HEMATOLOG

1
HEMATOLOGÍAAspectos Microscópicos
2
HEMATOLOGÍA

• La exploración de los elementos presentes en la
  sangre perisférica, sus precursores y algunos de
  sus productos constituyen la hematología
• La sangre esta formada por un líquido de
  composición compleja y variable, que es el plasma
  que contiene eritrocitos, leucocitos y plaquetas
  en suspensión.
• El plasma sanguineo y las células de la sangre
  forman el volúmen sanguíneo o la volemia que
  circula por los vasos sanguineos

3
HEMOGRAMA

• El Hemograma es el exámen clínico de laboratorio,
  determinado por el análisis del Hematocrito
  (Hto), Hemoglobina (Hb), Recuento de G. Blancos o
  leucocitos, Fórmula Leucocitaria y sus
  observaciones morfológicas.
• El profesional médico competente en el estudio
  del diagnóstico y tratamiento en patologías
  hematológicas y de hemostasia es el Hematólogo.

4
HEMATOPOYESIS
5
(No Transcript)
6
Visión Microscópica de la Sangre
7
HEMATOLOGÍA Punción Venosa

• La punción para obtener una muestra
  representativa de sangre para su estudio es la
  venopuntura.
• Para evitar la hemólisis y el líquido histico de
  arrastre, no se deberá emplear la muestra sin
  sacar la aguja y se deberá desechar la primer
  gota antes de hacer el frotis.
• El EDTA como anticoagulante (concentración de 1 a
  2 mgr/ ml de sangre), es aceptable para para el
  frotis o extensiones sanguíneas en porta hasta 3
  horas después de la extracción y hasta 24 horas
  en heladera.
• El citrato trisódico al 3,8 y de dilución
  aprox. en 1/9 con sangre, es satisfactorio para
  coagulación.

8
Muestra Sanguínea por Punción de Dedo

1. Limpiar la yema del dedo con una gota de alcohol
   a 70 grados y hacer una punción para conseguir
   una gota de sangre.
2. Depositar la gota de sangre, en un lado y en el
   centro de un porta bien limpio.
3. Seguidamente, con el empleo de un porta de borde
   esmerilado se hace un frotis o extensión de
   sangre. El porta con el que se hace la extensión
   debe deslizarse bien colocado y lo más
   perfectamente aplicado en su borde contra el otro
   porta sobre el que se hace la extensión. Sólo
   debe pasarse una vez, de forma continua e
   ininterrumpida.

9

• Realización de las extensiones de sangre
  periférica
• La extensión sanguínea es de gran importancia en
  algunas enfermedades hematológicas, ya que su
  diagnóstico puede realizarse o sospecharse sólo
  con observar la morfología de las células de la
  sangre.
• Uno de los métodos más empleados para la
  realización del frotis sanguíneo es el método de
  los dos portaobjetos. Consiste en la extensión de
  una gota de sangre sobre un portaobjetos mediante
  otro portaobjetos. La técnica es la siguiente
• Depositar una pequeña gota de sangre en el
  extremo de un portaobjetos.
• Con el borde de otro portaobjetos a 45 grados,
  tocar la gota, dejar que la sangre se distribuya
  por capilaridad y después deslizar suavemente un
  portaobjetos sobre el otro en sentido
  longitudinal hasta que la gota quede bien
  extendida sobre la superficie del primer
  portaobjetos.
• Dejar secar el frotis.

10
FROTIS SANGUÍNEO

• Cuando la extensión se realiza por este
  procedimiento, el frotis presenta tres zonas
  diferenciadas, en las que la morfología
  eritrocitaria puede variar y la distribución de
  leucocitos puede ser diferente.
• La zona en que inicialmente se depositó la gota
  (cabeza) es excesivamente gruesa y no puede ser
  valorada adecuadamente. A continuación se
  extiende el cuerpo de la extensión, que
  corresponde a la región intermedia del frotis y
  en ella existe un reparto equilibrado de las
  células es la zona ideal para la observación
  microscópica. Por último, al final de la
  extensión, se encuentran las barbas o la
  cola, es una zona fina dónde las células
  adoptan una disposición de cordones

11
FROTIS SANGUÍNEO
LECTURA en GUARDA GRIEGA
12
Técnica de Extensión o Frotis Sanguíneo




13
Técnica de Extensión o Frotis Sanguíneo

• - Es conveniente realizar dos o tres extensiones,
  con el fin de seleccionar para la tinción la
  mejor lograda.
• - Las extensiones o frotis deben secarse al aire
  lo más rápidamente posible. La desecación se
  facilita con movimiento en forma de abanico,
  nunca soplando o por calor. La rápida desecación
  evita la deformación de los glóbulos sanguíneos.

