TRANSFUSION

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TRANSFUSION

• Groupes sanguins érythrocytaires
• (système ABO, système RH et système KELL
• Les examens en immuno-hématologie

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• 1900 Landsteiner découvre le 1er système des
  groupes sanguins le système ABO
• 1940 valide le système Rhésus
• 1952 Dausset met en évidence le système HLA des GB

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Les groupes sanguins érythrocytaires

• Les groupes sanguins érythrocytaires sont
  déterminés pas des antigènes présents (ou non) à
  la surface des globules rouges
• Certains antigènes sont situés dans la Mb
  lipidique (Rhésus), dautres dans les
  glycolipides sur la face externe de la Mb du GR
  (ABO)

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Les groupes sanguins érythrocytaires

• Génétiquement induits et déterminés
• indépendants les uns des autres
• Antigènes allotypiques cad caractères propres à
  un groupe dindividus dans une espèce donnée
• 29 systèmes de groupes sanguins liés au globule
  rouge
• Le plus connu et le plus ancien le système ABO,
• le plus important du fait de son implication
  en transfusion sanguine et pour la
  transplantation dorgane

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Système Numéro Symbole Gène(s) Localisation du gène
ABO 001 ABO ABO 9q34.2
MNS 002 MNS GYPA, GYPB, GYPE 4q28.2-q31.1
P 003 P P1 22q11.2-qter
Rh 004 RH RHD, RHCE 1q36.13-q34.3
Lutheran 005 LU LU 19q13.2
Kell 006 KEL KEL 7q33
Lewis 007 LE FUT3 19q13.3
Duffy 008 FY DARC 1q22-q23
Kidd 009 JK SLC14A1 18q11-q12
Diego 010 DI SLC4A1 17q21-q22
Yt 011 YT ACHE 7q22.1
Xg 012 XG XG Xp22.32
Scianna 013 SC SC 1p34
Dombrock 014 DO DO 12p12.3
Colton 015 CO AQP1 7p14
Landsteiner Wiener 016 LW LW 19p13.3
Chido Rodger 017 CH/RG C4A, C4B 6p21.3
H 018 H FUT1 19q13.3
Kx 019 XK XK Xp21.1
Gerbich 020 GE GYPC 2q14-q21
Cromer 021 CROM DAF 1q32
Knops 022 KN CR1 1q32
Indian 023 IN CD44 11p13
OK 024 OK CD147 19p13.3
RAPH 025 MER2 MER2 11p15.5
JMH 026 JMH - -
I 027 I - -
GLOB 028 P - -
GIL 029 GIL - -
RHAG 030 RHAG - -
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Tableau de concordance entre nomenclature
internationale (ISBT) et nomenclature utilisée en
France (Fischer et Race)
Antigènes Antigènes Antigènes Antigènes Antigènes Antigènes Antigènes Antigènes
N 1 2 3 4 5 6 7 8
01 ABO A B A,B A1
02 MNS M N S s U
03 P1 P1
04 RH D C E c e ce Ce Cw
05 LU Lua Lub
06 KEL K k Kpa Kpb
07 LE Lea Leb
08 FY Fya Fyb Fy3
09 JK Jka Jkb Jk3
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Le système ABO

• Le système ABO présente deux caractéristiques qui
  sont à lorigine des méthodes de groupage et
  expliquent son rôle important en transfusion et
  lors des transplantations
• La présence ou labsence des antigènes A et/ou B
  à la surface des GR
• La présence ou labsence des anticorps naturels
  anti-A et/ou anti-B dans le plasma correspondants
  aux antigènes absents sur les GR

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Les antigènes du système ABO
9
Les antigènes du système ABO
Groupe sanguin Antigènes membranaires Anticorps sériques Fréquence en France
A A anti-B 45
B B anti-A 9
O H anti-A et anti-B 43
AB A et B aucun 3
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Répartition des Ag ABH dans lorganisme

• à la surface des GR, PN, lymphocytes, monocytes
  et des plaquettes
• présents sur de nombreuses cellules de
  lorganisme (cellules épithéliales, endothélium
  vasculaire, secrétions salivaires, cellules
  rénales) à lexception de los, des neurones et
  de la cornée

