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E. Seregni S.S. Terapia Medico-Nucleare ed
Endocrinologia Inquadramento diagnostico e
approccio terapeutico dei tumori
neuroendocrini Milano, 25 maggio 2007
I test di laboratorio
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Diagnostica di laboratorio

• Marcatori specifici di istotipo
• Marcatori generici di neuroendocrinia

Cellule EC di una cripta del Lieberkuhn
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Marcatori specifici di istotipo

• Carcinoide intestinale
• serotonina e metaboliti
• Gastrinoma
• gastrina, secrezione acida gastrica
• Insulinoma
• insulina, glucosio plasmatico

• VIPoma
• VIP, elettroliti plasmatici
• Glucagonoma
• glucagone, glucosio plasmatico
• Somatostatinoma
• somatostatina, glucosio, cloro

• Carcinoma midollare tiroide
• hCT, CEA
• Tumori linea simpatico-adrenergica
• Catecolamine e metaboliti

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Biosintesi e metabolismo della serotonina
5
Valutazione escrezione urinaria giornaliera
dellacido 5 idrossi-indol acetico (5HIAA)

• Carcinomi neuroendocrini del midgut (duodeno,
  digiuno-ileo, appendice, colon dx) a cellule EC
• Sindrome da carcinoide tipica
• Dosaggio HPLC
• Dieta priva di

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Paziente portatore di localizzazioni epatiche e
polmonari da carcinoma neuroendocrino del tenue
TC torace

• 5HIAA urine 24 ore 45 mg
• (vn lt 10 mg)

TC fegato
111In-pentetreotide
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Biosintesi e metabolismo delle catecolamine
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Paraganglioma mediastinico in paziente sottoposto
a RT metabolica con 131I-mIBG
TC torace
131I-mIBG
131I-mIBG
131I-mIBG
131I-mIBG
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Paraganglioma addominale paravertebrale in
paziente sottoposto a RT metabolica con 131I-mIBG

• Noradrenalina urine 24 ore 63 mg (vn lt 85 mg)
• Adrenalina urine 24 ore 13 mg (vn lt 20 mg)
• Metanefrina plasmatica 85 pg/mL (vn lt 140 pg/mL)
• Normetanefrina plasmatica 280 pg/mL (vn lt 200
  pg/mL)

131I-mIBG
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Marcatori generici di neuroendocrinia

• Enolasi Neurone-Specifica (NSE)
• Polipeptide Pancreatico (PP)
• Cromogranina A

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Cromogranina A distribuzione cellulare

• E contenuta nei dense-core secretory granules
  delle cellule nervose, endocrine e neuroendocrine
  insieme a
• ormoni peptidici
• ammine biogene
• neurotrasmettitori
• nucleotidi, calcio

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Distribuzione tissutale delle cromogranine-secreto
granine

• Cellule del sistema nervoso centrale e periferico
• neuroni del cervelletto, corteccia, setto,
• amigdala, astrociti (?), retina, glomo carotideo,
  
• aortico etc.
• Cellule endocrine
• midollare surrene, adenoipofisi,
• tratto GEP, bronchi, paratiroidi, cellule C
• Cellule a differenziazione nuroendocrina
• prostata, mammella

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La famiglia delle Cromogranine-Secretogranine

• Cromogranina A
• Cromogranina B
• Secretogranina II (Cromogranina C)
• Secretogranina III (1B1075)
• Secretogranina IV (HISL-19)
• Secretogranina V (7B2)
• Secretogranina VI (NESP55)

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Cromogranina A
SS
NH2-
-COOH
-18 1 439

• CgA glicoproteina a singola catena di 439
  amminoacidi con peso molecolare di 48-60 kDa
  (glicosilazione, solfatazione)
• Estremità N-terminale ponte S-S e sequenza
  Arg-Gly-Asp (RGD) coinvolta nel trasporto
  intracellulare
• Elevato contenuto di acido glutammico e capacità
  di legare ioni calcio
• Presenza di residui di-basici siti per idrolisi
  specifiche (endopeptidasi, carbossipeptidasi
  E/H)

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Protozoi Paramecium tetraurelia Nematodi
Ascaris suum Teleosti Danio rerio Uccelli
Coturnix japonica Anfibi Rana ridibunda Rettili
Lacerta viridis Mammiferi ratto, maiale, uomo
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Azioni biologiche della CgA
Granulogenesi Pro-ormone
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Ruolo della CgA nella secrezione regolata