14
Técnica de Tinción para Frotis

1. Depositar el porta con la extensión de sangre
   encima del soporte de tinciones y éste sobre la
   cubeta.
2. Cubrir la extensión con metanol y esperar que el
   alcohol se evapore si se cubrió con gotas. En
   caso de cubrir todo el extendido, no dejar más de
   3 minutos y lavar con agua. De esta forma se
   consigue el fijado.
3. Cubrir toda la extensión con unas gotas de Giemsa
   puro o con una dilución de giemsa probada, (18 ó
   110), evitar la desecación y dejar actuar el
   colorante unos cinco minutos si es giemsa pura o
   más minutos según la dilución que se ha elegido.
   (se prueba el punto exacto)
4. Lavar la preparación, hasta que arrastre todo el
   colorante.
5. Tomando el porta por los cantos, se seca aireando
   el porta, o bien al calor muy lento de la llama
   del mechero.

15
Frotis Observación Microscópica

• Con débil aumento ( objetivo de 10x ó 20x)
  explorar la preparación para localizar la zona en
  la que el frotis es más perfecto. Los lugares más
  aptos son aquellos en los que la extensión de los
  glóbulos se ha conseguido en una sola capa, están
  bien teñidos y no se han producido precipitados
  de los colorantes. Cuando se observe una zona
  apta, pasar a aumentos más fuertes 40x para
  conteo y 100x para morfología patológica o
  diferenciar atípicos.
• 2. En el campo del microscopio, se verán con
  un dominio predominante los glóbulos rojos,
  hematíes o eritrocitos , teñidos en color rojo.
  No tienen núcleo y son más delgados por el centro
  que por los bordes. Los glóbulos blancos o
  leucocitos de identifican fácilmente por la
  presencia de núcleo.

16
Hematíes o Eritrocitos

• Los eritrocitos son las células sanguíneas que
  contienen en su interior la hemoglobina. Esta
  molécula es una proteína que contiene átomos de
  hierro que le otorgan el color rojo a la sangre,
  de allí su nombre eritro (rojo) citos (células).
  
• Dado la forma bicóncava del eritrocito se observa
  en la foto un disminución del color en el centro.
  Cuando esta dismunución no se observa puede
  deberse a una alteración de la forma del glóbulo.
  
• El número promedio de glóbulos rojos en el hombre
  es de 5.000.000 por mm3 de sangre. La cifra media
  de glóbulos blancos es de 7.000 a 8.000 por mm3.
  Hay por tanto un glóbulo blanco por cada 600 ó
  700 glóbulos rojos.

17
Frotis Hematíes o Eritrocitos
18
Valores e Índices de la Serie Roja

• En la evaluación de esta serie hematológica se
  considera
• Hematocrito (Hto) porcentaje de la sangre que
  corresponde a los glóbulos rojos.
• Concentración de Hemoglobina (Hb)
• Volumen Corpuscular Medio (MCV) tamaño globular
  promedio.
• Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media
  (MCHC) conc. promedio de Hb del total de
  eritrocitos.
• Hemoglobina Corpuscular Media (MCH)
  concentración de hemoglobina promedio en cada
  eritrocito
• Distribución por Tamaño de los Glóbulos Rojos
  (RDW) es la dispersión en los tamaños de los
  eritrocitos.

19
Valores e Índices Hematométricos Normales

• VCM 82 - 95 . VCM lt 85 microcitósis y gt95
  macrocitósis - (Hto/ n. hematíes)
• HCM 26 - 34 pgr./ célula. HCM lt 26 hipocromía
  y lt 34 hipercrómico
• (Hto/ número de hematíes)
• CHCM 31 - 37 g/ dl . lt31 hipocromía y gt 37
  hipercromía ( Hb/ Hto.)
• RDW 11.5 - 14.5 es la distribución o dispersión
  de los hematíes.

