VARIABILITA

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VARIABILITA ANALITICA, ERRORI DI
MISURA,SICUREZZA DI QUALITA
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Attendibilità delle misure
precisione
accuratezza
specificità
sensibilità
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ATTENDIBILITA DI UNA MISURA

• Lattendibilità di un risultato analitico è
  determinata da un insieme di fattori come la
  precisione, laccuratezza, la specificità, la
  sensibilità che caratterizzano globalmente un
  risultato o un metodo analitico
• Anche se estranei all operatore ed al metodo
  applicato, hanno valore nella attendibilità di un
  esame anche le modalità di prelievo e la
  conservazione del materiale biologico, oltre
  allo stato del paziente

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PRECISIONE

• Si intende la sovrapponibilità di valori ottenuti
  con lo stesso metodo ma con misurazioni distinte,
  su frazioni di uno stesso campione che sia
  omogeneo, cioè stabile nel tempo e identico
• Col termine di imprecisione o di variabilità
  analitica invece si intende una misura
  quantitativa in base al valore della deviazione
  standard calcolata sui valori sperimentali di una
  serie di analisi (repliche), eseguite sullo
  stesso campione, postulando che lerrore casuale
  da cui deriva limprecisione abbia una
  distribuzione di tipo gaussiano

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• Il concetto di precisione include quelli di
  ripetibilità , intesa come la misura della
  deviazione dal valore medio dei risultati
  ottenuti da uno stesso operatore, in una unica
  serie analitica e senza cambiare reattivo o
  apparecchio e riproducibilità, cioè la misura
  della deviazione dal valore medio dei risultati
  ottenuti in un arco variabile di tempo da
  operatori diversi che non conoscono lidentità
  del campione analizzato e che usano lotti di
  soluzioni e reagenti diversi

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(No Transcript)
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ACCURATEZZA

• Laccuratezza del metodo è il grado di
  concordanza fra il valore medio trovato in
  repliche diverse di una stessa analisi sul
  medesimo campione ed il valore reale o più
  probabile conosciuto
• La ricerca del cosiddetto valore vero è un
  concetto astratto che spesso richiede
  apparecchiature complicate e indaginose

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• Con il termine di inaccuratezza invece si intende
  la differenza tra il valore medio sperimentale e
  quello reale
• Il controllo della accuratezza ci permette di
  evidenziare in una analisi gli errori sistematici

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(No Transcript)
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SPECIFICITA

• La specificità invece è la proprietà del metodo
  di usare solo ed interamente la sostanza da usare
  senza interferenze di qualunque tipo o da parte
  di altre sostanze presenti nel campione
• Laccuratezza è spesso difficile da ottenere in
  quanto molti metodi sono aspecifici e quindi
  introducono nei risultati un errore sistematico
• Importante ancora la taratura corretta degli
  strumenti e la purezza e stabilità degli standard

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SENSIBILITA E RIVELABILITA

• Sensibilità è la capacità del metodo di dosare
  anche piccole concentrazioni della sostanza
  studiata
• Rivelabilità è la più piccola quantità di
  sostanza che il metodo riesce a dosare con un
  certo limite fiduciario, circa 95

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CLASSIFICAZIONE DEGLI ERRORI DI MISURA

• Si definisce errore di una analisi quantitativa
  la differenza tra il valore reale e il valore
  trovato con la analisi
• Questo è lerrore totale, cioè la somma di
  numerosi errori diversi tra loro che si possono
  raggruppare in errori casuali, sistematici,
  grossolani

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Errori di misura
casuali
sistemici
grossolani
fiduciari
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ERRORI CASUALI, NORMALI O ACCIDENTALI

• Sono sempre inevitabili, di piccola entità, e non
  possono essere recepiti dalloperatore
• Anche operando in condizioni analitiche
  standardizzate, si ottengono risultati
  leggermente differenti fra loro pur essendo
  distribuiti con regolarità attorno al valore
  medio della curva gaussiana

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• Per tale motivo il risultato si dice impreciso
• Possono essere errori casuali piccole variazioni
  nella tensione di alimentazione, modeste
  variazioni nella erogazione del gas e quindi
  della fiamma negli spettrofotometri a fiamma,
  cattivo mescolamento dei reagenti

