Distribuci

1
Distribución del contenido de manual por semanas.
SEMANA ACTIVIDAD
28 Enero-1 Febrero Introducción al lab de bioquímica Método científico
4-8 Febrero Introducción al lab de bioquímica Lowry
11-15 Febrero Purificación de proteínas Precipitación por salado
18-22 Febrero Purificación de proteínas Cromatografías
25 Febrero-1 Marzo Purificación de proteínas Determinación de proteínas por Bradford y PAGE-SDS
4-8 Marzo Enzimas Curvas temporales
11-15 Marzo Enzimas. Efecto de concentración de sustrato e inhibidor
18-22 Marzo Conjugación
SEMANA SANTA (25 al 29 marzo) SEMANA SANTA (25 al 29 marzo)
1-5 Abril Transformación
8-12 Abril Obtención de plásmido y restricción
15-19 Abril Gel de Agarosa e inducción de proteína recombinante
22-26 Abril PAGE-SDS proteína recombinante
29 Abril-3 Mayo Operón lac
6-10 Mayo Represión catabólica en plantas
13-17 Mayo Entrega de último reporte, repaso para examen departamental EXAMEN DEPARTAMENTAL EL 17 DE MAYO
20-24 Mayo Entrega de calificaciones
2
Método científico

• Dra. Sobeida Sánchez Nieto
• sobeida_at_unam.mx
• Lab 114, Conjunto E,
• Facultad de Química, UNAM

3
Método científico

• Método de estudio sistemático de la naturaleza
  que incluye
• las técnicas de observación, reglas para el
  razonamiento y la predicción, ideas sobre la
  experimentación planificada y los modos de
  comunicar los resultados experimentales y
  teóricos.

4
Pasos del método científico

• Observación
• Planteamiento de preguntas
• Hipótesis
• Desarrollo experimental
• Resultados
• Discusión
• Conclusiones
• Publicar

5
Pelagra

• Una enfermedad que se produce por la deficiencia
  de niacina (vitamina del complejo B).
• La Pelagra es la enfermedad que los de habla
  inglesa denominan de las cuatro Ds.
• Diarrhea, Dermatitis, Dementia and Death.

6
"pelle", PIEL "agra", RUGOSA PIEL RUGOSA
7
Un problema grave de salud

• 3,000, 000 millones de norteamericanos
  contrajeron pelagra y 100, 000 murieron entre
  1906- 1940.
• La mayor parte de ellos vivían en el sur de EU
• En Europa también había brotes de pelagra.
• Considerado un problema de toxicidad de los
  alimentos o bien infeccioso

8
Dr. Joseph Goldberger

• Médico, excelente epidemiólogo clínico
• La US Public Health Service le solicito en 1914,
  resolver el problema de la pelagra.

9
Observaciones de Goldberger

• Quiénes se enferman?
• Los que se encuentran en
• Orfanatos
• Hospitales y
• Prisiones.
• Pero solo los que se encuentran en custodia, no
  así las enfermeras, doctores o custodios

10
Encuesta disponible

• R. M. Grimm, MD
• 25 comunidades del sureste de EU 3 minas de
  carbón en Kentucky, 7 villas de plantaciones de
  algodón y 15 comunidades en latifundios en
  Georgia.

Familia de aparceros
11
Qué tienen en común los afectados por la Pelagra?

• Pobreza
• Malas condiciones de higiene y trabajos con
  jornada alta.
• Sus parientes, visitantes o guardas que tienen
  contacto con ellos no tenían pelagra ni antes ni
  después de convivir con ellos
• Dietas que incluyen cantidad mínimas de proteína
  animal, cereales refinados (sin cascarilla).

12
Goldberger dedujo

• La pelagra no es una infección, no proviene de
  gérmenes, pero si proviene de una deficiencia
  nutricional.

13
Como probarlo?

• EXPERIMENTOS EN HUMANO
• Tanto sus asistentes como él y su esposa
  realizaron experimentos a los que les llamaron
  "filth parties." (fiestas de mugre). Se
  inyectaron así mismos
• Sangre o costras o residuos de fluidos de
  pacientes e incluso heces.
• También lo hicieron los reclusos de la prisión de
  Mississippi (quiénes se voluntariaron con tal de
  que les otorgarán el perdón).

Ninguno desarrollo pelagra.
14
Realmente es nutricional?

• Para probarlo se propuso realizar lo siguiente
• Producir la pelagra en un hombre sano a través de
  alimentarlo con una comida que incluyera
  principalmente cereales, como los que se
  consumían las comunidades con alta incidencia de
  pelagra

15
Protocolo experimental

• Sujetos de estudio
• Sujetos a prueba Convictos granja Rankin,
  Missisipi y el Dr. Goldberger
• Controles Guardias y convictos
• Dieta
• Cuadros nutrimentales,
• Registros de dietas en la cárcel,
• Tiempo de administración,
• cuadro de calorías
• Control de jornadas de trabajo de los reclusos
• Inspección por médicos certificados

16
Los efectos de la dieta

• Al 2do mes se presentaron los síntomas de
  pelagra, comenzando por dermatitis.
  Posteriormente baja de peso, cansancio..
• A los 6 meses todos estaban enfermos con síntomas
  graves de la enfermedad

17
Si es la dieta, entonces

• Tanto en los hospitales como con los prisioneros
  y él mismo Goldenberg cambiaron de dieta
• con carne, vegetales y leche,
• la enfermedad desapareció a los pocos meses.