20
ANEMIA principal patología de G.R.

• Los parámetros normales para los glóbulos rojos
  son tamaño normocítico de 7- 8 µm, color
  normocrómico (coloración normal), forma disco
  bicóncavo y ser anucleado.
• El mejor parámetro para evaluar si la cantidad de
  eritrocitos es adecuada para el organismo, es la
  hemoglobina que lleva oxígeno a la perisferia del
  organismo.
• La disminución de Hb también origina anemia, cuya
  clasificación será discutida junto con la
  disminución del número eritrocitario y Hto.

21
Función de los Índices Hematométricos

• Los índices de los glóbulos rojos permiten
  diferenciar las anemias
• Según tamaño
• Microcíticas (MCV disminuido), Normocíticas
  (MCV normal) Macrocíticas (MCV aumentado).
• Según concentración de hemoglobina Hipocrómica
  (MCH o MCHC disminuido) Normocrómica (MCH o MCHC
  normal).
• Hipercromía (MCH o MCHC aumentado)

22
ANEMIAS
23
ANEMIAS y RETICULOCITOS

• Para evaluar si la capacidad regenerativa de los
  eritrocitos por parte de la médula ósea es
  adecuada, existe un examen llamado recuento de
  reticulocitos, (V. N. 0 - 2 ) que permite
  distinguir anemias causadas por falla medular.
• Para corregir anemias se calcula el Índice
  Reticulocitario (IR)
• Reticulocitos corregidos reticulocitos x (Hto
  del paciente/ 45).
• - Son hiporegenerativas con Indice
  Reticulocitario (IR) menor a 2. Las originadas
  por destrucción, se llaman regenerativas y tienen
  un IR mayor de 3.

24
Tinción para Reticulocitos
El azul brillante de cresilo tiñe el tramado
nuclear que corresponde a cadenas de ARN del
hematíe.
25
G. Rojos Anormalidades

• Anisocitosis amplia variación de tamaño
  globular, ( hay pequeños y grandes anemia
  ferropénica, anemia hemolítica, Anisocromía
  variedad de color globular.
• Microcitosis glóbulos pequeños ( ANEMIA
  MICROCÍTICA).
• Macrocitosis glóbulos grandes ( ANEMIA
  MACROCÍTICA).
• Hipocromía color globular pálido ( ANEMIA
  HIPOCRÓMICA.
• Poiquilocitos variación anormal de la forma. Son
  anemias más severas ( anemias ferropénicas,
  megaloblástica, síndrome mieloproliferativo,
  hemólisis, etc).
• Esferocitos células esféricas sin centro pálido,
  frecuentemente pequeños (microesferocitosis)
  esferocitosis hereditaria, anemia hemolítica
  autoinmune Coombs () y post tranfusional.

26
(No Transcript)
27
(No Transcript)
28
Microcitos en Anemia Ferropénica
29
Macrocitos en Anemia Megaloblástica
30
Hipocromía, Anisocitosis y Reticulocitos
31
Patologías con Poiquilocitosis

• OVALOCITOS células ovaladas esferocitosis
  hereditaria, deficiencia de fierro.
• TARGET CELLS, LEPTOCITOS o Células en DIANA
  glóbulos con centro y periferia oscuros y anillo
  claro entremedio (como disco de "tiro al
  blanco") Insuficiencia hepática, talasemias.
• ESQUISTOCITOSIS glóbulos contraídos
  irregularmente o fragmentados uremia, anemia
  hemolítica, púrpura trombocitopénico trombótico.
• ACANTOSITOS glóbulos pequeños con evaginaciones
  espinosas de membrana abetalipoproteinemia.
• LAGRIMA síndrome mieloproliferativo, talasemia.
• Eritrocitos NUCLEADOS glóbulos nucleados
  anemias hemolíticas, leucemias, síndrome
  mieloproliferativo, policitemia vera, mieloma
  múltiple, cualquier anemia muy severa.
• Cuerpos de HOWELL - JOLLY cuerpos oscuros dentro
  de los glóbulos esplenectomizados, anemia
  perniciosa, talasemia.
• ROULEAUX eritrocitos agrupados uno sobre otro
  mieloma múltiple, hipergammaglobulinemia,
  embarazo.