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Les anticorps naturels,réguliers

• Naturels Présents dans le plasma dun sujet en
  dehors de toute stimulation antigénique reconnue
  (transfusion ou grossesse)
• Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne
  possèdent pas sur leur GR
• Réguliers existent constamment chez les
  individus ne possédant pas lantigène
  correspondant
• Apparaissent chez lenfant entre 0 et 6 mois
  (suite à lhétéro immunisation par les bactéries
  de la flore intestinale)
• Intérêt primordial en transfusion sanguine en
  raison du risque dincident dès la 1ère
  transfusion incompatible

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Les anticorps immuns, irréguliers

• Nexistent pas à létat naturel
• Apparaissent à la suite dune immunisation
  préalable grossesse ABO incompatible

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Détermination du groupe ABO

• Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui
  doivent être concordantes
• Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent
• consiste à rechercher par une technique
  dagglutination les antigènes présents sur les
  hématies
• GR à tester (antigènes à déterminer) sérums
  tests connus (anticorps monoclonaux anti-A et
  anti-B)

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Réaction dagglutination
Agglutination
Formation dun réseau
15
(No Transcript)
16
Absence dagglutination
Agglutination
17
Interprétation difficile Double population avec
le sérum test anti-A - Patient A transfusé en O -
Patient ayant subi une allogreffe de moelle
(A/O ou O/A)
18
(No Transcript)
19
Détermination du groupe ABO

• Epreuve sérique dite de Simonin
• Consiste à identifier les anticorps naturels
  réguliers dirigés contre les antigènes absents
• Plasma à tester (anticorps naturels) GR tests
  connus
• Le groupe ne sera définitif quà la suite de 2
  déterminations réalisées à partir de 2
  prélèvements sanguins différents

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Groupage ABO
BETH VINCENT anti-A anti-B
SIMONIN GR A GR B
O _ _
A _ _
B _ _
AB _ _
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Règles de compatibilité ABO
POUR LES GLOBULES ROUGES

• SYSTEME ABO

A
identité
A
compatibilité
Ac anti-B
AB
AB
O
O
compatibilité
Ac anti-A Ac anti-B
donneur universel
receveur universel
pas d'Ac
Ac anti-A
B
identité
B
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Règles de compatibilité ABO
POUR LE PLASMA
A
O
AB
B
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Le système RH (Rhésus)

• Système complexe de groupe sanguin
• On compte 52 antigènes appartenant à ce système
• En pratique courante seuls 5 sont à connaître
• D, C, c, E, e
• La présence de lantigène D défini le groupe
  Rhésus positif (85)
• son absence le groupe Rhésus négatif
• Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence
  ou labsence des 5 antigènes D, C/c, E/e

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Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés
sur la membrane du GR
25
Les antigènes
ANTIGENES Fréquence en France
D (RH1) 85
C (RH2) 70
E (RH3) 30
c (RH4) 80
e (RH5) 98
26
Phénotype Rhésus (RH) du receveur (fréquence en France) Phénotype Rhésus (RH) du CGR à transfuser par ordre prioritaire
DCE-ce (RH  1, 2, -3, 4, 5) (0,34) DCE-ce (RH  1, 2, -3, 4, 5) DCE-c-e (RH  1, 2, -3, -4, 5) DC-E-ce (RH  1, -2, -3, 4, 5) D-C-E-ce (RH  -1, -2, -3, 4, 5)
DCE-c-e (RH  1, 2, -3, -4, 5) (0,20) DCE-c-e (RH  1, 2, -3, -4, 5)
DC-Ece (RH  1, -2, 3, 4, 5) (0,12) DC-Ece (RH  1, -2, 3, 4, 5) DC-E-ce (RH  1, -2, -3, 4, 5) DC-Ece- (RH  1, -2, 3, 4, -5) D-C-E-ce (RH  -1, -2, -3, 4, 5)
DCEce (RH  1, 2, 3, 4, 5) (0,12) DCEce (RH  1, 2, 3, 4, 5) DCE-ce (RH  1, 2, -3, 4, 5) DCE-c-e (RH  1, 2, -3, -4, 5) DC-Ece (RH  1, -2, 3, 4, 5) DC-E-ce (RH  1, -2, -3, 4, 5) DC-Ece- (RH  1, -2, 3, 4, -5) D-C-E-ce (RH  -1, -2, -3, 4, 5)
DCEc-e (RH  1, 2, 3, -4, 5) (0,04) DCEc-e (RH  1, 2, 3, -4, 5) DCE-c-e (RH  1, 2, -3, -4, 5)
DC-E-ce (RH  1, -2, -3, 4, 5) (0,02) DC-E-ce (RH  1, -2, -3, 4, 5) D-C-E-ce (RH  -1, -2, -3, 4, 5)
DC-Ece- (RH  1, -2, 3, 4, -5) (0,01) DC-Ece- (RH  1, -2, 3, 4, -5)
D-C-E-ce (RH  -1, -2, -3, 4, 5) (0,15) D-C-E-ce (RH  -1, -2, -3, 4, 5)
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Les Anticorps du système Rhésus

