Prof. Maurizio Pietro Faggioni

1

Lavorare con le cellule staminali.

• Prof. Maurizio Pietro Faggioni

2
Introduzione
3

• Uno dei campi più affascinanti della ricerca
  biomedica odierna è quello legato alle ricerche
  sulle cellule staminali.

4

• Gli studi in corso per penetrarne le dinamiche
  differenziative e per poterle impiegare in ambito
  terapeutico hanno raggiunto la ribalta dei mezzi
  di comunicazione di massa e hanno acceso un nuovo
  e appassionante dibattito pubblico.
• Ci sono urgenti e delicate questioni etiche e
  legali connesse con la produzione e alla
  manipolazione delle cellule staminali.
• Si profilano infine orizzonti inediti e
  rivoluzionari per la stessa comprensione del
  fenomeno della vita.

5

• Biologia
• delle cellule staminali

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Distinguiamo tre tipi di staminali1.
Staminali adulte2. Staminali derivate da
embrioni3. Staminali pluripotenti indottele
prime si trovano in natura, le altre due sono
frutto di manipolazioni.
7
1. Cellule staminali adulte
8
Nellembrione le cellule, dapprima totipotenti
(capaci di dare origine a ogni tessuto, inclusi
gli annessi), si differenziano nelle cellule
pluripotenti del disco embrionale (capaci di dare
origine ai diversi tipi cellulari) e poi nelle
multi e unipotenti dei tre foglietti embrionali.
9

• Le cellule dellembrione tendono a differenziarsi
  nelle cellule specializzate dei diversi tessuti
  adulti.
• Però, restano, anche nelladulto, alcune cellule
  solo parzialmente differenziate.
• Sono dette cellule staminali (stem cells).

10

• Stamen in latino significa filo, ma anche
  gambo o tronco di una pianta (in castigliano
  cèlulas troncales)

11

• Le cellule staminali sono capaci di
  moltiplicarsi, se necessario, per sostituire le
  cellule dei tessuti a rapido turn over
  (epidermide, mucosa intestinale, sangue che sono
  detti tessuti labili o rinnovabili) e per
  reintegrare cellule morte o danneggiate.

12
(No Transcript)
13

• .
• Esse possono andare incontro a mitosi e dare
  origine a una progenie di cellule figlie
• una parte progredisce nel cammino differenziativo
  sino a uno specifico tipo cellulare
• unaltra parte permane indifferenziata e funge da
  serbatoio di nuove staminali.

14
(No Transcript)
15
Presenza ubiquitaria
16

• Classicamente si pensava che le cellule
  staminali fossero presenti solo nei tessuti
  adulti che vanno incontro a rapida e fisiologica
  sostituzione (turn-over) o capaci di riparazione.
• Una delle scoperte fatte alla fine degli anni
  90 riguarda la loro presenza in tessuti finora
  ritenuti non rinnovabili.

17
Staminali nel Sistema Nervoso Centrale

• Anche nel SNC sono presenti cellule staminali
  che possono dare origine ai principali tipi
  cellulari del tessuto nervoso le cellule gliali
  e i neuroni.

18

• JOHANSSON ha dimostrato che nel ratto la sede
  delle cellule staminali neurali è lependima, il
  sottile rivestimento epiteliale monostratificato
  che ricopre la superficie dei ventricolari
  cerebrali.
• Frammiste fra le cellule ependimali mature, sono
  state evidenziate cellule staminali che
  presentano i tipici marcatori delle cellule
  neurali immature e che, sebbene raramente,
  entrano in mitosi.
• La possibilità di autoriparazione del SNC è,
  però, molto limitata.

19
Plasticità delle staminali delladulto

20

• Si riteneva che le cellule staminali delladulto
  avessero perso del tutto la pluripotenzialità
  delle cellule embrionali e potessero
  differenziarsi entro un ambito alquanto più
  ristretto.
• Questa persuasione era in linea con la
  comprensione tradizionale della biologia sulla
  unidirezionalità del processo differenziativo
  normale.
• È stata evidenziata una flessibilità maggiore di
  quella che si supponeva classicamente.
• In particolari condizioni, una staminale
  delladulto può dare origine anche a tipi
  cellulari molto diversi.
• Tale capacità è detta plasticità o
  transdifferenziazione.

21
Le staminali nello stroma del midollo osseo, di
origine mesenchimale, possono differenziarsi non
solo negli elementi del sangue e in cellule di
analoga derivazione embriologica (miociti,
osteociti, condrociti microglia del SNC), ma
anche, in particolari condizioni, in cellule di
derivazione neuroepiteliale, quali gli astrociti.
Plasticità delle staminali Mesenchimali nel ratto
22

• Nel gennaio del 1999 C. Bjornson e A. Vescovi
  hanno riferito di aver osservato che alcune
  cellule staminali nervose prelevate dal cervello
  di topo, trasferite in topi il cui midollo
  emopoietico era stato distrutto per irradiazione,
  potevano evolvere in cellule ematiche.
• Lanno seguente lo stesso gruppo ha mostrato come
  le cellule staminali cerebrali umane, al pari di
  quelle murine, sono in grado di dare origine a
  cellule di muscolo scheletrico.

23
Da dove provengono le staminali di tipo
adulto?Da donatori (bambini o adulti)Dal
sangue del cordone ombelicaleDal liquido
amniotico
24
Da organismi adulti

• Le cellule staminali da organismo adulto
  provengono da donatori (bambini e adulti).
• Molto diffusa è la pratica del dono di midollo
  osseo per il trasferimento di staminali
  emopoietiche.

25

• Molto diffusa è la pratica del dono di midollo
  osseo per il trasferimento di staminali
  emopoietiche.

26
(No Transcript)
27
(No Transcript)
28

• Si possono fare anche autotrapianti di staminali
  raccolte nellorganismo stesso che se ne gioverà.
• Un grande vantaggio dellautotrapianto è
  lassenza di rigetto.
• Si stanno perfezionando le tecniche per
  lisolamento delle staminali dal sangue e dai
  tessuti.

29
Staminali da sangue cordonale

• Una ulteriore fonte di staminali di tipo adulto
  è costituita dal sangue del cordone ombelicale.
• Le cellule cordonali hanno mostrato di essere
  meglio tollerate immunologicamente dai riceventi
  rispetto a quelle dei donatori adulti.
• Sono in scarsa quantità rispetto alle necessità
  di un organismo adulto, ma hanno il vantaggio di
  essere facilmente e largamente disponibili, senza
  danneggiare né le madri, né i neonati.