32
G.R. Otras Anormalidades
33
Anormalidad Hematíes Nucleados
34
Anormalidad Hematíes Nucleados
35
Glóbulos Blancos o Leucocitos

• La evaluación de esta serie hematológica
  considera el conteo total de los leucocitos
  (WBC), y diferencial en neutrófilos, basófilos,
  eosinófilos, monocitos, linfocitos, así como
  también el conteo diferencial de las series
  hematopoyéticas de los neutrófilos y otros de
  condición inmadura o atípicas

36
Valores Normales de Rto. de Blancos

• - Adultos 4.000 - 11.000 / mm3
• - Recién nacidos 10.000 - 25.000 / mm3
• - Niños de 1 año 6.000 - 18.000 / mm3
• - Niños de 4 a 7 años 6.000 - 15.000 / mm3
• - Niños de 8 a 12 años 4.500- 13.000 / mm3

37
Recuento de Blancos

• Muestra sangre anticoagulada con EDTA
• Liquido de Dilución solución 2 de Acético
  Glacial. Líquido de Turk u otros.
• Dilución 1 en 20 (puede ser 110).
• Ejemplo 20ul. en 0,38 ml.
• Secar bien la punta de la micropipeta antes de
  descargar la sangre en el liquido de dilución.
• Usar objetivo y ocular de 10x
• Diafragma semicerrado y condensador arriba
• Contar en los 4 ó 2 cuadrantes grandes

38
Cámara de Recuento - NEUBAUER
39
Cámara de Recuento - NEUBAUER
40
Técnica de conteo 

• Para realizar el recuento se leen todos los
  blancos de los cuadrantes grandes. Si se leen en
  los 4 cuadrantes grandes, el resultado se
  multiplica por 50. Si se lee solo los 2
  cuadrantes que estan en diagonal, se multiplica
  el resultado por 100. El valor obtenido es por
  mm3. Ej (25282927) x 50 5450 por mm3

41
Técnica de conteo 

• Para que las células, que están en o cerca de las
  líneas de limitación, no se cuenten dos veces o
  se sobrepasen en el conteo, hay que atenerse a
  determinadas reglas. Se cuentan todas las células
  dentro de una zona de medición definida.
• También se cuentan las células (marcadas en
  negro), que se apoyan o tocan en las 2 caras (I),
  p.ej. en la línea de medida izquierda y superior.
  

42
Valores Normales Serie Blanca
43
Anormalidades de la Serie Blanca

• La medición del número total de los leucocitos,
  (WBC), sirve para evaluar la severidad de la
  enfermedad.
• El análisis diferencial puede ayudar a precisar
  el diagnóstico del paciente, asociado a la
  clínica que presente. Un aumento de los WBC por
  sobre 10.000, se llama leucocitosis, que
  generalmente es causada por el aumento de una
  serie celular. Es raro que aumenten todas las
  series, ( ej. Hemoconcentración). Generalmente
  se produce en infecciones agudas, donde el número
  de los leucocitos depende de la gravedad de la
  infección, resistencia del paciente, edad,
  eficiencia y reserva de la médula ósea.
• La disminución de los WBC, se llama leucopenia y
  ocurre como consecuencia de infecciones virales,
  fiebre tifoidea, depresión medular por causas
  varias, etc.

44
NEUTRÓFILO

• Los neutrófilos son los leucocitos más
  importantes y numerosos, (9-14 micras), que
  forman la primera defensa en contra de una
  invasión microbiológica. Neutrofilia es el
  aumento del número absoluto de neutrófilos a más
  de 8000/mm3 o más del 70 de los leucocitos, en
  respuesta a una infección o a células tumorales.
  Neutropenia es la disminución de estas células en
  cantidades menores a 1800/mm3 o menores del 40
  de los leucocitos.
• Según la forma de su núcleo se los puede
  clasificar en neutrófilos en banda o cayados y en
  neutrófilos segmentados. Presentan divisiones de
  sus núcleos en lóbulos en un número que va de 3 a
  5. Si es mayor el número de divisiones nucleares
  se habla de neutrófilos hipersegmentados.
• La denominada desviación a la izquierda es la
  aparición en el torrente circulatorio de un gran
  porcentaje de células inmaduras.