• Toujours acquis, secondaires à une
  allo-immunisation, lors dune transfusion ou
  dune grossesse
• Probabilité dapparition fonction de
  limmunogénicité
• Lantigène Rh standard (D) est le plus immunogène
  puis dans lordre E, c et e
• de classe IgG, hémolysants, capables de traverser
  le placenta, responsables de la symptomatologie
  présentée par un nouveau-né Rhésus né de mère
  Rhésus - maladie hémolytique du nouveau-né

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Règles de compatibilité Rhésus
POUR LES GLOBULES ROUGES
Rh -
Rh Ag D
29
Les autres systèmes érythrocytaires

• Importance transfusionnelle car certains de leurs
  antigènes sont fortement immunisants
• Système KELL lAntigène K est un puissant
  immunogène pour les sujets K- (91 de la
  population K-)
• Système Duffy antigène Fya et Fyb
• Système MNS antigène S et s
• Système Kidd antigène Jka et JKb

30
Les autres systèmes érythrocytaires

• Labsence dun Antigène dans l un de ces
  systèmes ne saccompagne pas danticorps
  naturels, comme dans le système ABO, mais une
  transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la
  formation danticorps immuns (allo-immunisation)
  responsables ultérieurement daccidents
  transfusionnels ou de MHNN

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Les examens immunohématologiques

• Groupage ABO RH1 (RhD)
• Phénotypage RH et Kell
• Phénotypage étendu
• Recherche danticorps irréguliers (RAI)
• Epreuve de compatibilité au laboratoire
• Tests de Coombs

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? Exigences relatives aux échantillons  Qualité
et quantité 
Type danalyse Nombre de ml sur anticoagulant Nombre de ml sur tube sec ou anticoagulant
Groupe ABO.RH1 et phénotype RH.KEL1 5
RAI chez ladulte 5
ABO.RH1 et RH.K et RAI chez ladulte 5
RAI chez le nouveau-né 5
ABO.RH1 et RH.K et RAI chez le nouveau-né 5
Titrage et dosage pondéral anti-RH1 15
Test de Kleihauer 5
Bilan de réaction transfusionnelle 5 5
Bilan de maladie hémolytique du nouveau-né 5
AHAI  TCDElutionHémolysineAF-RAI 10 10
Test de Coombs Direct (TCD) 5

• Identification du patient  Nom patronymique /
  Nom marital / Prénom(s) / Date de naissance /
  Sexe.
• ? Exigences relatives aux documents
  accompagnateurs 
• Etablissement de soins  service demandeur /
  ligne téléphonique directe
• Prescripteur  nom, signature du médecin
  prescripteur, date de prescription
• Préleveur  nom et qualité du préleveur,
  signature, date et heure du prélèvement
• Identification du patient  nom patronymique, nom
  marital, sexe et date de naissance
• Nature des analyses demandées
• Renseignements cliniques éventuels
• Si une transfusion est envisagée, date et heure
  prévues, niveau durgence.

