SB BIOSAFETY TRAINING Richard Rebar, RBP, CBSP

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SB BIOSAFETY TRAININGRichard Rebar, RBP, CBSP

• July 1999
• Tradução e adaptação - Renato M. Allemand
• Abril/Maio 2001

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Agenda

• Elementos do Programa de Biossegurança
• Avaliação de Risco Biológico
• MSDSs de Substâncias Infecciosas
• Treinamento em Biossegurança
• Perguntas
• Respostas

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ELEMENTOS DO PROGRAMA DE BIOSSEGURANÇA

• Organização
• Manual de Biossegurança
• Registro do Controle de Inventário
• Avaliações de Risco e Controle de Riscos
  Biológicos
• Treinamento em Biossegurança
• Suporte Médico
• Programa de Auditoria
• Documentação

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ELEMENTOS DO PROGRAMA DE BIOSSEGURANÇA
Organização

• Designação do representante na Biossegurança
• Papel do Setor Segurança e Meio Ambiente
• Estabelecimento de Responsabilidades

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ELEMENTOS DO PROGRAMA DE BIOSEGURANÇA Manual de
Biosegurança

• Desenvolver manual de Biossegurança que inclua
• Controles de Engenharia e Práticas de Trabalho
• Normatizar Procedimentos de Operação no
  laboratório de Microbiologia e outros locais
• manuseio de culturas / amostras
• Respostas a derrames
• Descontaminação / desinfecção
• Disposição de resíduos biológicos e de
  descontaminação
• Treinamento, Programa e Documentação
• Programa de vacinação (se requerido)
• Comunicação de riscos e suas associações

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ELEMENTOS DO PROGRAM,A DE BIOSSEGURANÇA Registro
e Controle de Inventário

• Registro
• Identificar agentes
• Classificar os agentes
• Identificar procedimentos
• Identificar condição de estocagem
• Definir responsabilidades
• Controle de Inventário
• Documento de Inventário
• Designação de controles

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ELEMENTOS DO PROGRAM,A DE BIOSSEGURANÇA
Treinamento em Biossegurança

• Identificar os agentes utilizados
• Prover treinamento em biossegurança
• Prover treinamento específico
• Uso e manutenção dos controles e EPIs
• Prover informação nas vacinações
• Avaliar a efetividade do treinamento

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ELEMENTOS DO PROGRAM,A DE BIOSSEGURANÇA Suporte
Médico

• Base médica
• Imunização (se apropriado)
• Primeiros socorros de emergência
• Treinamento adequado em reconhecimento de
  sintomas
• Procedimento de relato de incidente / lesão

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ELEMENTOS DO PROGRAM,A DE BIOSSEGURANÇA Programa
de Auditoria

• Tipos de auditorias / inspeções
• Inspeção do departamento local
• Auditoria Externa
• Acompanhamento de Inspeção

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ELEMENTOS DO PROGRAM,A DE BIOSSEGURANÇA
Documentação

• Registro de aprovação
• Arquivo médico
• Registro de vacinação
• Registro de treinamentos
• Registros de auditoria
• Resultados de avaliação de risco

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AVALIAÇÃO DE RISCOS BIOLÓGICOS

• Identificar riscos
• Quantificar riscos
• Identificar controles
• Plano de ação
• Documentação

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AVALIAÇÃO DOS RISCOS BIOLÓGICOS Identificação de
Riscos

• Risco biológico identificar / nome
• Infeccioso para humanos
• Infeccioso para animais
• Infeccioso para outras formas de vida no meio
  ambiente

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AVALIAÇÃO DOS RISCOS BIOLÓGICOS Quantificação
dos Riscos

• Biossegurança Nível (BL-1, BL-2, BL-3, BL-4)
• Volume de material infeccioso presente
  (quantidade)
• Dose infecciosas (1 organismo para 100,000 ou
  mais)
• Modo de infeccção (parenteral, aérea, ingestão)
• Portal de acesso (mucosasolhos, cutânea,
  pulmões, estômago)
• Condição do hospedeiro (imunocompromissado,
  saudável)
• Existência de vacina (imunização do agente)
• Existência de tratamento com drogas (efetiva /
  profilaxia)

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AVALIAÇÃO DOS RISCOS BIOLÓGICOS Identificação e
controles

• Hierarquia dos controles
• Substituição/Eliminação
• Controles de engenharia
• Confinamento primário
• Confinamento secundário
• Controles administrativos
• Práticas de trabalho
• Equipamento de proteção pessoal

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AVALIAÇÃO DOS RISCOS BIOLÓGICOS Plano de ação

• Responsabilidades
• Cronograma de implementação
• Ações corretivas
• Identificação das datas de término
• Fechamento