45
NEUTRÓFILO. Aumento 20X
46
NEUTRÓFILO. Aumento 20X
47
Borde Lateral. Aumento 20X
48
Neutrófilos Normales 40x
49
NEUTRÓFILO. Aumento 100X
50
Neutrófilos en Banda o Cayado. 10x
51
Neutrófilo en Banda o Cayado
52
LINFOCÍTOS

• Los linfocitos son los leucocitos que migran más
  tardíamente a las zonas de inflamación. (6-10
  micras).
• Son células esféricas o ligeramente ovoides con
  un diámetro de 8 a 12 micrones. El núcleo (azul
  oscuro) ocupa el 90 de la célula. El citoplasma
  es muy delgado y se tiñe de color azul claro
  formando un anillo alrededor del núcleo. El
  linfocito bajo ciertos estímulos químicos
  endógenos puede dividirse y crear muchas células
  hijas para defender al cuerpo liberando
  anticuerpos.
• Linfocitosis se llama a cantidades mayores de
  4000 linfocitos/mm3 en adultos.
• Se diferencian en los lugares de maduración
  L.B si lo hacen en la médula ósea, y L.T si
  lo hacen en el timo.
• Los linfocitos B originan los anticuerpos
  específicos, y los linfocitos T actúan en la
  inmunidad celular.

53
Sangre Normal en zona densa. Linfocitos y
Neutrófilos. Aumento 20X
54
Linfocito chico en 40x
55
Linfocito chico y un neutrófilo en zona densa
del frotis
56
Linfocito grandes en 40x
57
Linfocito chico en 100x
58
Linfocito chico en 100x
59
Linfocito mediano y chico en 100x
60
Linfocito grande en 100x
61
EOSINÓFILO

• Los eosinófilos son leucocitos que se activan en
  forma tardía en una inflamación. Responden
  principalmente a enfermedades alérgicas y por
  parásitos, pero también se presentan en otras
  enfermedades como las endócrinas, linfomas y
  otros. Tamaño 10-15 micras.
• Eosinofilia es el aumento de los eosinófilos
  circulantes (mayor a 5 leucocitos o 500/mm3).
  Eosinopenia (disminución de los eosinófilos
  circulantes bajo 50/mm3) es causada generalmente
  por un aumento de la producción de corticoides
  que acompaña la mayoría de las condiciones de
  stress del organismo
• Los Eosinófilos tienen actividad fagocítica, es
  decir que "se comen" a los agentes extraños al
  organismo. Sus gránulos tienen sustancias para
  degradar aquello que incorporan. Tienen un papel
  muy importante en las parasitosis donde con sus
  gránulos degradan las larvas para que puedan ser
  ingeridas por los neutrófilos y los macrófagos.
  El eosinófilo regula las reacciones alérgicas.

62
EOSINÓFILO a 100x
63
EOSINÓFILO a 100x
64
EOSINÓFILO a 100x
65
Eosinófilo machacado. 100X
66
BASÓFILOS

• Los basófilos son un pequeño porcentaje del total
  del conteo de los leucocitos. (8-12 micras).
• Basofilia (conteo aumentado mayor de 100/mm3) se
  asocia comúnmente a leucemia granulocítica,
  metaplasia mieloide, linfoma de Hodgkin. Menos
  frecuentemente se asocia a inflamación, alergia y
  otras patologías
• Los Basófilos poseen gránulos de heparina e
  histamina. Estas sustancias son mediadores
  químicos que modulan la inflamación. Tienen
  función en los estados alérgicos en la
  hipersensibilidad retardada. La liberación masiva
  del contenido de sus gránulos puede causar un
  shock anafiláctico que puede llegar hasta la
  muerte si no es controlado.