30
Staminali da sangue di cordone ombelicale

• Raccolto,centrifugato,purificato, congelato.
• 150 gr. di sangue

31

• Cellule staminali sono estratte da feti
  risultato di aborti spontanei o indotti.
• Cellule staminali sono state raccolte anche dal
  liquido amniotico.

32
2. Cellule staminali derivate da embrioni (ESC)
33
Le staminali dallembrione (ESC)

• Le cellule staminali embrionali provengono dalla
  blastocisti.
• Prelevando con tecniche di immunochirurgia i
  singoli blastomeri della massa cellulare interna,
  quella che darà origine al corpo del nuovo
  essere.

34
Disgregazione della blastocisti
35
Si possono usare anche le cellule germinali
primordiali, cellule presenti nel feto dopo la 4a
settimana, da cui si formeranno spermatozoi ed
ovociti.
36

• Le ESC sono pluripotenti.
• Possiedono una grande flessibilità, maggiore di
  quella delle staminali da adulto, potendo dare
  origine praticamente a qualsiasi tipo cellulare e
  tessuto, esclusi solo quelli degli annessi.

37
Differenziazione in unampia gamma di tipi
cellulari
38

• Isolare cellule indifferenziate da embrioni è
  agevole, mantenerle in coltura allo stato
  pluripotenziale impedendo la loro spontanea
  progressione verso la specializzazione è invece
  arduo.
• Esiste, infatti, una intrinseca tensione delle
  forme viventi a muoversi verso stadi evolutivi e
  maturativi sempre più definiti.

39

• Una volte poste in coltura mostrano una
  spontanea tendenza a differenziarsi e a formare
  strutture organizzate multicellulari note come
  corpi embrioidi (embryoid bodies) che contengono
  elementi riferibili ai tre foglietti embrionali,
  ectoderma, mesoderma ed endoderma.
• Da qui si possono estrarre cellule staminali di
  vario tipo

40
(No Transcript)
41

• Dopo lunghe esperienze con gli animali, il 5
  novembre 1998 la Geron Corporation ha annunciato
  che un gruppo di scienziati era riuscito a
  stabilire linee di coltura di cellule staminali
  embrionali umane dando origine a cellule
  virtualmente immortali, capaci cioè di riprodursi
  indefinitamente.

42
Linee di cultura di staminali provenienti dalla
massa cellulare interna
43
Colture di cellule staminali

• La possibilità di isolare le cellule staminali e
  la capacità di mantenerle in coltura ha acceso
  speranze e attese irrealistiche e ha suscitato
  gravi problemi etici.

44
3. Cellule staminali pluripotenti indotte
45
Riprogrammare le cellule somatiche per avere iPS
cells (induced pluripotent stem cells)
46

• Metodica proposta nel 2006
• da Takahashi e Yamanaka di Kioto.
• Premio Nobel 2012

47

• Induction of Pluripotent Stem Cells from Mouse
  Embryonic and Adult Fibroblast Cultures by
  Defined Factors, Cell , august 2006, vol. 126,
  663-676.

48
(No Transcript)
49

• La tecnica descritta da Yamanaka presenta il
  rischio tumorale proveniente dagli oncogeni.
• Si stanno sviluppando tecniche biologicamente
  più sicure che non prevedono il ricorso a
  retrovirus.

50

• Se si dimostrerà priva di seri rischi, sembra
  essere la via eticamente preferibile per avere
  staminali autologhe di tipo embrionale.
• Un limite che si va evidenziando è che sembrano
  presentare una velocità di invecchiamento
  maggiore delle staminali derivate da embrioni.

51
Tre vie per riprogrammare le cellule adulte
52

• Fonti di cellule staminali

53
Provenienza delle cellule staminali
54
Embrione precoce cellule totipotenti
Blastocisti cellule pluripotenti
Adulto cellule stam. multi e unipotenti
Adulto cellule differenziate
55
Tipi di staminali
56
(No Transcript)
57
1. Embrioni e feti

• Le cellule staminali embrionali sono prelevate
  da embrioni provenienti da tecniche di
  procreazione artificiale (soprannumerari o
  prodotti ad hoc).

58
(No Transcript)
59

• Uso terapeutico
• delle cellule staminali

60

• Le nostre conoscenze sulle cellule staminali
  sono ancora incomplete.
• conosciamo ancora in modo insufficiente i segnali
  biochimici che determinano la differenziazione
  dei blastomeri embrionali totipotenti in cellule
  pluripotenti e multipotenti e infine nei vari
  tipi di cellule specializzate
• non sappiamo ancora abbastanza sui markers
  biologici che le contraddistinguono e che le
  fanno riconoscere
• non sappiamo molto sui meccanismi fisiologici che
  presiedono al loro funzionamento e al loro ciclo
  vitale nellorganismo adulto.

61

• Nonostante le conoscenze ancora imperfette, le
  staminali stimolano speranze nei malati e ricerca
  negli scienziati.
• Un campo nel quale si ha una esperienza clinica
  ormai consolidata è quello del trapianto di
  cellule staminali ematopoietiche del midollo
  osseo.

62
(No Transcript)
63

• Le potenziali applicazioni terapeutiche delle
  cellule staminali sono entusiasmanti, soprattutto
  per quanto riguarda la sostituzione di cellule e
  tessuti danneggiati nellinfarto miocardico, nel
  SNC dopo ictus (stroke) e nei processi
  degenerativi (nel diabete insulinodipendente o
  nel cervello).

64
Possibili usi delle staminali neurali
65
(No Transcript)
66

• Nel morbo di Parkinson sono già stati
  sperimentati trapianti di cellule
  dopamino-produttrici prelevate da feti umani e si
  va studiando la possibilità di trapianti a
  partire da cellule staminali neuronali prelevate
  dal cervello fetale, messe in coltura e fatte
  sviluppare, con gli opportuni fattori di crescita
  e di differenziazione.

67
(No Transcript)
68
(No Transcript)
69
STAMINA - Business e speranze

• 2007 Davide Vannoni inizia trattamenti a base di
  staminali mesenchimali
• 2009 Nasce Stamina Foundation.
• 2010 In seguito a decessi e lesioni a pazienti,
  inchiesta.
• 2011 Inizia collaborazione con Brescia con
  sovvenzioni regionali.
• 2012 LAIFA, dopo controlli blocca i trattamenti
  mass media e giudici insorgono.