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MSDSs DAS SUBSTÂNCIAS INFECCIOSAS

• Disponíveis através de
• Ministérios da Saúde
• Laboratório do Centro de Controle de Doenças
• Ottowa, Canada
• Também disponível na página da Internet
• http//www.hc-sc.gc.ca/hpb/lcdc/biosafety.index.ht
  ml

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Técnicas e práticas
de laboratório

• Conhecimento da supervisão
• Pessoal
• Ter consciência dos riscos em potencial
• habilidade na prática / técnicas
• Manual de Biossegurança específico do laboratório

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Controles de
Segurança

• Cabines Biosseguras (BSCs) BSL-2/3 (Eng.)
• Equipamento de Proteção Pessoal - EPIs
• Luvas
• Macacões
• Equipamentos para pipetar (Eng.)
• Centrífugas segura e cobertas (Eng.)
• Proteção para face e olhos (EPI)
• Proteção respiratória BSL-3 para derrames e
  limpeza (EPI)

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Princípios da
Biossegurança

• Biossegurança níveis 1-3
• Guias descritivos de combinações de
• Práticas de laboratório / técnicas
• Práticas normais
• Práticas especiais
• Equipamento de segurança (Barreiras primárias)
• Instalações do laboratório (Barreiras secundárias)

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Princípios da
Biossegurança

• Biossegurança níveis 1-3 promove
• Aumento dos níveis de proteção pessoal e
  ambiental
• Guias para trabalho seguro nos laboratórios de
  microbiologia e biomédicos

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - classificação
Biossegurança nível 1

• Apropriado para trabalhos envolvendo agentes bem
  caracterizados reconhecidos como não causadores
  de doenças para humanos adultos e com mínimo
  potencial de risco para o funcionários saudáveis
  do laboratório e ambiente.

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - classificação
Biossegurança nível 1

• Exemplos
• Bacillus subtilis
• Bacillus cerculans
• Naegleria gruberi

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Práticas normais
de segurança Biossegurança nível 1

• Mãos lavadas
• Mobiliário adequado e robusto (firme, forte)
• Uso de uniformes de laboratório and luvas
• Uso de outro EPI (proteção para olhos/face
  se necessário
• Proibições (não comer ou beber dentro do
  laboratório)
• Não pipetar com a boca use pipetas mecânicas
• Minimizar a geração de aerosol
• Livrar-se de todos resíduos não utilizáveis
• Relatar e registrar incidentes e acidentes
• Equipamento de desinfecção
• Descontaminação diária das superfícies de
  trabalho

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Requisitos
Biossegurança nível 1

• Requisitos de treinamento
• Supervisor tenha treinamento geral em
  microbiologia ou ciência relativa
• Pessoal do laboratório tenha treinamento nos
  procedimentos de trabalho

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Biossegurança nível
2

• Apropriado para trabalhos envolvendo agentes com
  potencial moderado de risco de doenças para os
  funcionários saudáveis do laboratório e ambiente.

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Biossegurança nível
2

• Exemplos
• Staphylococcus aureus (bactéria)
• Escherichia coli (bactéria)
• Hepatitis B virus (vírus)
• Clostridium perfringens (bactéria)
• Nocardia spp. (fungo)
• Aspergillis (fungo)
• Actinomycetes (fungo)
• Candida albicans (fungo)

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Requisitos
Biossegurança nível 2

• Imunização ou tratamento a base de antibióticos
  disponível
• Exemplos
• Engerix B vacina para Hepatitis B vírus
• Uso de Penicilina para Gram positivos organismos
• Uso de Gentamicina para Gram negativo organismos

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Práticas normais
de laboratório Biossegurança nível 2

• Em aditivo aos mencionado para nível 1
• Acesso limitado ao laboratório
• Manutenção de pressão negativa
• pia de lavagem em uso no laboratório
• Autoclave próximo ao laboratório
• Portas do laboratório fechadas durante as
  operações
• Uso de cabines de segurança microbiológicas
  (classe II)
• Desinfetantes são usados diariamente na limpeza
  das superfícies
• Minimização dos eorosóis
• Lavador de olhos disponível no laboratório

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Práticas especiais
Biossegurança nível 2

• Assegure que estes itens estejam disponíveis
• Política e procedimento de trabalho com risco
  biológico
• Manual de biossegurança específico para o
  laboratório
• Avisos de risco biológico
• Registros de treinamento
• Registros médicos
• Registros de vacinação
• Documentação do Serviço médico
• Registros de incidentes / doenças

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Práticas especiais
Biossegurança nível 2