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ERRORI SISTEMICI

• Si ripetono sistematicamente nell eseguire lo
  stesso tipo di analisi con il medesimo metodo e
  possono essere errori di sovrastima o di
  sottostima
• Le cause sono conosciute e individuabili e
  definiscono laccuratezza dellanalisi
• Spesso si eliminano usando una metodica più
  sensibile o specifica

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• La causa a volte non è conosciuta a priori ma
  individuabile ed eliminabile come vetreria
  sporca, apparecchiature tarate male, reattivi o
  soluzioni standard non ben purificati, problemi
  di vista, imperizia od ignoranza
• Anche la non osservanza delle condizioni critiche
  di una reazione chimica tempo, temperatura , pH

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ERRORI GROSSOLANI

• Sono dovuti generalmente a negligenza
  delloperatore
• Si evitano con la maggiore attenzione di
  questultimo
• Esempi luso di una pipetta da 2 ml anzichè di
  una da 1 ml lo scambio di reagenti, la selezione
  errata di una lunghezza donda, lerrore di un
  calcolo

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• Essi sono veri e propri sbagli che si possono
  eliminare con limpegno del personale che opera e
  con una buona organizzazione di laboratorio

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LIMITI FIDUCIARI

• Si intendono limiti fiduciari o di confidenza di
  un risultato i valori corrispondenti a /- 2 DS
  di un risultato isolato ottenuto con un metodo di
  cui si sia previamente calcolata la deviazione
  standard su almeno 25 dati sperimentali
• E il limite di misura entro i quali si può avere
  fiducia che sia compresa la misura vera della
  grandezza

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COEFFICIENTE DI VARIAZIONE

• E il valore della DS trovata, espresso in
  percentuale del valore medio (x) CV(DS/X) x 100
• Questo parametro rispecchia in maniera più
  fedele, anche se non del tutto esatta,
  limprecisione della esecuzione analitica del
  metodo considerato, dovuta al fatto che lentità
  degli errori casuali varia anche in funzione
  della concentrazione del campione

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• Mentre la deviazione standard, quando è
  calcolata su analisi ripetute nello stesso
  momento riflette solo variazioni casuali, il
  coefficiente di variazione invece include anche
  variazioni identificabili, derivanti dalla
  analisi effettuata su campioni a diversa
  concentrazione

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LIMITI ACCETTABILI DI ERRORE

• Per controllare laccuratezza di una analisi si
  introducono nella serie da analizzare in maniera
  casuale uno o più campioni di cui si conosce
  lanalita, i valori di concentrazione del quale
  coprono l intero range sia dei valori normali
  che patologici
• Il risultato della misura non deve divergere dal
  valore teorico oltre un certo limite

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• Anche se il metodo risulta sotto controllo i
  risultati possono essere inaccettabili dal punto
  di vista clinico se i limiti di accuratezza o di
  precisione stabiliti nel laboratorio sono troppo
  ampi
• Barnett affrontò il problema tenendo di vista
  precipuamente il problema della utilizzazione
  medica dei dati di laboratorio, non dimenticando
  che queste esigenze teoriche devono fare il conto
  con linsieme delle apparecchiature e metodiche
  analitiche disponibili sul mercato
• In generale le prestazioni analitiche si possono
  a tuttoggi considerare accettabili per lo scopo
  che si prefiggono

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CONTROLLO DI QUALITA

• Il controllo di qualità non è una panacea, ne un
  tocca sana per il laboratorio, ma solo un momento
  di razionalizzazione per ovviare a tutte quelle
  cause che possono determinare alterazioni del
  risultato analitico
• Esso non può scoprire ne suggerire rimedi per
  scambi di persona, o di provette, o prelievi
  errati o sei si fa un uso incongruo di
  anticoagulanti, o si procede alla non corretta
  conservazione dei campioni, o alla effettuazione
  dei calcoli, o alla trascrizione dei dati
  analitici

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• Risulta invece di fondamentale importanza per
  migliorare la precisione analitica,
  laccuratezza, e costituisce una spinta vigorosa
  verso la scelta di metodi, reagenti ed apparecchi
  sempre più in grado di fornire migliori
  prestazioni
• Conclusioni il costante controllo interno ed
  esterno assicura al laboratorio quel livello di
  affidabilità che risulta sempre più necessario
  per una buona medicina non solo curativa ma anche
  preventiva

