules on beads reflects expression
level of target molecule/receptor.
10CELLQUANT CD38/CD8-PE Kit
- -Flow Analysis Procedure
- Calibration Beads
11CELLQUANT CD38/CD8-PE Kit
- -Flow Analysis Procedure
- Negative Control
12CELLQUANT CD38/CD8-PE Kit
- -Flow Analysis Procedure
- CD38 Positive Sample
13CELLQUANT CD38/CD8-PE Kit
14Pesquisa de populações raras
15Estudos Cinéticos
16Análise de Ciclo Celular
17Apoptose
18Separação Celular
488 nm laser
- Formação de gotículas
- Tempo
- Coincidência - Pureza e Eficiência
19QC Workflow
Patient Analysis
Basic Elements of Daily QC
Test Reimbursement
FAIL
PASS
20AUTOMATIZAÇÃO
PrepPlus
21TQ-Prep / ImmunoPrep Reagent
- Sistema automático de lisis de eritrocitos
- No requiere lavado
- Preserva la morfología
- Utiliza carruseles compatibles con XL-MCL, FC500,
PrepPlus y CellPrep
22PrepPlus TQ-Prep
- Sistema automático de carga de muestra y
reactivos para citometría de flujo - Utiliza tubos primarios de cualquier marca
- Rack de hasta 24 tubos primarios con agitación
para homogeneizar la muestra - Controlado por el TQ-Prep
23PrepPlus TQ-Prep
- Posibilidad de carga desde tubo abierto
- 3 soportes diferentes para reactivos
- Puede cargar anticuepos monoclonales, FlowCount y
reactivos de control de calidad
24CellPrep
- Sistema de lavado celular por fibra hueca
- Sustituye a la centrifugación
- Mantiene la viabilidad celular
- Mantiene la morfología y preserva células lábiles
- No activa ni destruye plaquetas
- Utiliza sangre entera, sangre lisada y cualquier
suspensión celular
25CellPrep
- Fibras huecas con poros de 0.65 µm, que permiten
la salida de moléculas y líquido de la suspensión
original - Permite la concentración final de la muestra
- Diferentes programas pregrabados, así como
posibilidad de crear programas propios
26Citometria de Imagem Uma nova Tecnologia no
apoio à Anatomia Patológica
27Tipos de amostras possiveis de analisar por
Citometria de Imagem
28Parâmetros possíveis de analisar por Citometria
de Imagem
- Total de partículas
- Forma
- Tamanho
- Área
- Diâmetro
- Perímetro
- Perfeição
- Irregularidade
29Requisitos Básicos num Citómetro de Imagem
30Captação dos Parâmetros de Análise
31Citometria de Imagem
32Protocolo para Citometria de Imagem
- Partindo de um fragmento de tecido sólido, fixado
em formol, processado e incluído em parafina. - Corte a 8?m, extensão em lâminas de gelatina
- Desparafinar
- Pós fixar com fixador de Bohm
- Hidratar
- Efectuar uma Hidrólise Ácida
- Marcar as células com reagente de Shiff
- Lavar com SO2
- Desidratar
- Montar
- Quantificar o conteúdo em ADN e o ciclo celular
no Citómetro de Imagem
33MetaCyte - concept
- microscope slide is scanned field by field at
lowest possible magnification without gaps - objects of interest are automatically identified
gallery images, object features and positions are
recorded
34MetaCyte - concept
- on screen review of analyzed cells
- false positives can be rejected
- cells suitable for analysis are preselected with
a mouse click - preselected objects can be automatically
relocated at100x to capture highresolution
images for analysis
35MetaCyte - concept
- histogram or scatter plot display of measured
features - gating for selection of subpopulations
- relocation of cells detected in a previous scan
after re-staining
36MetaCyte - concept
CCD Camera
Motorizedstage (x,y)
Motorized microscope (z)