• Uso de extremo cuidado com agulhas ou outros
  instrumentos contaminados.
• Não faça
• Quebrar, dobrar, reusar seringas ou agulhas
• Tocar vidros quebrados com as mãos
• Faça
• Dispor seringas em locais a prova de perfuração
  em recipientes resistentes
• Use roupas plásticas
• Use dispositivo mecânico para recolher vidraria
  quebrada

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Requisitos
Biossegurança nível 2

• Supervisor é um cientista com conhecimento em
  microbiologia técnicas de assepsia com
  responsabilidades aumentadas.
• Assegurar que indivíduos imunocompromissado
  estejam restritos ao trabalho
• Pessoal do laboratório
• Esteja consciente do potencial de riscos
  presentes no laboratório
• Esteja habilitado nas práticas de
  laboratório/técnicas usadas no trabalho
• Tenha conhecimentos básicos das boas práticas de
  técnicas microbiológicas

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Biossegurança
nível 3

• Apropriado para trabalhos envolvendo agentes que
  podem causar sérios danos ou potencial de doença
  letal como resultado de exposição por inalação,
  com potencial sério para os funcionários
  saudáveis do laboratório e ambiente.

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA Biossegurança
nível 3

• Exemplos
• Mycobacterium tuberculosis (bactéria)
• Brucella melitensis (bactéria)
• St. Louis encephalitis virus (vírus)
• Coxiella burnetti (bactéria)
• Histoplasma capsulatum (fungo)

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Requisitos de
Laboratório Biossegurança nível 3

• EM ACRÉSCIMO AO MENCIONADO PARA NÍVEL 2
• Laboratório selado
• Laboratório afastado de outras áreas
• Acesso ao laboratório restrito a pessoas
  autorizadas
• Portas dos laboratórios fechadas e lacráveis
• Avisos de risco biológico presente e com nível de
  biossegurança
• Acesso visual para o laboratório via portas e
  janelas de vidro
• Acesso somente por ante-câmaras
• Pressão de ar negativa na ante-sala e no local de
  nível 3
• Autoclave presente no laboratório
• Cabines biosseguras no laboratório (Classe II B1,
  B2 ou B3)
• Equipamento dedicado para laboratório nível 3

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA - Práticas normais
de laboratório Biossegurança nível 3

• EM ACRÉSCIMO AO MENCIONADO PARA NÍVEL 2
• Acesso de somente pessoal autorizado
• Uso de proteção respiratória pode ser requerida
  (para certos organismos ou derrames)
• Mandatório o uso de luvas
• Lavagem de mãos requerida após retirada das luvas
• Todos os serviços devem ser desenvolvidos cabines
  com biossegurança (BSC)
• Abrir tampas das centrifugas dentro das BSC no
  laboratório nível 3
• Vidraria é proibido no laboratório nível 3 (tanto
  quanto possível)
• Seringas e objetos cortantes devm ser usados com
  extremo cuidado

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS

• Capela com fluxo laminar
• Classe I BSC
• Classe II BSC
• Classe III BSC
• Guias passos 1 a 6

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Capela de fluxo laminar

• Não é uma cabine biossegura
• Protege o produto do trabalhador
• Filtragem horizontal HEPA
• Descarga de ar no sentido de afastar os riscos
• Filtragem vertical HEPA
• Descarga de ar no sentido teto para ao piso sem
  recirculação

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Classe I BSC

• Assegura proteção pessoal e ambiental, mas não a
  proteção do produto
• Dutos rígidos para exaustão do local

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Classe II Tipo A BSC

• Classe II Tipo A
• 75 fpm
• 30 exaustão 70 recirculação
• Se não há duto rígido para exterior, não pode ser
  usado para produtos químicos voláteis ou
  materiais radioativos

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Classe II Tipo B1 BSC

• Classe II Tipo B1
• Dutos rígidos para o exterior
• 100 fpm
• 70 exaustão 30 recirculação
• Pode ser usada com pequenas quantidades de
  produtos químicos voláteis

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Classe II Tipo B2 BSC

• Classe II Tipo B2
• Dutos rígidos para o exterior
• 100 fpm
• 100 exaustão
• 1200 pés cúbicos por minuto de exaustão
• Pode ser usada com moderada quantidade de
  produtos químicos voláteis, carcinogênicos e
  radioativos

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Classe II Tipo B3 BSC

• Classe II Tipo B3
• Dutos rígidos para o exterior
• 100 fpm
• 100 exaustão
• Todos plenos de pressão positiva devem ser
  cercados de plenos de pressão negativa de modo
  que qualquer vazamento segue para a cabine BSC
• Pode ser totalmente fechadas por luvas cano longo
  fixadas as aberturas.