67
BASÓFILOS a 100x
68
(No Transcript)
69
Basófilo maduro. Sangre normal - 100X
70
Basófilo machacado. Sangre normal - 100X
71
Sangre Normal Un basófilo y 3 eosinófilos
Aumento 100X
72
MONOCITOS

• Los monocitos junto con los linfocitos son los
  leucocitos agranulados o agranulocitos, que
  forman la segunda línea de defensa del organismo.
  Son los blancos más grandes 12-20 micras.
• Monocitosis hay un aumento celular mayor de
  500/mm3, donde las causas más frecuentes son
  infecciones bacterianas, TBC, endocarditis
  subaguda y sífilis
• Los Monocitos son células fagocíticas con gran
  capacidad bactericida. Ante estímulos de
  sustancias químicas siguen a los neutrófilos en
  la reacción inflamatoria. Por la fagocitosis
  aumentan de tamaño y pueden fijarse a los tejidos
  del baza, hígado y pulmón, dando lugar a los
  macrófagos tisulares que forman el sistema
  retículo endotelial encargado de remover el
  material extraño que circula en la sangre.

73
Sangre Normal 1 Monoc. y 1 Linfoc. Aum. 40 x
74
Monocito con núcleo doblado y vacuola. Aumento
100 x
75
Monocito con núcleo doblado y vacuola. Aumento
100 x
76
(No Transcript)
77
Sangre Normal Monocito desgranulado. Aumento 100
x. Zona densa
78
Sangre Normal. Aumento 100 x. Zona densaUn
linfocito pequeño, un monocito y un Neutrófilo
79
Sangre Normal.1 Ns, 1 Nc y 1L. Aumento 100X
80
Linfocitos Atípicos
Estos linfocitos atípicos poseen un citoplasma
mayor y un núcleo mas laxo que los normales.
Aparecen en enfermedades virales
81
Neutrófilos Hipersegmentados

• Los núcleos de los neutrófilos se encuentran
  divididos en un número de lóbulos mayor que lo
  normal.

82
Plaquetas Muestra de Sangre con EDTA

• El número medio normal de plaquetas en un campo
  apropiado se extiende a partir del 8 a 15. En
  muestras con EDTA, se distribuyen, se redondean
  generalmente para arriba y pueden ser levemente
  hinchadas y/o que desgranuladas.

83
Plaquetas Agrupadas
84
Plaquetas Muestra de Sangre con EDTA

• Tres plaquetas pequeñas, varias plaquetas grandes
  y 4 Megatrombocitos. Todos están de morfología
  normal.

85
LMA (leucemia mieloide aguda). 20x
86
LMA (leucemia mieloide aguda)- 100x
87
Leucemia Mieloide Aguda - Comparativo
88
LMA (leucemia mieloide aguda)- 100x
89
L.L.A.(Leucemia Linfocítica Aguda)- 100x
90
Leucemia Linfocítica Aguda - Comparativo
91
L.M.C. (Leucemia Mieloide Crónica) 100x
92
Leucemia Mieloide Crónica - Comparativo
93
Linfoma Maligno 100x
94
Linfoma Maligno - Comparativo
95
Linfoma de Hodgkin 100x
96
Linfoma de Hodgkin- Comparativo
97
Fuentes Bibiográficas y de Imágenes

• http//escuela.med.puc.cl/Publ/ManualSemiologia/He
  mogramatext.html
• http//escuela.med.puc.cl/publicaciones/ManualPed/
  InterpretHemog.html
• http//medocs.ucdavis.edu/IMD/420A/dib/index.htm
• http//pathy.med.nagoya-u.ac.jp/atlas/doc/
• http//www.perinat.org.ar/Atlas20420-206.html
• http//www.forobioquimico.com.ar/atlashemato.html
• http//www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/encyclo
  pedia.html
• http//www.galeon.com/hematologiauss/microteca.htm
  
• http//www.arrakis.es/rfluengo/frotissangre.html
• http//www3.unileon.es/personal/wwdmamgi/Sangre.pd
  fsearch'frotis20sanguineo
• http//www.ub.es/biocel/wbc/tecnicas/imagenes_de_n
  eubauer.htmImágenes20de20la20cámara20de20Neu
  bauer

98
MUCHAS GRACIASPOR SU ATENCIÓN