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CONTROLLO INTERNO

• Lo scopo principale è quello di rivelare gli
  errori di una misura analitica che si collochino
  al di fuori dei limiti di accettabilità per
  potere dare affidabilità ai clinici sul risultato
  di laboratorio
• E un metodo per mantenere entro limiti ben
  definiti gli errori che possono verificarsi nelle
  analisi chimico-cliniche
• Condizione indispensabile è avere a disposizione
  un siero di controllo omogeneo, stabile nel tempo
  e con una composizione clinica simile al campione
  da esaminare

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• I campioni da sottoporre al test e i campioni di
  controllo devono essere analizzati insieme senza
  un ordine predefinito e senza distinzione tra
  loro
• Per una corretta analisi del controllo di qualità
  si usa il Metodo di Shewart- Levey-Jannings e la
  interpretazione della cosiddetta carta di
  controllo della media (vedi figura)
• Tale procedimento viene anche detto controllo
  continuo della qualità dei risultati e permette
  una verifica costante della eventuale
  inaccuratezza di reagenti, apparecchiatura, e
  metodo e permette quindi di evitare linsorgenza
  di errori sistematici

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(No Transcript)
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CONTROLLO ESTERNO

• E la verifica di qualità con la quale il
  laboratorio confronta la propria capacità
  analitica con quella di altri laboratori
  nellambito regionale, nazionale, o anche
  internazionale
• Questo controllo si basa sulla analisi di
  campioni incogniti provenienti da una struttura
  che organizza il controllo di qualità e si occupa
  della preparazione e taratura dei campioni
  incogniti e dellelaborazione statistica dei dati
  ottenuti dai vari laboratori partecipanti

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• Questo controllo di qualità non pretende di
  essere la soluzione a tutti i problemi che
  possono generare errori nel risultato analitico,
  ma è un modo di razionalizzare, controllare e
  minimizzare le variabili di un laboratorio di
  analisi
• Esso è di importanza fondamentale nel
  monitoraggio e nel miglioramento della precisione
  analitica della accuratezza, inoltre fornisce un
  contributo nella scelta dei metodi, dei reagenti,
  e delle apparecchiature che possono fornire
  prestazioni migliori
• Molti laboratori hanno iniziato un processo di
  certificazione della loro qualità seguendo le
  norme Iso 9002, modificate e rese applicabili da
  apposite commissioni delle società scientifiche

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CONTROLLO DI QUALITA IN EMATOLOGIA

• Metodo ieri e oggi consiste nel ripetere la
  misura in due giorni successivi su campioni di
  sangue conservati in frigorifero
• Metodo di Bull per quanto riguarda le emazie, l
  MCV, l MCH e l MCHC si mantengono costanti nel
  tempo

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CONTROLLO DI QUALITA IN COAGULAZIONE

• Grande rilevanza hanno le numerose variabili
  preanalitiche (tempi e modalità del prelievo,
  trasporto e conservazione) e postanalitiche
  (modalità di espressione dei risultati e
  interpretazione dei medesimi)
• Lespressione dei risultati dei parametri
  emocoagulativi sono spesso di difficile
  interpretazione, in parte anche per la varietà
  dei reagenti e dei principi operativi degli
  strumenti

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• La grande varietà delle fonti di tromboplastina
  tessutale impiegata come reagente rende precario
  il confronto fra valori ottenuti da laboratori
  diversi
• In questo caso è consigliabile procedere alla
  calibrazione della tromboplastina in uso nel
  laboratorio contro lo standard internazionale più
  appropriato, scegliendo lo standard della stessa
  specie della tromboplastina da calibrare
• Mettendo a confronto i risultati ottenuti con la
  tromboplastina da calibrare contro i risultati
  ottenuti con la tromboplastina standard si
  ottiene in un grafico una retta che è l
  espressione della International Sensitivity Index
  o ISI

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• Il valore uguale ad 1 indica che la
  tromboplastina da calibrare ha la stessa
  sensibilità della tromboplastina standard
• In seguito la tromboplastina così calibrata
  viene a confrontarsi con quella di riferimento
  applicando la formula dell INR (International
  Normalized Ratio), che è data dal rapporto tra il
  PT del paziente in secondi fratto il PT del
  controllo sempre in secondi
• Il calcolo dellINR quindi consente di conseguire
  una discreta uniformità di risultati specie in
  pazienti con anticoagulanti

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• Attualmente le più importanti ditte che producono
  materiali diagnostici per la coagulazione
  provvedono a valutare linterazione del loro
  reagente con gli strumenti di misura di più largo
  uso con valori di ISI gia pronti per la
  confrontabilità dei risultati