70
(No Transcript)
71
STAMINA - Business e speranze

• 2013 Inizia iter della sperimentazione sui dati
  forniti dopo lunga reticenza da Stamina.
• Accuse e preoccupazioni di scienziati italiani
• Articolo veentemente contrario su Nature.
• Blocco della sperimentazione progettata

72
(No Transcript)
73
Staminali e organi bioartificiali

• Un altro settore promettente è quello della
  produzione di tessuti ed organi bioartificiali.
• La possibilità di poter disporre di una fonte
  sicura di cellule umane ha aperto orizzonti nuovi
  per questa branca della bioingegneria. Un saggio
  impiego di interazioni cellulari e tissutali e
  luso di matrici extracellulari potrebbe
  permetterci in futuro di produrre organi
  complessi come rene o polmone.

74
Trachea artificiale struttura biopolimerica e
staminali
75
Trapianti di staminali in utero

• Si sono sperimentati trapianti in utero di
  cellule staminali emopoietiche estratte dal
  fegato o dal timo di feti provenienti da aborti
  spontanei o procurati.

76
Trapianti di staminali in utero

• Vantaggi del trapianto precoce
• Essendo il sistema immunitario ancora immaturo,
  sono meglio tollerate
• la rapida espansione del compartimento
  emopoietico fetale permette alle cellule
  trasferite di trovare più facilmente spazio per
  attecchire
• la correzione precoce della disfunzione permette
  uno sviluppo più soddisfacente del feto.

77
Staminali e terapia genica

• Una combinazione di terapia genica e
  autotrapianto potrebbe essere realizzata in
  soggetti affetti da gravi malattie genetiche.
• Le cellule staminali di un certo tipo cellulare,
  un volta estratte dal soggetto o prodotte da
  cellule somatiche del soggetto, potrebbero essere
  corrette dallanomalia genica e reintrodotte nel
  soggetto di provenienza per costituire una nuova
  popolazione sana.

78
(No Transcript)
79
Staminali e progresso scientifico

• Le cellule staminali potranno essere impiegate
  per lo studio della biologia dello sviluppo e
  chiarire lati oscuri dellembriologia in
  riferimento al funzionamento dei geni, alla
  regolazione dei rapporti fra i tessuti,
  allazione dei fattori di crescita, con benefiche
  ricadute in campo clinico e terapeutico.

80
Staminali e sperimentazione farmacologica

• Si può prevedere anche lutilità pratica delle
  cellule staminali come sistemi di riferimento per
  valutare la tossicità e lefficacia di nuovi
  farmaci e sostanze chimiche.

81
Rischi nelluso delle cellule staminali

• Luso terapeutico di cellule staminali, specie
  quelle di derivazione embrionale comporta gravi
  rischi.
• Le staminali murine si sono dimostrate
  tumorigeniche, sviluppandosi in teratomi o
  teratocarcinomi, quando sono state inoculate in
  topi adulti

82

• Le staminali provenienti da embrioni, nei
  modelli sperimentali animali hanno dato origine
  non di rado a teratomi.

Teratoma mediastinico
83
(No Transcript)
84

• Problemi etici
• nel prelievo di cellule staminali

85

• Applicando le regole generali del prelievo da
  vivente, sono da ritenersi in generale eticamente
  corretti i prelievi di cellule staminali
  provenienti da organismi umani viventi
• se
• a. viene rispettata la dignità e la libertà del
  donatore.
• b. non ci sono danni per lintegrità e la
  sussistenza del donatore.

86
Prelievo da adulto

• Il prelievo e luso di staminali provenienti da
  un adulto, a parte i consueti problemi clinici
  legati alla incompatibilità genetica e al
  rigetto, non pone questioni morali
  sostanzialmente diverse da quelle poste da
  qualsiasi prelievo di materiale biologico a fini
  di trapianto o di sperimentazione.

87
Prelievo da bambino

• Quando il donatore è un bambino si pone la
  questione del consenso da parte dei genitori nei
  confronti di un prelievo da figli minorenni.
• Il prelievo, infatti, non è motivato dal bene del
  minore stesso (es. prelievo di midollo osseo a
  vantaggio di un fratellino con grave patologia di
  natura linfoematica).
• Il prelievo si può fare se non comporta un
  rischio serio per il bambino donatore.
• Ilecito il concepimento in vitro e la selezione
  di un potenziale donatore per il fratellino o la
  sorellina bisognosi di un trapianto di cellule
  staminali.

88
Prelievo da cordone ombelicale

• Riguardo alluso di cellule staminali ricavate
  dal sangue del cordone ombelicale non esistono
  problemi morali insuperabili, ma sono stati
  evidenziati alcuni aspetti etico-deontologici
  peculiari.

89
Prelievo da cordone ombelicale

• Ragionevolezza della conservazione per uso
  autologo e/o eterologo.
• Modi di raccolta e rischi.
• Titolarità del tessuto conservato consenso e
  uso.
• Uso autologo del tessuto conservato nel pubblico.
• Uso eterologo del tessuto conservato nel privato.
• Indennizzo per luso sociale di tessuto
  conservato nel privato.
• Automaticità della donazione anche nel privato.

90

• Ragionevolezza della conservazione
• Uso autologo (dubbio valore, tranne per rischi
  familiari o personali noti).
• Uso eterologo (ragionevole).
• Le Banche private tendono a enfatizzare i
  benefici della conservazione autologa.

91

• Modi di raccolta e rischi
• Raccolta dopo il taglio del cordone e prima del
  distacco di placenta.
• Le modalità del parto non devono essere
  condizionate dalla raccolta.

92

• Titolarità del tessuto conservato
• Il cordone è parte dellorganismo del nascituro.
• Non è possesso della madre.
• La madre prende decisioni in sostituzione del
  figlio.
• Leventuale dono risponde a una presunzione
  solidaristica, non essendoci danno per il
  donatore.
• Nel privato si tende a fare contratti per 18-20
  anni (maggiore età del soggetto e attualmente
  limite ragionevole per luso delle cellule).

93

• In Italia fino al gennaio 2008, in base ad una
  ordinanza del 2004 rinnovata nel 2007, era
  possibile solo libera donazione e conservazione
  nel pubblico.
• Erano vietate le banche private per lautologo,
  anche se associazioni (es. Osidea) mediavano con
  centri stranieri.
• Era permesso luso dedicato per situazioni
  particolari (es. famiglie con alto rischio di
  patologie del sangue).