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Classe III BSC

• Classe III
• Projetada para trabalhar com agentes de nível 4
• Dutos rígidos para o exterior
• 100 fpm/100 exaustão
• Fechada pressurizada com gás com nenhuma abertura
  para o exterior
• Exaustão de ar passa por 2 filtros HEPA ou filtro
  HEPA ligado a um incinerador
• Pode ser conectada com outras unidades
• Totalmente fechada com luvas de cano longa
  fixadas as aberturas
• Todos os materiais são descontaminados antes da
  remoção da BSC

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Passo 1

• Verificar a entrada e saída de ar para obstruções
• Funcionar durante 5 minutos a ventilação antes de
  ligar a cabine para exaustão do ar interno
• Use os EPIs necessários
• Desinfectar a superfície interior de trabalho na
  cabine de biossegurança
• Coloque papel absorvente na cabine

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Passo 2

• Não bloqueie a entrada, saída ou exaustão de ar
• Evite colocar itens com mais de 10cm na frente da
  cabine de biossegurança
• Permita que a cabine opere durante 3-5 minutos
  para purgar todo o ar interior e contaminates
  atmosféricos eventuais

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Passo 3

• Minimize interrupção de das barreias colocando
  todos os materiais necessários junto da cabine
  antes de iniciar o trabalho
• Pratique boas práticas de assepsia quando dentro
  da cabine
• Durante o trabalho, desinfecte todas as
  superfícies externas antes de retirar os produtos
  das cabines

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Passo 4

• Após término do trabalho, desinfecte todas as
  superfícies potencialmente contaminadas pelos
  produtos da cabine
• Descarte todos os resíduos apropriadamente
• Deixe o ventilador funcionando durante 10-12
  minutos após término do trabalho

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Passo 5

• Assegure que todos os resíduos contaminados
  remanescentes fiquem no interior da cabine até o
  término do trabalho
• Confine e feche os resíduos contaminados e remova
  para dispor
• Confine e feche as culturas e placas e sele se
  requerido
• Desinfectar todas as superfícies dos itens
  removidos da cabine

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GUIAS DE SEGURANÇA PARA CABINES BIOSSEGURAS
Passo 6

• Remover todos resíduos contaminados, vidraria, e
  amostras da cabine e tratar apropriadamente
• Descontaminar cabine biossegura internamente com
  solução de 110 de diluição de Clorox e enxaguar
  com água

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Esterilização a vapor

• Vapor pressurizado a 121-132? - 30 min.
• Calor mata todos os microvida e esporos
• Para verificação das esterilização
• use uma temperatura de prova no centro
• use por Ex..(e.g., Bacillus stearothermophilus)
• fita de esterilização somente como indicador da
  temperatura desejada

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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA 29 CFR 1910.1030
Desenvolva um Plano de Controle de Exposição
Detalhe todos os Controles de Engenharia e
Práticas de Trabalho
Manter estoque de EPIs
Desenvolver e implementar procedimento de limpeza
e descontaminação
Tratar todas lavagens de Uniformes com Precauções
Gerais
Desenvolver e implementar Programa de Treinamento
Assistência médica para
Vacinação contra Hepatite B
Avaliação de acompanhamento de pós-exposição
Informações médicas requeridas
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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA PROGRAMA VACINAÇÃO
HEPATITE B
Desenvolver plano que identifique todos os
funcionários com potencial de exposição
ocupacional
Categorizar os funcionários com o potencial de
exposição
Conduzir treinamento de riscos do sangue.
Antes fazer a vacinação contra Hepatite B
Somente após 10 dias da vacinação para Hepatite B
é que o funcionário pode assumir seu posto de
trabalho
Func. que declinar da vacina DEVE assinar
desligamento
Vacinação sem custo para o funcionário
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TREINAMENTO EM BIOSSEGURANÇA AVALIAÇÃO E
ACOMPANHAMENTO DE PÓS-EXPOSIÇÃO
Acompanhamento deve incluir
Documentação da rota de exposição
Identificação da fonte individual
Notificação ao funcionário dos resultados dos
testes
Oferecer ao funcionário pós exposto
profilaxia (ex. Vacinação, Gama Globulina)
Prover com consultas médicas ao funcionário
Prover e informar com opinião escrita pelo
serviço médico
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PERGUNTAS

• Trabalhe com grupos de 2 pessoas
• Partilhe das informações
• Faça perguntas

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Biossegurança Fontes de Pesquisa

• American Biological Safety Association
• http//www.absa.org/index.html
• Centers for Disease Control
• http//www.cdc.gov
• Occupational Safety and Health Administration
• http//www.osha.gov
• Michigan State University
• http//www.orcbs.msu.edu/
• CalOSHA
• http//www.dir.ca.gov/