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Les examens immunohématologiques

• Groupage ABO RH1
• correspond à la détermination du groupe ABO
  indissociable de la recherche du Rhésus standard
  D
• le groupage est considéré comme définitif si les
  résultats sont concordants sur deux
  déterminations sur 2 prélèvements différents
• Contexte pré-transfusionnel avéré ou potentiel et
  contexte périnatal
• La transmission électronique des résultats est la
  règle pour la délivrance des PSL

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Phénotype Rhésus Kell

• Recherche grâce à lutilisation de sérums tests
  anti-C, anti-E, anti-c, anti-e et anti-K la
  présence ou labsence à la surface des hématies
  des 5 antigènes suivants C (RH2), E (RH3), c
  (RH4), e (RH5) et K (KEL1)
• Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel
• Contexte pré et périnatal
• Validation de lidentification danticorps
  anti-érythrocytaires

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Phénotype étendu

• Recherche de la présence ou labsence des
  antigènes Jka, Jkb (système Kidd), Fya, Fyb
  (système Duffy), S, s (système MNS)
• Champ dapplication
• - patient présentant un anticorps irrégulier
  dans lun des systèmes concernés
• - à titre préventif chez patients devant
  recevoir des transfusions itératives
• - patients en instance de greffe

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Recherche dAnticorps Irréguliers (RAI)

• NB Les anticorps immuns sont décelables avec un
  maximum de probabilité du 7ème au 15ème jour
  après la transfusion
• Examen consistant à dépister et identifier les
  anticorps dirigés contre les antigènes
  érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à
  étudier grâce à une gamme dhématies tests
• Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures
• Validité 72H

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Recherche dAnticorps Irréguliers (RAI)

• Champ dapplication
• Obligatoire chez tout patient susceptible dêtre
  transfusé
• Contexte de greffe ou de transplantation
• Contexte pré ou périnatal
• Chez le patient transfusé itératif en bonne place
  au cours des séries de transfusion
• Chez le patient transfusé dans le cadre du suivi
  post-transfusionnel (dans un délai de 1 mois
  après le dernier épisode transfusionnel)

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CAT en cas durgence hémorragique
Urgence vitale immédiate distribution sans
délai Prélèvement 2 déterminations groupe
RAI pas de groupe ni de RAI si non
disponibles CGR O sans hémolysines
Urgence vitale délai de distribution inférieur
à 30 minutes Prélèvement 2 déterminations groupe
RAI pas de RAI si non disponible nécessité de
groupe ABO conforme
Urgence  relative  délai de distribution de 2
- 3 heures Prélèvement 2 déterminations groupe
RAI nécessité de groupe et RAI conformes
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CHOIX DES CGR EN URGENCE VITALE
Dans le cadre dun dépôt durgence ayant en stock
des CGR O- (D-C-E-ceK-) non réservé à la
transfusion isogroupe O (DCE-c-eK-) non
réservé à la transfusion isogroupe
En fonction de D et Rhésus-Kell
Patient CGR à transfuser
D Rhésus Kell
D non connu non connu O-D-C-E-ceK-
D négatif connu ou non O-D-C-E-ceK-
D positif non connu ODCE-c-eK-
D positif connu C ODCE-c-eK-
D positif connu C- O-D-C-E-ceK-
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Epreuve directe de compatibilité au laboratoire
EDCL

• Qualification biologique du don
• Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis
  du CGR à transfuser (lobjectif étant de détecter
  certains Ac masqués par la présence dautres Ac,
  ou des Ac rares)
• Validité 72H
• Champ dapplication
• Receveur présentant ou ayant présenté un ou
  plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytaires
• Nouveau-né présentant un test de Coombs positif
  ou né de mère allo-immunisée

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Test de Coombs

• Permet la mise en évidence de la sensibilisation
  in vivo des hématies humaines par des anticorps
  grâce à lutilisation dun réactif appelé
  antiglobuline humaine
• Champ dapplication
• Maladie hémolytique du nouveau-né
• Incident transfusionnel
• Anémie hémolytique autoimmune

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Recherche d'anticorps fixés sur les hématies
Ac non spontanément agglutinables
anti-gammaglobulines humaines
complexe agglutinant
Hématies fœtales ayant fixé l'Ac