94

• La privatizzazione della raccolta e
  dell'utilizzo del sangue da cordone ombelicale ci
  lascia molto perplessi per ragioni di giustizia
  sociale. E' evidente, infatti, che solo chi
  avesse ampie possibilità economiche potrebbe
  farvi ricorso. Senza dire, poi, che in tal caso
  il 99 dei campioni di sangue resterebbe di fatto
  inutilizzato.
• Ma per dare un forte impulso alla donazione del
  cordone, bisognerebbe dare alla madre la certezza
  che, ove serva per il proprio figlio, possa farne
  effettivamente ricorso.
• Al limite potrebbe funzionare anche la via
  spagnola, ossia un sistema misto. In Spagna è
  previsto che ognuno possa conservare il proprio
  sangue da cordone ombelicale (volontariamente e
  pagando), ma ove serva ad un altro malato, lo
  Stato può richiederlo.
• Scienza e vita 13-3-2007

95

• La direttiva europea sulle biobanche prevede
  lindennizzo delle spese sostenute se lo Stato
  destina per luso sociale un tessuto conservato
  nel privato.
• Giustizia o larvata commercializzazione del
  corpo?
• Automaticità della donazione anche per il tessuto
  conservato nel privato o secondo regole generali
  della donazione (autologa-solidale).
• Solidarietà obbligata?

96

• Modifiche dellOrdinanza ministeriale
• del 4 maggio 2007
• approvate il 17 gennaio 2008
• art. 8 bis.
• Per incrementare la disponibilità di cellule
  staminali del cordone ombelicale ai fini di
  trapianto, è autorizzata la raccolta autologa, la
  conservazione e lo stoccaggio del cordone
  ombelicale da parte di strutture pubbliche e
  private autorizzate dalle regioni o dalle
  provincia autonome, sentiti il CNT e il CNS.
• La raccolta avviene senza oneri per il SSN e
  previo consenso alla donazione per uso allogenico
  in caso di necessità per paziente compatibile.

97

• Il Governo con un emendamento inserito nella
  legge del 27 febbraio 2009,  n. 14, ha abrogato
  la conservazione autologa solidale, ripristinando
  il divieto, sancito con successive ordinanze
  urgenti dal Ministero della Salute dal 2002.
• Si prevede la possibilità di conservazione
  autologa,  o dedicata, qualora esistano in
  famiglia rischi di malattie geneticamente
  determinate per le quali risulti scientificamente
  fondato e clinicamente appropriato lutilizzo di
  cellule staminali da sangue cordonale.
• In tali casi il SSN provvede gratuitamente,
  presso le strutture pubbliche, alla raccolta e
  stoccaggio per uso autologo o dedicato.

98

• In conclusione, ci sembra ragionevole
  raccogliere le raccomandazioni delle società
  scientifiche e dei centri di bioetica succitati,
  che non raccomandano o addirittura scoraggiano la
  conservazione autologa del SdCO.
• Crediamo che lattuale legislazione italiana sia
  coerente con quanto ora esposto e che essa sia
  altamente rispettosa dei diritti dei cittadini,
  portando ad un paritetico accesso ad una sorgente
  terapeutica ben riconosciuta (cellule staminali
  adulte) ed evitando lo spreco che si avrebbe se
  ognuno tenesse per sé il sangue, precludendone
  laccesso a non consanguinei.
• Scienza e vita, 27 febbraio 2009

99
Prelievo da feti abortiti

• Il ricorso a feti come fonte di cellule staminali
  si inscrive nel più vasto problema del prelievo
  di organi e tessuti fetali a scopo di trapianto.
• Non fa problemi il ricorso a feti provenienti da
  aborti spontanei (cfr. Dignitas personae, n. 32)
• Alcuni pur contrari allaborto, accettano cellule
  da aborti procurati se non cè rapporto fra atto
  abortivo e uso delle cellule.

100

• Il CNB ritiene pertanto che lammissibilità
  bioetica delle suddette pratiche sia da
  subordinarsi in primo luogo allaccertabilità
  della piena indipendenza come chiara separazione
  dei rispettivi processi decisionali tra il
  personale medico e/o listituzione sanitaria che
  praticano linterruzione volontaria della
  gravidanza, e i ricercatori e/o listituzione di
  ricerca che praticano la sperimentazione
  scientifica o clinica.
• Accertata tale indipendenza, ovvero sussistendo
  lassoluta garanzia che lesecuzione
  dellinterruzione volontaria di gravidanza non
  sia in alcun modo finalizzata allutilizzo dei
  tessuti fetali a fini sperimentali e/o
  terapeutici, il reperimento di tessuto fetale da
  interruzione volontaria di gravidanza e il suo
  utilizzo ai predetti fini scientifici e/o
  terapeutici sono da ritenersi pratiche moralmente
  ammissibili ove vengano soddisfatte le seguenti
  condizioni.
• Parere CNB 25 maggio 2005 (neuroni fetali e
  Huntington)

101

• Bisogna evitare lipocrisia di giustificare
  limpiego di tessuti di dubbia origine con
  limpossibilità morale di venire a conoscere le
  circostanze dellinterruzione di gravidanza,
  essendo a tutti noto che la fonte principale di
  tali tessuti sono gli aborti procurati.
• La scelta della tecnica abortiva e il
  coordinamento dei tempi di aborto e di raccolta
  configura de facto la partecipazione a una
  strategia abortiva.

102

• È insufficiente il criterio dellindipendenza
  formulato da alcuni comitati etici, vale a dire,
  affermare che sarebbe eticamente lecito
  lutilizzo di materiale biologico di illecita
  provenienza, sempre che esista una chiara
  separazione tra coloro che da una parte
  producono, congelano e fanno morire gli embrioni
  e dallaltra i ricercatori che sviluppano la
  sperimentazione scientifica.
• Il criterio di indipendenza non basta a evitare
  una contraddizione nellatteggiamento di chi
  afferma di non approvare lingiustizia commessa
  da altri, ma nel contempo accetta per il proprio
  lavoro il materiale biologico che altri
  ottengono mediante tale ingiustizia. Quando
  lillecito è avallato dalle leggi che regolano il
  sistema sanitario e scientifico, occorre prendere
  le distanze dagli aspetti iniqui di tale sistema,
  per non dare limpressione di una certa
  tolleranza o accettazione tacita di azioni
  gravemente ingiuste.
• Dignitas personae, 35

103

• Lembrione precoce
• come fonte
• di cellule staminali

104

• È molto forte il dibattito a livello
  scientifico, etico e giuridico sul ricorso a
  embrioni precoci o pre-embrioni ottenuti tramite
  tecniche di fecondazione in vitro o un giorno -
  tramite clonazione.
• Il prelievo di cellule staminali dallembrione ne
  prevede in genere la distruzione, per cui la
  questione di fondo ci riporta al valore della
  vita embrionale soprattutto quando sono in gioco
  gli interessi e i progetti delle persone.

