Dopingdefinition der Medizinischen Kommission des IOC

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Doping im Sport
Wilhelm SchänzerInstitut für Biochemie DSHS Köln
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Doping-Definition der WADA ab 1.1.2004
Artikel 1 Definition von DopingDoping ist
definiert als ein ein- oder mehrmaliger Verstoß
gegen die Anti-Doping-Regeln wie sie in Artikel
2.1 bis 2.8 ausgewiesen sind.Artikel 2 Verstöße
gegen die Anti-Doping-Regeln Die folgenden
Artikel stellen Verstöße gegen die
Anti-Doping-Regeln dar 2.1 Die Anwesenheit
einer verbotenen Substanz, deren Metaboliten oder
eines Markers in einer dem Athleten entnommenen
Probe (z.B.Urinprobe des Athleten)2.2 Die
Anwendung bzw. der Versuch der Anwendung einer
verbotenen Substanz oder einer verbotenen
Methode 2.3 Verweigerung oder Nichterfüllung
(ohne ausreichende Begründung) der Abgabe einer
Probe nach Aufforderung zur Dopingkontrolle
entsprechend der Authorisierung durch die
Anti-Doping-Regeln2.4 Verhinderung der
Verfügbarkeit bei Kontrollen außerhalb des
Wettkampfes einschließlich des Unterlassens
der Aufenthaltsmeldepflicht2.5 Betrug oder der
Versuch eines Betruges bei der Dopingkontrolle2.6
Besitz von verbotenen Substanzen oder verbotenen
Methoden2.7 Weitergabe jeglicher verbotenen
Substanz oder verbotenen Methode2.8 Anstiftung,
Mitbeteiligung, Unterstützung oder Ermutigung zur
Anwendung oder zum Versuch einer Anwendung
einer verbotenen Substanz oder verbotenen
Methode oder jegliche Art der Beteiligung an
einem Verstoß gegen die Anti-Doping Regeln
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WADA-Liste ab 1.1.2005
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Verbotene Wirkstoffgruppe Stimulanzien
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Verbotene Wirkstoffgruppen A. Stimulantien B.
Narkotika (opioide Analgetika) C. Anabole
Wirkstoffe D. Diuretika E. Peptidhormone und
Analoge
Anabole Wirkstoffe Anabole Steroide Andere
anabole Wirkstoffe 1. Exogene
Anabolika z.B.Clenbuterol 2. Endogene
Steroide z.B. Testosteron
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Anabol Androgene Steroidhormone (Beispiele) 1)
Exogene Steroide (Anabolika) Boldenon Methyltesto
steron Clostebol Nandrolon Chlordehydro-
Norandrostendion, -diol methyltestosteron
Oxymetholon Mestanolon Stanozolol
Metandienon Trenbolon und verwandte
Verbindungen 2) Endogene Steroide Androstendion
Dihydrotestosteron Androstendiol Testosteron
Dehydroepiandrosteron (DHEA) und verwandte
Verbindungen
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(No Transcript)
8
(No Transcript)
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Verfahren bei der Dopingkontrolle
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Grenzwerte (WADA-Regel 1.1.2005)
SUMMARY OF URINARY CONCENTRATIONS ABOVE WHICH
IOC ACCREDITED LABORATORIES MUST REPORT FINDINGS
FOR SPECIFIC SUBSTANCES Carboxy-THC gt 15 ng
/ ml Cathin gt 5 µg / ml Ephedrin gt 10
µg / ml Epitestosteron gt 200 ng / ml
Methylephedrin gt 10 µg / ml Morphin gt 1
µg / ml 19-Norandrosteron gt 2 ng / ml in
males gt 2 ng / ml in femalesSalbutamol
as anabolic agent gt 1000 ng / ml
Testosteron T/E ratio gt 4 (6)
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Adrenalin und Stimulanzien vom Amphetamintyp
12
aus Lüllmann, Mohr, ZieglerTaschenatlas der
Pharmakologie,Thieme-Verlag, Suttgart-New York
1994
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(No Transcript)
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Todesfälle im Zusammenhang mit Doping
1949 F.A. Italien Radfahrer Amphetamin1959
B. Italien Radfahrer Amphetamin , Coffein,
Hitzeschlag1960 Kurt E.Jensen OS
Rom Amphetamin , Ronicol, Dänemark
Radfahrer Hitze, Dehydrierung 1967 Simpson
, Tom Tour der France Amphetamin, Hitze,
England Mount Ventous Dehydrierung1968 M
ottin, Yves Radfahrer Amphetamin
1968 Quadri, Louis Faußballer Amphetamin
1968 Elze, Jupp Boxer Methamphetamin,
Deutschland Gehirnblutumg1983 Weißer
Bodybuilder Anabole Steroide USA
Leberkarzinom
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GC-FID-Analyse Gaschromato- graphie
Flammen- ionisations- detektion
Referenz Standard
Negative Urinprobe
Positive Urinprobe
2 Amphetamin11 Interner Standard12 Coffein
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EI Massenspektrum von Amphetamin
M 135
17
Anabolika Anabol Androgene Steroide (AAS)
18
Am meisten missbrauchte Anabolika
19
Gestrinon Tetrahydrogestrinon
Disigner-Steroid
O
H
H
C
O
H
H
C
Gestrinon
THG
2
2
2
2
C
C
H
C
H
C
H
2
3
H
/
P
d
2
O
O
Doping-Skandal in den USA, Oktober 2003
20
Metabolismus Metandienon
21
Massenspektrum eines Metandienonmetaboliten
22
Unterscheidung zwischen Steroidhormonen
23
IOC-Regel Testosteron Verbot
T/E gt6
cT / cEpi ca. 1
24
IOC-Regel Testosteron Verbot
25
GC/MS-Bestimmungvon Testosteron,Derivatisierung
und Massenspektrum
EI-Massenspektrum
26
GC/MS-Bestimmung TestosteronTestosteron/Epitest
osteronaus Urin (T/E-Quotient)T/E gt 6
27
Individuelle Schwankungen des T/E-Quotienten
28
13C/12C-Isotopenverhältnisse in der Natur
Referenzgas CO2
Abweichung in
29
13C/12C-Isotopenverhältnisse
Synthetische anabol androgene Steroidhormone wie
Testosteron und Nandrolon sowie deren Vorhormone
-28 bis -32
Urinär ausgeschiedene Steroidhormonmetaboliten Eu
ropäer Amerikaner und (Ernährung auf
Maisbasis)
-24 bis -26
-18 bis -22
30
13C/12C-Bestimmung von Testosteronnach oraler
Gabe von 40 mg AndriolR
Abweichung in
31
Änderung der Isotopenwerte nach Testosteron oder
Androstendion Anwendung
32
Isotopenverhältnisse von Pregnandiol und
Etiocholanolon Androsteron
33
Testosteron und Prohormone
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Hormone als Nahrungsergänzungsmittel

