F

1
Compactación del DNA

• Física Molécula larga ubicada en espacios
• pequeños
• 2) Fisiológica Regulación de la expresión

2
Compactación de DNA en procariotes DNA E. coli
1 mm (1 cromosoma) Tamaño de E.coli 2 ?m largo,
0.5-1 ?m ancho Poliaminas Proteínas
asociadas H-NS, HU, IHF (similares a histonas) ?
formación de nucleoides Enzimas Topoisomerasa I
(Lk 1 ó -1) DNA girasa (Topoisomerasa tipo II,
introduce superenrollamiento a expensas de ATP,
Lk -2)
Cromosoma E.coli extendido
3
Superenrollamiento de DNA circular
4
-
M marcador PM
re ?
se ?

5
Empaquetamiento del DNA en la bacteria
DNA en solución
DNA en la célula
Papel de topoisomerasas en empaquetamiento de
cromosoma bacteriano
6
Cromosoma E.coli parcialmente empaquetado
7
(No Transcript)
8
Compactación de DNA en eucariotes DNA humano 2
m Tamaño de núcleo 10 ?m diámetro Cromatina
(DNA proteínas) ? Empaquetamiento Primer orden
de empaquetamiento Formación de
nucleosomas Histonas Proteínas básicas (ricas
en Lys y Arg)
DNA extraído a baja concentración salina
9
10 nm
Octámero 146 pb Octámero H1 168
pb Empaquetamiento de 7 veces
10
Segundo orden de empaquetamiento fibra de 30 nm
(solenoide o espiral)
DNA extraído a concentración salina fisiológica
Empaquetamiento de 100 veces
11
FISH hibridación in situ fluorescente
12
Ordenes superiores de empaquetamiento asas
ancladas en scaffold o andamiaje ? cromosomas
en interfase
Proteínas del scaffold o andamiaje Histona
H1 Topoisomerasa II
13
Cromosomas en interfase, no visibles por
microscopía regular, pueden ser visualizados por
FISH
Cromosomas 18 y 19 de linfocitos humanos en
interfase
14
Máxima compactación cromosomas en mitosis
(metafase)
Cromosoma 1 molécula de DNA
15
Tinción de cromosomas en metafase ? Bandas
características para identificación de
cromosomas (cariotipo) y detección de
anormalidades
Tinción de Giemsa Bandas G en cromosomas humanos
Translocación cromosómica
Detección de translocación por FISH
16
Grado de compactación y regulación de la
expresión genética
compacto
relajado
17
Factores de transcripción inducen la
remodelación de la cromatina
18
Regulación positiva por acetilación
19
Regulación negativa por desacetilación
20
Silenciamiento de genes por metilación del DNA
21
Identificación de regiones acetiladas en el genoma
22
Cromatina Eucromatina transcripción
activa Heterocromatina baja actividad
transcripcional
Modelo de silenciamiento en la heterocromatina