105
La domanda previa alla discussione

• Lo status ontologico e assiologico conferito
  alla blastocisti umana e allembrione precoce.
• Chi o che cosa è lembrione?
• Quale valore e quale tutela dare alla sua
  esistenza?

106
(No Transcript)
107
Valore della vita embrionale

• Alcuni per motivi diversi negano
  lappartenenza a pieno titolo dellembrione al
  numero degli esseri umani.
• Per esempio, la distinzione, cara ai
  neocontrattualisti, fra gli esseri umani
  personali e gli esseri umani non persone fornisce
  un quadro di riferimento concettuale alla
  possibilità di usare gli embrioni.

108

• H. T. Engelhardt jr.

109

• Non tutti gli esseri umani sono persone.
• I feti, gli infanti, i ritardati mentali gravi e
  coloro che sono in coma senza speranza
  costituiscono esempi di non persone umane.
• Tali entità sono membri della specie umana. Non
  hanno status in sé e per sé, nella comunità
  morale. Non sono partecipanti primari allimpresa
  morale.
• Solo le persone umane hanno questo status
• H. T. Engelhardt, 1999

110
Valore della vita embrionale

• In una visione utilitarista, qualunque sia la
  risposta alla domanda sullo statuto ontologico
  dellembrione, possono darsi situazioni nelle
  quali è socialmente vantaggioso permettere la sua
  manipolazione e che sia giudicato irrazionale
  proibire la destinazione di embrioni a studi e
  applicazioni che potrebbero migliorare la vita e
  la salute di molte persone.

111
Valore della vita embrionale

• Per la bioetica centrata sulla persona
  lembrione, incluso lembrione precoce, è una
  vita umana e, quindi, merita lo stesso rispetto
  che si deve ad ogni altro essere umano.
• Non si ritiene perciò accettabile distruzione
  diretta di embrioni per qualsiasi motivo o
  finalità, anche nobile lessere umano non può
  mai diventare un mezzo.

112

• La vita umana innocente merita rispetto dal suo
  sorgere al suo tramontare, dal concepimento alla
  morte, per cui la distruzione intenzionale e
  diretta di un embrione umano vivente, in
  qualunque stadio di sviluppo si trovi e per
  qualsiasi scopo sia fatta è un disordine morale
  grave.
• CDF, Istruzione Donum Vitae, 1987

113

• La realtà dellessere umano, infatti, per tutto
  il corso della sua vita, prima e dopo la nascita,
  non consente di affermare né un cambiamento di
  natura né una gradualità di valore morale, poiché
  possiede una piena qualificazione antropologica
  ed etica. Lembrione umano, quindi, ha fin
  dallinizio la dignità propria della persona.
• Dignitas personae 5

114

• Il prelievo di cellule staminali dallembrione
  umano vivente causa inevitabilmente la sua
  distruzione, risultando di conseguenza gravemente
  illecito.
• Dignitas personae, 32

115

• Embrioni soprannumerari o residuali
• e crioconservati

116

• Esiste una certa convergenza, con importanti
  eccezioni (UK), sul divieto di produrre embrioni
  per scopi diversi da quello riproduttivo.
• Si propone invece da più parti luso
  sperimentale e terapeutico degli embrioni
  soprannumerari, provenienti cioè dalla
  fecondazione in vitro e rimasti inutilizzati in
  situazione di crioconservazione.

117
Argomenti principali addotti

• Lembrione precoce non ha statuto di piena
  umanità.
• Il dovere sociale di tutelare la vita embrionale
  deve essere bilanciato con il dovere di
  promuovere la salute dei cittadini.
• Questi embrioni sono condannati, per cui è meglio
  impiegarli per fini utili.

118

• Si obietta che la vita di un essere umano non può
  mai essere strumentalizzata e diventare un mezzo
  per il conseguimento di fini anche buoni.
• Lineluttabile destino di morte verso cui sono
  avviati gli embrioni soprannumerari non toglie il
  significato etico di una loro soppressione
  diretta.
• Dal punto di vista etico, esiste una differenza
  tra il lasciar morire, quando non è possibile
  impedire la morte, e causare la morte, quando
  lestinzione della vita dipende da un atto
  volontario evitabile.

119
CNB Parere sull'utilizzo degli embrioni
soprannumerari - 11 Aprile 2003

• In relazione all'avvio del VI Programma Quadro di
  Ricerca dell'U.E. il Ministro Moratti chiese al
  CNB se sia eticamente lecito
• a) svolgere sul territorio nazionale ricerche
  utilizzanti embrioni umani anche soprannumerari
  che ne determinino la distruzione
• b)svolgere ricerche utilizzanti cellule staminali
  derivate da embrioni umani prodotte in data
  successiva all'avvio del VI Programma Quadro di
  Ricerca dell'Unione Europea
• c) produrre cellule staminali derivate da
  embrioni umani anche soprannumerari.