• Vermarktung in Amerika, frei verkäuflich
• Umfangreiche Werbung im Internet
• In Europa nicht erlaubt (Arzneimittelgesetz)
• Folgende Steroidhormone (sogenannte
  Vorläufer) Dehydroepiandrosteron (DHEA)
  4-Androstendion 5-Androstendion 4-Androstendio
  l 5-Androstendiol 19-Nor-4-androstendion 19-No
  r-5-androstendion 19-Nor-4-androstendiol 19-Nor
  -5-androstendiol
• Nach der Dopingregel Verboten (anabole
  Steroidhormone)

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Crosskontamination
z.B. Verschleppung von Substanzen in einem
Produktionsprozess aufgrund ungenügender
Reinigungder Produktionsmaschinen,charakteisiert
durch eine nicht homogene Verteilung der
Substanzen in den Endprodukten z.B. 1 Tablette
Norandrostenedion 100 mg 100.000
µg Norandrostendion 1 µg als
Verunreinigung kann in einem anderen Präparat
zu einem positiven Befund führen !!!
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Kontaminiertes Creatinprodukt in Deutschland

• Deklarierter Inhalt Creatin Dextrose

• Nicht deklarierte Prohormone
  4-Norandrostendion 4,4 µg/Tablette
  4-Norandrostendiol 10,9 µg/Tablette

