PRUEBAS DIAGN

1
PRUEBAS DIAGNÓSTICAS EN VIH/SIDA- parte 3

• CARLOS ALVAREZ. MD.DTMH

2
Otras pruebas

• Saliva
• OraSure
• S 99.24
• E 99.89
• Orina
• Calypte
• S 99
• E 94

3
GUIA PARA EL MANEJO DE VIH / SIDABasada en la
EvidenciaCOLOMBIA2006

• Diagnóstico en embarazo
• Ofrecimiento y realización de la prueba
  recomendada con consentimiento para aceptación o
  rechazo.
• Indicaciones de repetición en tercer trimestre.
• Uso de pruebas rápidas
• Recomendaciones de interpretación

4
GUIA PARA EL MANEJO DE VIH / SIDABasada en la
EvidenciaCOLOMBIA2006

• Detección en el Hijo de Mujer Infectada
• Indicaciones de carga viral.
• Flujograma de diagnóstico con pruebas de
  detección de ácidos nucleicos e interpretación.

5
GUIA PARA EL MANEJO DE VIH / SIDARecomendaciones
Prueba de genotipificación

• No ordene pruebas de genotipificación en
  pacientes con problemas activos de
  incumplimiento, intolerancia, o inconsistencia en
  la toma de medicamentos (III A).
• Siempre confirme fracaso virológico y carga viral
  mayor a 1000 copias antes de ordenar una prueba
  de genotipificación (II A).
• La prueba de genotipificación debe realizarse en
  pacientes que se presentan con un segundo o
  tercer fracaso terapéutico previa autorización de
  experto en enfermedades infecciosas o VIH-SIDA (I
  B).

6
GUIA PARA EL MANEJO DE VIH / SIDARecomendaciones
Prueba de genotipificación

• La prueba de genotipificación debe interpretarse
  con la participación de un experto en
  enfermedades infecciosas o en VIH-SIDA (I B).
• La conducta que se derive de la información de
  las pruebas de genotipificacion debe ser siempre
  supervisada por un experto en enfermedades
  infecciosas o en VIH-SIDA (IIIA).
• El paciente debe estar consumiendo el régimen que
  fracasa en el momento en que se le toma la
  muestra para la prueba de genotipificación o
  dentro de las dos a cuatro semanas posteriores a
  su suspensión (II B).

7
Mutaciones relacionadas con la resistencia a las
drogas antiretrovirales
Inhibidores de la Proteasa

• L10I K20M D30N M36I M46I G48V I54V V82A I84V N88D
  L90M
• Saquinavir
• Indinavir
• Nelfinavir
• Ritonavir
• Amprenavir

Mutaciones primarias
Mutaciones secundarias
Polimorfismos
www.hiv-web.lanl.gov
8
Genotipo predicción de resistencia
SI
Magnitud de resistencia a drogas
NO
Todos los virus con L90M deberían tener
resistencia uniforme a saquinavir
HIV obtenidos de 78 pacientes
9
Fenotipo medida directa de resistencia
1,000 100 10 1 0
Magnitud de resistencia a drogas
1
6
11
16
21
26
31
36
41
46
51
56
61
66
71
76
HIV obtenidos de 78 pacientes
10
Fenotipo medida directa de resistencia
1,000 100 10 1 0
Magnitud de resistencia a drogas
1
6
11
16
21
26
31
36
41
46
51
56
61
66
71
76
HIV obtenidos de 78 pacientes
11
(No Transcript)
12
SUSCEPTIBILIDAD Sensible IC50 4lt Cepa
Ref Parc.ResIC50 4-10 gt Cep.Ref Resistente
IC50 10gt Cep.Ref
13
cDNA (gag/PRO/RT)
Purificar amplificado secuenciar
14
MÉTODOS GENOTÍPICOS Secuenciación
15
Algoritmos

• Trugene HIV-1 Report Generator (Visible
  Genetics).
• Retrogram Software v 1.2 (Viroloy Networks)
• ANRS AC11 v 2.000
• Detroit Medical Center, Grupo de Aconselhamento
  Virológico, CHL V3.2, Rega v 5.0 (estos 5
  accesibles a través de la empresa Advanced
  Biological Laboratories, SA)
• Resistance Collaborative Group, Stanford
  University HIV Database (estos 2 accesibles a
  través de Beta Test HIV Algorithm Comparison,
  Stanford University)
• ADRA (Los Alamos Resistance Database)
• Geno2phenosense(Arevir, Analyse Von
  Resistenzmutatione bei HIV).

16
VirtualPhenotype - Cómo funciona
Información genotípica
Información fenotípica
Secuencia (pregunta a la base de datos)
gt 85.000
gt 45.000
gt35.000 muestras comprobadas
Información de VirtualPhenotype (media del
fenotipo)
17
vircoTYPE REPORT
RESISTANCE ANALYSIS
vircoTYPE page 1
18
Page 2 Details
19
Informe de VirtualPhenotype
Fármaco
Proporción de muestras iguales
Veces de cambio en la IC50 (corte para el rango
normal de susceptibilidad)
Pares en base de datos
Por encima de rango normal de susceptibilidad,
pero por debajo de valor clínico de corte 2, 3, 4
Por encima de rango normal de susceptibilidad 2
Nombre comercial
Nombre genérico
En rango normal de susceptibilidad 2
Zidovudina
Lamivudina
Didanosina
Zalcitabina
Estavudina
Abacavir
Tenofovir DF
Nevirapina
Delavirdina
Efavirenz
Un componente de Kaletra
20
Qué es mejor?Fenotipo real - Prueba real-
Alta variabilidad intrapruebaCosto !!Genotipo
- Interpretación complejaFenotipo virtual -
Medida de probabilidad estadística- Mayor
precisión- Problema en la definición de veces
significativas biológicos y clínicos
21
Mutaciones relacionadas con la resistencia a las
drogas antiretrovirales
22
www.iasusa.org
23
www.iasusa.org
24
www.iasusa.org
25
www.iasusa.org