120

• Considerato
• a) che gli embrioni umani sono vite umane a pieno
  titolo
• b) che esiste quindi il dovere morale di sempre
  rispettarli e sempre proteggerli nel loro diritto
  alla vita, indipendentemente dalle modalita' con
  cui siano stati procreati e indipendentemente dal
  fatto che alcuni di essi possano essere
  qualificati - con una espressione discutibile,
  perché priva di valenza ontologica -
  soprannumerari
• c) che (secondo il dettato della c.d. Convenzione
  di Oviedo) la sperimentazione a loro carico e'
  giustificata unicamente se praticata nel loro
  specifico interesse e non possa essere
  giustificata dal pur rilevante interesse generale
  della società e della scienza e che quindi non
  possa in alcun modo sostanziarsi nella loro
  distruzione

121

• d) che la Carta dei diritti fondamentali
  dell'Unione europea, proclamata a Nizza,
  riconosce l'esistenza di diritti fondamentali
  quali il diritto all'integrità fisica e psichica
  di ogni individuo nei confronti delle
  applicazioni della medicina e della biologia
• e) che l'eventuale finanziamento pubblico alla
  ricerca sugli embrioni non può che rafforzare e
  avallare ingiustificatamente l'erronea opinione
  che gli embrioni siano un mero insieme di
  cellule, prive di valore intrinseco, e quindi
  conseguentemente l'idea dell'irrilevanza bioetica
  della vita umana nella fase embrionale

122

• f) che la limitazione della sperimentazione agli
  embrioni soprannumerari, oltre a non avere
  motivazione logica, ma solo occasionale e
  pragmatica, favorirebbe surrettiziamente la
  pratica di produzione di embrioni in vitro a soli
  scopi di ricerca, indipendentemente cioe' da
  specifiche finalita' inerenti alla fecondazione
  assistita e in violazione quindi di consolidati
  principi bioetici
• g) che il prelievo di cellule staminali umane da
  embrioni, comportando la distruzione di questi
  ultimi, deve essere a pari titolo stigmatizzato,
  anche per l'ulteriore effetto eticamente
  inaccettabile di non orientare la ricerca verso
  la sempre piu' promettente ed eticamente
  impeccabile utilizzazione di cellule staminali
  prelevate da cordone ombelicale o da feti
  spontaneamente abortiti o di cellule staminali
  adulte.

123

• h) che le precedenti considerazioni trovano
  conferma nelle valutazioni espresse dal CNB,
  segnatamente nel documento Identita' e statuto
  dell'embrione umano (del 22.6.1996) e nel Parere
  del CNB sull'impiego terapeutico delle cellule
  staminali (del 27.10.2000).
• Di conseguenza, su ciascuno dei tre quesiti, il
  CNB, nella seduta plenaria dell'11.04.2003, dopo
  votazione per appello nominale, ha espresso
  parere negativo.
• (26 su 42)

124

• Dalla mozione di minoranza
• Sulla base di un attento bilanciamento dei
  valori in gioco - che tiene anche conto del fatto
  che gran parte di tali embrioni sarebbero
  comunque destinati ad essere distrutti - questa
  parte del Comitato ha ritenuto che "la rimozione
  e la coltura in laboratorio di cellule staminali
  da un embrione che non può essere impiantato non
  significhino una mancanza di rispetto nei suoi
  confronti, ma possano considerarsi se mai un
  contributo, da parte della coppia donatrice, alla
  ricerca di terapie per malattie difficilmente
  curabili e spesso inguaribili, che deriva da un
  atto di solidarieta'" e ha quindi concluso di
  ritenere "eticamente lecita la derivazione di
  cellule staminali a fini terapeutici dagli
  embrioni non più in grado di essere impiantati".

125

• Sono chiaramente inaccettabili le proposte di
  usare tali embrioni per la ricerca o di
  destinarli a usi terapeutici, perché trattano gli
  embrioni come semplice materiale biologico e
  comportano la loro distruzione.
• Neppure la proposta di scongelare questi
  embrioni e, senza riattivarli, usarli per la
  ricerca come se fossero dei normali cadaveri, è
  ammissibile.
• Dignitas personae, 18

126

• Sorte degli embrioni
• non più impiantabili
• Cfr. Parere CNB 26 ottobre 2007

127

• Possibile usare embrioni crioconservati che sono
  morti.
• Criteri di accertamento della morte embrionale
  (perdita della autorganizzazione)
• Sorte degli embrioni ancora vitali (lasciarli
  morire? darli in adozione?).

128

• Il disordine entro cui la ragione etica si
  trova ad operare segna profondamente gli stessi
  tentativi di soluzione.
• FAGGIONI M. , La questione degli embrioni
  congelati, "L'Osservatore Romano", 22-23 luglio
  1996, 6.

129

• Uso strumentale di embrioni
• e cooperazione al male

130
La cooperazione al male

• Cooperazione formale
• (condivido lintenzione cattiva)
• Cooperazione materiale
• (coopero allatto cattivo o lo facilito)
• Immediata
• Mediata (prossima e remota)

131

• Lutilizzo di cellule staminali embrionali, o
  cellule differenziate da esse derivate,
  eventualmente fornite da altri ricercatori,
  sopprimendo embrioni, o reperibili in commercio,
  pone seri problemi dal punto di vista della
  cooperazione al male e dello scandalo.
• Dignitas personae, 32

132

• Anche a prescindere dalla condivisione
  dellintenzione moralmente illecita di chi le
  produce, distruggendo embrioni, si corre il
  rischio di rafforzare rafforza una fabbrica di
  morte.
• Lecito probabilmente, per motivi proporzionati,
  usare linee cellulari già stabilite.
• Nelle imprese che utilizzano linee cellulari di
  origine illecita non è identica la responsabilità
  di coloro che decidono dellorientamento della
  produzione rispetto a coloro che non hanno alcun
  potere di decisione.

133

• Nuove metodiche
• per ottenere cellule staminali
• di tipo embrionale

134

• Gli scienziati stanno ideando procedure per la
  produzione di cellule staminali di tipo
  embrionale senza passare per la creazione o la
  distruzione di embrioni.

135
(No Transcript)
136
Cellule staminali da singoli blastomeri

• Per ora non garantisce lintegrità dellembrione
• I blastomeri dellembrione precoce sono
  totipotenti (embryo splitting?)
• Comunque è una operazione non fatta
  nellinteresse dellembrione

137
Partenogenesi ovocitaria
138
(No Transcript)
139
Chi o che cosa è il partenote?

• Organismo umano individuale di origine agamica.
• Struttura simil-embrionale priva dellimprinting
  genomico tipico della specie umana.

140
Imprinting genomico
141
Altered Nuclear Transfer (ANT)
142
(No Transcript)
143
(No Transcript)
144

• Si ottiene un embrione clonato, anche se
  difettivo e disabile?
• Oppure si ottiene una struttura biologica non
  adeguatamente organizzata, un semplice artefatto
  biologico?