• 2 Stunden nach Anwendung von 2
  Tabletten im Urin Norandrosteron 19,8 ng/ml

ltgt
37
GC/MS-Analyse von Nahrungsergänzungsmitteln z.B.
Kontaminationen in einem Kreatinprodukt
4-Norandrostendion
m/z 330 m/z 416 m/z 430 m/z 432 m/z 434
DHEA
4-Androstendiol
5-Norandrostendiol
5-Androstendiol
4-Norandro- stendiol
4-Androstendion
Testosteron
Das hier untersuchte Produkt, Kreatintabletten
einer amerikanischen Firma, ist verunreinigt mit
verbotenen Prohormonen und mit Testosteron
(insgesamt 8 Steroide). Diese Steroide sind auf
dem Präparat nicht ausgewiesen und können zu
positiven Dopingbefunden führen.
38
Urinäre Norandrosteron-Ausscheidung nach
verschiedender Applikation von 19-Norsteroiden
Positiver Urintest mit Norandrosteron
10 ng/ml
Nandrolonester Depotform
Kontaminiertes Product
Prohormon19-Norsteroid
German Sports University Cologne
39
Wachstumshormon(Somatotropin, HGH human growth
hormone)
Peptidhormon aus 191 Aminosäuren Molekularg
ewicht 21.500 Wirkung im gesamten
Organismus Seit Ende der 80er Jahre als
gentechnisches Produkt auf dem Markt
Therapeutische Anwendung Zwergwuchs bei
Kindern Wachstumshormonmangel bei Erwachsenen
Mißbrauch im Sport bisher keine Studie, die
eine positive Wirkung bei Leistungssportlern
zeigte Schwarzmarkthandel
Nebenwirkungen z.B. Vergrößerung der
inneren Organe wie Herz und Leber
40
Wachstumshormon (Physiologie)
41
Wachstumshormon(Somatotropin, HGH human growth
hormone)
Peptidhormone Wachstumshormonmangel beim
Erwachsenen
Ursache Tumor in der Hirnanhangdrüse, bzw.
dessen Operation oder Bestrahlung Wachstumshormonm
angel in der Kindheit bleibt oft auch im
Erwachsenenalter bestehen.
42
Wachstumshormonmangel beim Erwachsenen
43
Wachstumshormonmangel beim Erwachsenen
44
HGH im Serum nach körperlicher Belastung
nach Kabouris M., DiplomarbeitInstitut für
Biochemie DSHS, 1994
45
Wachstumshormon - Nachweis
Wachstumshormon-Nachweis nachStrasburger et
al. Ref. Wu Z, Bidlingmaier M, Dall R,
Strasburger CJ Detection of doping with human
growth hormone.Lancet, 353 (1999) 895.
46
(No Transcript)
47
Wirkung von Epo (Erythropoietin)
Ekblom and Berglund (J.Intern.Med. 229, 1991,
p125) maximal exercise Work time, sec 500 to
583VO2max , l/min 4,52 to 4,88
48
Blutbestimmung Hämatokritmessung
UCI - Grenzwerte für Hämatokrit keine
Dopingkontrollmaßnahme Männer 50 Frauen
47 (Messunsicherheit 1)
ReferenzwerteHämatokrit bei Normalpersonen Männe
r 47 (0.40 - 0.54)Frauen 42 (0.37 -
0.47)
Methode ist wissenschaftich nicht haltbar zum
Dopingnachweis
49
(No Transcript)
50
Peptidhormone Erythropoietin (EPO) Nachweis
EPO UrintestLasne F, de Ceaurriz J
IEF PATTERN

_
P N N P E

51
Peptidhormone Erythropoietin (EPO) Nachweis
Olympische Winterspiele 2002 Salt Lake City 3
Athleten werden der Anwendung eines
neuenEPO-Präparates - Darbepoetin (NESP)
überführt
Produktinformation derFirma Ambgen zu
Darbepoetin (Aranesp)www.ambgen.com
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Peptidhormone Erythropoietin (EPO) Nachweis
EPO UrintestLasne F, de Ceaurriz J
IEF PATTERN

_
P N N P E
ca.160 pg