NUTRICI

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NUTRICIÓN Y CULTIVO DE MICROORGANIMOS
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USO DE NUTRIENTES

• GENERACIÓN DE MATERIAL CELULAR
• MANUTENCIÓN DE ACTIVIDAD ENZIMÁTICA Y DE
  TRANSPORTE
• PRODUCCIÓN DE ENERGÍA

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COMPOSICIÓN QUÍMICA DE MICROORGANISMOS

• AGUA 80 90 (FORMAS VEGETATIVAS)
• MATERIA SECA MACROMOLÉCULAS (PROTEÍNAS, ÁCIDOS
  NUCLEICOS, LÍPIDOS, POLISACÁRIDOS)
• PRECURSORES DE MACROMOLÉCULAS

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ELEMENTOS PRINCIPALES

• MACROELEMENTOS C, O, H, N, P, S, Ca, K, Fe, Mg
• OLIGOELEMENTOS Zn, Mn, Co, Cu, Ni, Mo, Se

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FUENTES DE ELEMENTOS

• C CO2, COMPUESTOS ORGÁNICOS
• H AGUA, COMPUESTOS ORGÁNICOS
• O AGUA, OXÍGENO GASEOSO
• N NH3, NO3
• P COMPUESTOS ORGÁNICOS (AA)
• S SH2, COMPUESTOS ORGÁNICOS
• K, Mg, Ca, Na, Fe IONES

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UTILIZACIÓN DE CARBONO

• AUTOTROFOS USAN CO2 COMO ÚNICA O PRINCIPAL
  FUENTE DE C
• HETEROTOFOS USAN SUSTANCIAS ORGÁNICAS
  PREFORMADAS REDUCIDAS

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FACTORES DE CRECIMIENTO

• COMPUESTOS ORGÁNICOS NECESARIOS COMO PRECURSORES
  QUE NO PUEDEN SER SINTETIZADOS
• AMINOÁCIDOS, PURINAS Y PIRIMI-DINAS, VITAMINAS
  (COFACTORES)
• SUMINISTRADOS EN MEZCLAS COMPLEJAS

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CULTIVO DE ORGANISMOS

• PROVEER UN MEDIO ADECUADO PARA EL CRECIMIENTO
• OBTENER UN CULTIVO PURO

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MEDIOS DE CULTIVO

• MEDIOS SINTÉTICOS O DEFINIDOS SE CONOCE LA
  COMPOSICIÓN QUÍMICA Y CANTIDADES DE COMPONENTES
• MEDIOS COMPLEJOS CONTIENEN ALGUNOS COMPONENTES
  DE COMPOSICIÓN QUÍMICA NO TOTAL-MENTE DEFINIDA

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MEDIOS DE CULTIVO
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MEDIOS COMPLEJOS

• SIMPLES BAJOS REQUERIMIENTOS
• ENRIQUECIDOS ADICIÓN DE SANGRE, SUERO, etc.
• SELECTIVOS FAVORECEN EL CRECIMIENTO DE ALGUNOS
  TIPOS DE ORGANISMOS
• DIFERENCIALES DESTACAN CARACTE-RÍSTICAS PROPIAS
  DE UN ORGANISMO

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CULTIVOS PUROS

• OBTENCIÓN DE COLONIAS AISLADAS
• PLACAS DE PETRI
• MEDIOS SÓLIDOS AGAR AL 1,5
• UN ORGANISMO DA ORIGEN A UNA COLONIA

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SIEMBRA DE MICROORGANISMOS

• EN PLACA POR ESTRÍA
• EN PLACA EN SUPERFICIE O POR EXTENSIÓN
• EN PROFUNDIDAD O POR VERTIDO

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PLACA DE PETRI
15
SIEMBRA POR ESTRÍA
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EFECTO DE FACTORES AMBIENTALES

• TEMPERATURA
• ACIDEZ Y ALCALINIDAD (pH)
• NECESIDADES DE OXÍGENO
• PRESIÓN OSMÓTICA

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TEMPERATURA

• INFLUENCIA VELOCIDAD DE REACCIONES ENZIMÁTICAS
• TEMPERATURAS CARDINALES
• MÍNIMA, ÓPTIMA, MÁXIMA

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CLASIFICACIÓN

• PSICRÓFILOS (0º - 15º - 20º)
• PSICRÓFILOS FACULTATIVOS CRECEN A 0º, MÁXIMA
  ENTRE 20-30º Y RESISTEN HASTA 40ºC
• RESPONSABLES DE PUTREFACCIÓN DE ALIMENTOS
  REFRIGERADOS

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CLASIFICACIÓN

• MESÓFILOS RANGO ENTRE 15 Y 45ºC (MAYORÍA DE
  PATÓGENOS DE ANIMALES Y HOMBRE)
• TERMÓFILOS ÓPTIMA POR ENCIMA DE 45ºC Y MÁXIMA
  SUPERIOR A 65ºC