145

• Le obiezioni etiche, sollevate da più parti
  contro la clonazione terapeutica e contro luso
  di embrioni umani formati in vitro, hanno spinto
  alcuni scienziati a proporre nuove tecniche, che
  vengono presentate come capaci di produrre
  cellule staminali di tipo embrionale senza
  presupporre però la distruzione di veri embrioni
  umani.
• Queste proposte hanno suscitato non pochi
  interrogativi scientifici ed etici, riguardanti
  soprattutto lo statuto ontologico del prodotto
  così ottenuto. Finché non siano chiariti questi
  dubbi, occorre tenere conto di quanto affermato
  dallEnciclica Evangelium vitae Tale è la
  posta in gioco che, sotto il profilo dellobbligo
  morale, basterebbe la sola probabilità di
  trovarsi di fronte ad una persona per
  giustificare la più netta proibizione di ogni
  intervento volto a sopprimere lembrione umano.
• (nota) Nuove tecniche di questo genere sono, per
  esempio, lapplicazione della partenogenesi
  alluomo, il trasferimento di un nucleo alterato
  (Altered Nuclear Transfer ANT) e la
  riprogrammazione assistita dellovocita (Oocyte
  Assisted Reprogramming OAR).
• Dignitas personae, 30

146

• Clonazione
• e cellule staminali

147
Problemi di istocompatibilità

• Parlando di trasferimento di materiale istologico
  fra individui diversi, si profila il grande
  ostacolo del rigetto.
• Nel campo dei trapianti, le cellule staminali
  potrebbero meglio dispiegare il loro potenziale
  terapeutico grazie a linee cellulari
  istocompatibili o addirittura identiche a quelle
  del ricevente.

148
Staminali e istocompatibilità

• Le cellule staminali trasferite in un soggetto
  costituiscono un vero e proprio trapianto e,
  come gli altri trapianti, possono andare incontro
  al fenomeno del rigetto.
• Lorganismo che le riceve le può riconoscere come
  not-self e attaccarle come estranee.

149
Soluzione ai problemi di istocompatibilità

• 1. Usare cellule staminali provenienti dal
  soggetto stesso (raccolte nelladulto o da sangue
  cordonale autologo). Le cellule staminali
  provenienti dal proprio cordone ombelicale o dal
  proprio organismo adulto non vanno incontro al
  rigetto (autotrapianti).
• 2. Riprogrammare cellule somatiche del soggetto.

150
.
Terapia con cellule staminali autologhe
autotrapianto
151

• 3. Cercare fra i consanguinei o i potenziali
  donatori quelli che hanno istotipi compatibili
  (matching ).
• Le staminali da cordone ombelicale sono più
  compatibili con i consanguinei e, in generale,
  meglio tollerate.

152

• Si pensa alla possibilità di produrre e
  conservare in apposite banche una larga quantità
  di stipiti cellulari da cui scegliere quelli
  maggiormente compatibili con i riceventi, magari
  intervenendo sugli antigeni di istocompatibilità
  per via genetica o rimuovendo dalla superficie
  cellulare le sostanze glico-proteiche che causano
  il riconoscimento da parte del ricevente
  (mascheramento).

153

• 4. Anche per le staminali da embrione si profila
  lostacolo del rigetto.
• Si sta lavorando con la produzione di embrioni
  per clonazione. (clonazione terapeutica).
• Si trasferisce il materiale nucleare prelevato
  dalle cellule somatiche degli stessi individui
  che hanno bisogno di cellule staminali e dei loro
  derivati.

154
Terapia con cellule staminali autologhe o
istocompatibili da clonazione
155

• Che cosè la clonazione?

156

• Le parole clone e clonazione derivano dal greco
• dal sostantivo ???? ramo, germoglio, rampollo
• dal verbo ??????? taglio rami, divido.

157
Germoglio (???? )
158

• È la produzione di un organismo geneticamente
  identico ad un altro attraverso una riproduzione
  agamica o asessuata (senza fusione di gameti).
• È, insomma, la produzione per via asessuata, di
  una copia di un organismo.
• I primi tentativi risalgono ai primi del XX
  secolo (Roux e Spemann).

159

• Tecniche di clonazione

160

• Fissione di un embrione o embryosplitting
• Trasferimento di nucleo

161
(No Transcript)
162
Clonazione per trasferimento di nucleo
163
Confronto riproduzione normale/clonazione
164
Venerdì 5 luglio 1996 nasce DOLLY pecora Finn
Dorset (nella foto con con la madre surrogata
Scottish Black-face) il primo mammifero clonato a
partire da cellule di adulto, unico nato di 8
embrioni ottenuti su 277 tentativi presso il
Roslin Intitute di Midlothian in Scozia.
165
(No Transcript)
166

• Di tanto in tanto viene annunciato che si è
  riusciti ad ottenere embrioni umani clonati.
• Finora nessuna annuncio è stato confermato con
  prove scientifiche.
• Il fatto che si sia riuscito a clonare mammiferi
  fa pensare che prima o poi qualcuno riuscirà a
  clonare luomo.

167

• Perché clonare,
• cioè duplicare
• un essere umano?

168

• Riprodurre individui di grande genio o di grande
  bellezza per migliorare la specie o per rendere
  la vita più piacevole.
• Riprodurre individui sani per evitare il rischio
  della malattia genetica insito in quel gioco del
  lotto che è la ricombinazione sessuale.
• Produrre vasti gruppi di esseri umani
  geneticamente identici, per consentire le
  ricerche scientifiche sullimportanza relativa
  della natura e delleducazione riguardo ai
  diversi aspetti delle prestazioni delluomo.
• Produrre un figlio per una coppia sterile.

169

• Produrre un figlio dotato di un genotipo di
  propria scelta di un personaggio famoso, di un
  ex-amante, del proprio consorte o anche proprio.
• Controllare il sesso dei figli che nasceranno il
  sesso di un nascituro clonato è lo stesso di
  quello dellindividuo adulto da cui è stato
  prelevato il nucleo donatore.
• Produrre gruppi di persone identiche da destinare
  a compiti particolari in pace e in guerra (non
  escluso lo spionaggio).
• Produrre copie di embrioni di ogni persona, da
  congelare e conservare finché non vi sia bisogno
  di una fonte di organi da trapiantare,
  geneticamente identica ad essa.
• Battere i Russi e i Cinesi, per evitare che
  progrediscano troppo nel campo della clonazione.
• Leon Kass, 1972

170

• È stata introdotta una distinzione fra
  clonazione terapeutica e clonazione procreativa.
• In effetti, non si tratta di tecniche diverse,
  ma di finalità diverse.