18
Conclusiones de Goldenberg

• La dieta es el agente etiológico primario de la
  pelagra
• La dieta que produce pelagra presenta deficiencia
  en aminoácidos, constituyentes minerales,
  vitaminas solubles en grasas y vitaminas
  antineuríticas (como las del complejo B)

19
Niacina puede prevenir pelagra

• El Dr. Goldberger murió sin identificar el
  principio que curaba la pelagra. Pero en 1937
  Elvehjem aisló la P-P (pellagra preventive) la
  niacina.
• La niaciana es abundante en la carne roja, en las
  hojas verdes de los vegetales, en el pescado.
• Previene y cura totalmente la pelagra.

20
Goldberger reporto sus resultados
21
Porqué publicar?

• INFORMAR A LA COMUNIDAD
• ESTABLECER TRATAMIENTO
• Mejorar dieta
• ABRE NUEVAS LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN
• Debido a la pobreza implementaron una cura,
  suplemento alimenticio con levadura de cerveza
• Aunque, lo que definitivamente redujo de manera
  importante la enfermedad fue que cambiaron las
  prácticas en la agricultura, diversificaron los
  cultivos. El maíz escaso en triptófano el cual es
  precursor de la niacina

22
Conocimiento que es difundido es tomado en cuenta

• En la actualidad aún hay brotes de pelagra debido
  a
• Mala alimentación (países en África y con pobreza
  extrema)
• Alcoholismo
• Diarreas crónicas
• Síndrome de mala absorción (enfermedad de Crohn)
• Tumor carcinoide
• Algunos medicamentos

23
Pasos del método científico

• Observación
• Planteamiento de preguntas
• Hipótesis
• Desarrollo experimental
• Resultados
• Discusión
• Conclusiones
• Publicar

24
La hipótesis el punto clave para proponer una
investigación

• A partir de la observación surge el planteamiento
  del problema que se va a estudiar, lo que lleva a
  emitir alguna hipótesis o suposición provisional
  de la que se intenta extraer una consecuencia.
• Una hipótesis es una pregunta de lo que planeas
  investigar y debe ser probada.
• Pero como planteamos una hipótesis?

25
Trabajando en la hipótesis

• Si sentimos que la garganta nos duele, nos
  planteamos
• Si tengo dolor de garganta entonces podría
  deberse a que tengo una infección en la garganta
  debida a bacterias o virus, o bien porque
  gritamos mucho el día anterior.
• Sin embargo, la anterior hipótesis no toma en
  cuenta lo que tenemos como conocimiento previo.
  Al replantearla podemos decir
• Si sé que el resfriado es contagioso y no estuve
  en contacto con alguien que estuviera enfermo, y
  además fui a un juego de fútbol en donde grité
  mucho, entonces es probable que esto último me
  causara el dolor de garganta.

26
Mejoró pero hay que proponer el experimento

• Si no tengo fiebre o síntomas de una infección
  en la garganta, pero sí una inflamación en la
  garganta, entonces el cultivo de exudado faríngeo
  y otros estudios clínicos darán negativo para una
  infección bacteriana o viral, por lo que la
  inflamación se deberá a un uso excesivo de las
  cuerdas vocales.
• PERO CORTA
• Si solo tengo inflamación en la garganta y grite
  durante un juego de futbol entonces el análisis
  de infección por virus y bacteria será negativo.

27
Desarrollo experimental

• La experimentación condiciones particulares de
  estudio, eliminando o introduciendo aquellas
  variables que puedan influir en él.
• Se entiende por variable todo aquello que pueda
  causar cambios en los resultados de un
  experimento y se distingue entre variable
  independiente, dependiente y controlada.

28
Tipos de variables

• Variable independiente es aquélla que el
  experimentador modifica a voluntad para averiguar
  si sus modificaciones provocan o no cambios en
  las otras variables.
• Variable dependiente es la que toma valores
  diferentes en función de las modificaciones que
  sufre la variable independiente.
• Variable controlada es la que se mantiene
  constante durante todo el experimento.

29
Siempre hay que incluir controles

• En un experimento siempre existe un control o un
  testigo, que es una parte del mismo no sometida a
  modificaciones y que se utiliza para comprobar
  los cambios que se producen.

30
Reproducibilidad

• Todo experimento debe ser reproducible, es decir,
  debe estar planteado y descrito de forma que
  pueda repetirlo cualquier experimentador que
  disponga del material adecuado.

31
Resultados

• Los resultados de un experimento pueden
  describirse mediante tablas, gráficos y
  ecuaciones de manera que
• Recuerda que aquí siempre hay que explicar que
  paso, que nos dice el experimento.

32
Análisis de resultados o también llamada discusión

• Aquí ya no solo se dice si un valor se incremento
  o está normal o si algo está fuera de lo normal.
• En está sección nos permite encontrar relaciones
  entre los resultados que confirmen o no las
  hipótesis emitidas

33
CONCLUSIONES

• Contrastar la hipótesis con los resultados.
• Una hipótesis confirmada se puede transformar en
  una ley científica que establezca una relación
  entre dos o más variables, y al estudiar un
  conjunto de leyes se pueden hallar algunas
  regularidades entre ellas que den lugar a unos
  principios generales con los cuales se constituya
  una teoría.