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ESTUFA DE CULTIVO
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ACIDEZ Y ALCALINIDAD

• MAYORÍA ENTRE pH 4 y 9 (ÓPTIMO 7)
• HONGOS 4,5 6
• BACTERIAS ACIDÓFILAS (Thiobacillus) y ALCALÓFILAS
  (Bacillus)
• REGULACIÓN CON BUFFERS EN MEDIOS DE CULTIVO

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RELACIÓN CON EL O2

• AEROBIO ESTRICTO DEPENDE POR COMPLETO DEL O2
  ATMOSFÉRICO
• MICROAERÓFILO REQUIERE MENOR CONCENTRACIÓN DE O2
  (lt21)
• ANAEROBIO ESTRICTO NO TOLERAN PRESENCIA DE O2

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RELACIÓN CON EL O2

• ANAEROBIOS FACULTATIVOS
• ANAEROBIOS AEROTOLERANTES
• CRECIMIENTO EN EL LABORATORIO (CULTIVOS AIREADOS,
  JARRA DE ANAEROBIOS, etc.)

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JARRA DE ANAEROBIOS
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SOLUTOS Y PRESIÓN OSMÓTICA

• AMBIENTES DILUIDOS
• ALTA CONCENTRACIÓN DE SOLUTOS PLASMÓLISIS
  (MÉTODO DE CONSERVACIÓN DE ALIMENTOS)
• ORGANISMOS HALÓFILOS

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CRECIMIENTO MICROBIANO

• CRECIMIENTO EQUILIBRADO AUMENTO DEL NÚMERO DE
  INDIVIDUOS DE UNA POBLACIÓN CONCURRENTE CON EL
  AUMENTO DE SUS CONSTITUYENTES QUÍMICOS
• DUPLICACIÓN DEL NÚMERO DE CÉLULAS Y DE LA BIOMASA

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CRECIMIENTO MICROBIANO

• DIVISIÓN FISIÓN BINARIA O BIPARTI-CIÓN
  (BACTERIAS) Y GEMACIÓN (LEVADURAS)
• TIEMPO DE GENERACIÓN DUPLICACIÓN DE LA POBLACIÓN
  MICROBIANA

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CURVA DE CRECIMIENTO
ESTACIONARIA
MUERTE
Log CÉL. VIABLES
EXPONENCIAL
LATENCIA
TIEMPO
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FASE DE LATENCIA

• LATENCIA ADAPTACIÓN AL MEDIO, ORGANISMOS
  METABÓLICAMENTE ACTIVOS
• DEPENDE DE EDAD DEL INÓCULO Y DIFERENCIA ENTRE EL
  MEDIO DE CULTIVO DE PROCEDENCIA Y EL NUEVO

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FASE EXPONENCIAL

• CRECIMIENTO EQUILIBRADO A VELOCIDAD CONSTANTE
• DEPENDE DE CONDICIONES AMBIENTALES Y
  CARACTERÍSTICAS INTRÍNSECAS

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FASE ESTACIONARIA

• AGOTAMIENTO DE NUTRIENTES ESCENCIALES
• ACUMULACIÓN DE PRODUCTOS DE DESECHO METABÓLICO
• NO SE APRECIA INCREMENTO NETO DE LA POBLACIÓN

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FASE DE MUERTE

• FALTA DE ENERGÍA PARA MANTENIMIENTO CELULAR
• DISMINUCIÓN DEL NÚMERO DE CÉLULAS DEL CULTIVO
• VELOCIDAD EXPONENCIAL
• GENERALMENTE LISIS CELULAR

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CULTIVO CONTÍNUO

• POBLACIÓN MICROBIANA CRECIENDO EN UN RECIPIENTE
  DE VOLUMEN CONSTANTE AL QUE SE AÑADE MEDIO FRESCO
  Y SE QUITA MEDIO USADO
• QUIMIOSTATO Y TURBIDOSTATO

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MEDICIÓN DEL CRECIMIENTO

• RECUENTO DE CÉLULAS TOTALES CÁMARAS DE RECUENTO,
  RECUENTO ELECTRÓNICO
• RECUENTO DE CÉLULAS VIABLES EN MEDIO SÓLIDO
  (PROFUNDIDAD O SUPERFICIE)

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MEDICIÓN DE MASA CELULAR

• DETERMINACIÓN DEL PESO SECO O HÚMEDO DE LA
  CÉLULAS EN VOLUMEN FIJO DEL CULTIVO
• CENTRIFUGACIÓN O FILTRACIÓN POR MEMBRANA

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MEDICIÓN INDIRECTA

• TURBIDEZ MEDICIÓN DE ABSORBANCIA O DENSIDAD
  ÓPTICA (DO)
• DO PROPORCIONAL A LA CONCENTRACIÓN DE PARTÍCULAS
• OTRAS PRODUCCIÓN DE ÁCIDO O GAS EN ORGANISMOS
  FERMENTADORES