171
(No Transcript)
172

• La clonazione umana è in genere proibita dalle
  legislazioni (non da quella Inglese)
• Si è proposto di riservare il termine clonazione
  alla sola clonazione riproduttiva.
• La clonazione terapeutica viene come cell
  nuclear replacement o sostituzione del nucleo
  della cellula.

173

• Clonazione riproduttiva clonazione
• Clonazione terapeutica
• cell nuclear replacement o transfer

174

• In questo modo, quando una legge dice che la
  clonazione è proibita, si risponderà che la
  clonazione terapeutica non è una clonazione vera
  e propria perché non è destinata a dar vita ad un
  nuovo essere umano.

175
Bioetica dellaclonazioneumana
176

• Le perplessità intorno alla clonazione umana sono
  molteplici.
• Nella riproduzione per clonazione
• si oscura il legame fra trasmissione della vita e
  relazione interumana espressa dalla coppia
  coniugale attraverso i gesti del matrimonio.
• e si tende a negare - almeno a livello
  intenzionale - lunicità irripetibile e la
  libertà esistenziale della persona (cfr. Dignitas
  personae, 28-29).

177

• La clonazione umana è intrinsecamente illecita,
  in quanto, portando allestremo la negatività
  etica delle tecniche di fecondazione artificiale,
  intende dare origine ad un nuovo essere umano
  senza connessione con latto di reciproca
  donazione tra due coniugi e, più radicalmente,
  senza legame alcuno con la sessualità.
• Tale circostanza dà luogo ad abusi e a
  manipolazioni gravemente lesive della dignità
  umana.
• Dignitas personae 28

178
Procreazione e amore coniugale

• La procreazione di una nuova persona avviene nel
  contesto dellamore coniugale come frutto e segno
  della mutua donazione personale degli sposi, del
  loro amore, della loro fedeltà.
• Linviolabile bonum humanum della procreazione,
  consiste nella connessione fra la trasmissione
  della vita e lamore coniugale, in quanto amore
  personale, unitivo e fecondo.
• La connessione della genealogia della persona con
  lamore coniugale si attua per mezzo dei gesti
  coniugali che di quellamore sono il simbolo e
  lincarnazione (cfr. Dignitas personae, n. 9).

179

• AMORE
• CONIUGALE
• FIGLIO

ATTI CONIUGALI
180

• Qualora la clonazione avesse uno scopo
  riproduttivo, si imporrebbe al soggetto clonato
  un patrimonio genetico preordinato,
  sottoponendolo di fatto come è stato affermato
  ad una forma di schiavitù biologica dalla quale
  difficilmente potrebbe affrancarsi. Il fatto che
  una persona si arroghi il diritto di determinare
  arbitrariamente le caratteristiche genetiche di
  unaltra persona, rappresenta una grave offesa
  alla dignità di questultima e alluguaglianza
  fondamentale tra gli uomini.
• Dignitas personae 28

181

• Dalla particolare relazione esistente tra Dio e
  luomo fin dal primo momento della esistenza
  deriva loriginalità di ogni persona, che obbliga
  a rispettarne la singolarità e lintegrità,
  inclusa quella biologica e genetica.
• Ognuno di noi incontra nellaltro un essere
  umano che deve la propria esistenza e le proprie
  caratteristiche allamore di Dio, del quale solo
  lamore tra i coniugi costituisce una mediazione
  conforme al disegno del Creatore e Padre celeste.
  
• Dignitas personae 28

182

• Tuttavia, la clonazione procreativa mantiene una
  connessione con il senso umano del generare
  perché pone in essere un creatura e quindi ne
  ammette, sia pure in modo contraddittorio, la
  qualità personale.
• La clonazione terapeutica, invece si legge in un
  Documento del Centro di Bioetica dellUniversità
  Cattolica del 1999 stravolge il significato
  umano della generazione, non più pensata ed
  attuata per scopi riproduttivi, ma programmata
  per finalità medico-sperimentali (e perciò anche
  commerciali).

183

• Ancora più grave dal punto di vista etico è la
  clonazione cosiddetta terapeutica.
• Dignitas personae, 30

184
Dignità e valore degli embrioni clonati

• Quanto si è detto circa la produzione di
  embrioni come fonte di cellule staminali non
  cambia quando si parla di embrioni umani ottenuti
  per clonazione.
• Le modalità attraverso le quali viene chiamato
  alla vita un nuovo essere umano non cambiano la
  qualità ontologica ed etica di questa esistenza.

185

• Creare embrioni con il proposito di
  distruggerli, anche se con lintenzione di
  aiutare i malati, è del tutto incompatibile con
  la dignità umana, perché fa dellesistenza di un
  essere umano, pur allo stadio embrionale, niente
  di più che uno strumento da usare e distruggere.
• È gravemente immorale sacrificare una vita umana
  per una finalità terapeutica.
• Dignitas personae, 30

186
La clonazione ibrida

• Sono stati prodotti recentemente ibridi
  uomo-animale ottenuti inserendo nuclei di cellule
  somatiche umane in ovociti animali denucleati, al
  fine di produrre cellule staminali embrionarie
  dagli embrioni così ottenuti, detti cybrid.
• Si parla di clonazione ibrida.

187
(No Transcript)
188
La clonazione ibrida

• Gli embrioni così ottenuti sono biologicamente
  umani perché formati al 98 da DNA umano e,
  soprattutto, perché in possesso di un genoma
  umano sostanzialmente integro.
• Il restante è rappresentato dal DNA mitocondriale
  di origine animale (DNA non nucleare) che, però,
  è destinato a funzioni legate al metabolismo e
  alla produzione di energia.

189

• Recentemente sono stati utilizzati ovociti
  animali per la riprogrammazione di nuclei di
  cellule somatiche umane generalmente chiamata
  clonazione ibrida al fine di estrarre cellule
  staminali embrionali dai risultanti embrioni,
  senza dover ricorrere alluso di ovociti umani.
• Dal punto di vista etico simili procedure
  rappresentano una offesa alla dignità dellessere
  umano, a causa della mescolanza di elementi
  genetici umani ed animali capaci di turbare
  lidentità specifica delluomo.
• Dignitas personae, 33

190
La libertà di ricerca e biopolitica

• Che rapporto fra ricerca scientifica e società?
• Qual è il rapporto corretto fra controllo sociale
  e libertà di ricerca?

191
GRAZIE