• Pompa protonica ATP-asi di tipo vacuolare
• Aggregazione e precipitazione sostenute da
  elevato Ca e basso pH
• Granulogenesi

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Peptide-Encoding Regions and Putative Functional
Domains of Human Chromogranin A (CgA)
Taupenot, L. et al. N Engl J Med
20033481134-1149
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(No Transcript)
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Azioni biologiche della pancreastatina (CgA
240-288)

• Inibizione secrezione di insulina
• Riduzione uptake muscolare di glucosio
• Stimolazione glicogenolisi epatica
• Inibizione secrezione amilasi pancreatica
• Inibizione secrezione acida cellule parietali
  gastriche
• Inibizione secrezione di PTH

Iperglicemia
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Autocrine-Paracrine Regulation of Catecholamine
Release from Sympathoadrenal Chromaffin Cells by
Catestatin
Taupenot, L. et al. N Engl J Med
20033481134-1149
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Confocal microscopy studies showing
co-localization of BNP and CgA granules in the
cytoplasm of a myocyte
Pieroni, M. et al. Eur Heart J 2007 281117-1127
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Utilizzo clinico del dosaggio della CgA tumori
neuroendocrini GEP

• inquadramento diagnostico
• significato prognostico
• sorveglianza follow-up
• monitoraggio terapie

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Sensibilità diagnostica dei marcatori in pazienti
affetti da neoplasie neuroendocrine GEP (106
pazienti)
Valori di cut-off NSE 12 ng/mL CEA 5 ng/mL
5HIAA 10 mg/urine 24 ore
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Sensibilità della CgA in pazienti con tumori
neuroendocrini del tratto GEP in funzione
dellestensione della neoplasia
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Modificazioni della CgA in corso di terapia in
pazienti con metastasi epatiche da tumori
neuroendocrini GEP
SD stable disease CR complete response PR
partial response PD progressive disease
Test chi-quadro 25.84 (p 0.00003)
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Andamento della CgA circolante nel follow-up di
un paziente con carcinoma neuroendocrino renale e
trattato con 5 cicli di RT metabolica di
111In-pentatreotide
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Distribuzione dei valori di CgA in pazienti
portatori di tumori neuroendocrini del tratto
GEP, gastrite cronica atrofica e in soggetti sani
Campana D et al, J Clin Oncol 2007
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Utilizzo clinico del dosaggio della
CgA feocromocitoma/paraganglioma

• E. Grossrubatscher et al.
• Clin Endocrinol., 2006

• 131I-mIBG
• Paziente portatore di feocromocitoma (Cys634Tyr)
• CgA 155 ng/mL
• Fondazione IRCCS Istituto Tumori Milano

Inquadramento incidentalomi surrenalici Monitoragg
io delle forme famigliari Valutazione della
radicalità chirugica Sorveglianza del
follow-up Valutazione della risposta ai
trattamenti
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Metodi di dosaggio della CgA

• Metodo ELISA
• DAKO A/S (Glostrup, Denmark)
• Anticorpi policlonali contro il frammento
  C-terminale di 23 kDa
• Concentrazioni espresse in U/L
• Valore soglia 37 U/L

• Metodo IRMA
• CIS Bio Intern (Gif sur Yvette, France)
• Anticorpi monoclonali contro epitopi nella
  regione 145-245
• Concentrazioni espresse in ng/mL
• Valore soglia 100 ng/mL

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Sensibilità e specificità clinica di due metodi
dosaggio della CgA in neoplasie neuroendocrine
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Concentrazioni di CgA1-17, CgA116-130, CgA324-337
in 10 pazienti con carcinoide (C) e tumore
endocrino del pancreas (E)
Stridsberg M et al, 2004
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Cause non tumorali di innalzamento della CgA

• Gravidanza
• Ipertensione essenziale
• Insufficienza renale
• Insufficienza epatica
• Insufficienza cardiaca
• Malattie neuro-degenerative
• Malattia di Parkinson
• Trattamenti farmacologici
• Inibitori pompa protonica
• Anti-ipertensivi

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Effetto del trattamento con omeprazolo su i
livelli sierici di CgA (42 pazienti omeprazolo
10 mg/die per 5-90 gg.)
Giusti M et al, 2004