St

1
Validation des produits stériles
(solutions) Présenté par Kok-Kaung
Chantha Spécialiste en validation Kok-kaung.chanth
a_at_snclavalin.com [phone] (2309)
2
Buts de la présentation

• Apprendre ce quest un produit stérile
• Apprendre les normes et méthodes de lindustrie
  pour fabriquer des produits stériles
• Apprendre laspect du nettoyage des salles de
  fabrication de produits stérile
• Apprendre ce quest une salle blanche
• Apprendre les méthode de stérilisation des
  produits stériles
• Se familiariser avec laspect de la validation
  pour la fabrication des produits stériles

3
Contenu

• Introduction
• Quest-ce quun produit (médicament) stérile?
• Pourquoi stériliser les produits?
• Passer en revue les points les plus importants
  pour pouvoir fabriquer des produits stériles
• Salles de fabrication
• Personnels
• Procédé de fabrication (remplissage)
• Équipements
• Stérilisation

4
INTRODUCTION
5
Introduction

• Les médicaments stériles sont des produits
  pharmaceutiques "libre de microorganismes
  viables".
• la majorité des médicaments stériles sont
  injectables ou utilisés de façon à ce qu'elles
  peuvent-être en contact direct avec des plaies
  ouvertes ou muqueuse.
• La sécurité de ces médicaments est très
  importante considérant l'impact quils peuvent
  avoir sur la santé publique.

6
Introduction (suite)

• Les médicaments stériles sont produits en milieu
  aseptique, cest-à-dire, remplissage du produit
  dans un environnement à air contrôlé et propre
  avec des composantes pratiquement stériles (on
  appelle ces salles des salles blanches ou  clean
  rooms ).
• La production des médicaments stériles implique
  plusieurs aspects ou touche plusieurs implication
  de la production et de la validation. Elle
  touche
• la stérilisation des items et produits (procédé
  de stérilisation)
• Le procédé de fabrication (remplissage)
• La bonne formation du personnel (habillement et
  comportement dans les salles blanches)
• Le nettoyage des équipements et salles
  (validation de nettoyage)
• La qualité de lair des salles (grâce aux
  systèmes HVAC qui contrôle lenvironnement)

7
Introduction (suite)

• Le remplissage aseptique implique
• Que le produit, les composantes de remplissage
  (flacons, bouchons, équipement, etc...), soient
  assujettis à un procédé de stérilisation
  indépendant.
• Lorsque stérilisés, ces éléments sont assemblés
  pour faire le remplissage aseptique dans un
  environnement à air contrôlé.
• Fourni un niveau d'assurance de stérilité (SAL)
  de 10-3 une chance sur mille d'avoir un
  contenant contaminé.
• Ce SAL est basé sur les limites et précision de
  la méthode de validation plus que sur le fait
  qu'il soit acceptable d'avoir un contenant sur
  mille de possiblement contaminé.
• C'est d'ailleurs pourquoi dans la mesure du
  possible tout médicament "stérile" devrait de
  préférence être stérilisé de façon terminale.
• Des échantillons du remplissage sont pris pour
  tester la stérilité (CQ)

8
Salles de fabrication
9
Salles de fabrication

• Les salles de fabrication de produits stériles
  sappellent des salles blanches (ou  clean
  rooms ).
• Pour maintenir les salles propres
• Lors de la conception et construction des locaux
  de fabrication il est important que les matériaux
  utilisés soient résistant au nettoyage régulier.
• Le contrôle de la qualité de l'environnement des
  salles blanches est directement relié au bon
  fonctionnement du système de ventilation, au
  comportement des opérateurs et au programme de
  nettoyage.
• Les surfaces et personnels sont échantillonnés
  lors de la fabrication.
• Les surfaces des salles sont nettoyées et
  désinfectées de façon périodique selon une
  procédure établie.

10
Salles de fabrication (suite)

• La configuration des locaux est aussi très
  importante
• La configuration des salles doit permettre
  davoir des SAS de transfert de gros matériel
• Des SAS de transfert de petit matériel
  (pass-through).
• Les salles doivent avoir des pressions positifs
  ou négatives, selon le cas, pour éviter la
  contamination croisée entre salle
• Les salles doivent être conçues de façon à
  éliminer les poussières.

11
Salles de fabrication (suite)

• La qualité de lair des salles blanches doivent
  respecter les normes en vigueur.
• Lair alimentant les salles blanches doivent être
  filtrés avec des filtres de hautes efficacités
  (HEPA).
• Toutes les salles blanches doivent subir un
  contrôle environnementale des locaux pour voir si
  elles rencontrent les critères de la
  classification de la salle
• Mesure des particules totales dans lair à laide
  dun compteur de particules étalonné.
• Mesure des particules viables dans lair à laide
  dun échantillonneur de microorganismes dans
  lair et de plaque de milieu de culture
  (géloses).
• Échantillonnage des surfaces de travail (à laide
   rodac  qui sont des milieux milieu de culture
  de TSB (Tryptose de bouillon de soya).
• Contrôle de la température et de l'humidité
  relative
• Analyse de tendance des données environnementales
  pour détecter toute déviations aux spécifications
  établies.

12
Salles de Fabrication (suite)Classification
typique des locaux de fabrication pour produits
stériles
13
Salles de fabrication (suite) Spécifications de
la qualité de l'air des locaux

• Particules Totales dans lair

FED-STD-209E EU (CAN) ISO Particules gt 0,5 mm / m3 dair Particules gt 5,0 mm / m3 dair
100 A 5 3,500 0
10,000 C 7 350,000 2,000
100,000 D 8 3,500,000 20,000
Particules Viables dans lair
FED-STD-209E EU ISO Maximum CFU/m3
100 A 5 1
10,000 C 7 100
100,000 D 8 200
CFU Colony Forming Unit
14
Salles de fabrication (suite) Spécifications
de la qualité de l'air des locaux (suite)

• Particules viables sur surface

FED-STD-209E EU (CAN) ISO CFU par plaque 25 cm2 (rodac)-général CFU par plaque 25 cm2 (rodac)-plancher
100 A 5 lt1 lt1
10,000 C 7 5 10
100,000 D 8 50 50
Température 18-20oC Humidité 30-55 RH
15
Salles de fabrication (suite)

• Lentrée du matériel dans les salles blanches ne
  peuvent se faire nimporte comment
• Pour entrer le matériel du côté non-stérile vers
  le côté stérile (ou propre), des procédure
  établies doivent être respectées
• Le gros matériel (chariot, remplisseuse, etc.) et
  matériel qui ne sont pas résistants à la chaleur
  doivent être lavés et désinfectés à lalcool
  (isopropanol, en général).
• Les matériels plus petits et autoclavables,
  doivent être stérilisés.
• Tout matériel qui entre dans les salles blanches
  doit généré aucune ou presquaucune particule.

16
Salles de fabrication (suite)

• Sélection et qualification des agents nettoyants
  pour les locaux
• Pour choisir le bon agent nettoyant pour les
  salles ou équipements, on doit aller selon le
  type dopération de fabrication.
• Souvent lagent nettoyant va être validé.
• Une procédure sera mise en place une fois la
  validation du nettoyage terminée

17
Salles de fabrication (suite)

• Validation des salles blanches
• Validation de larchitecture
• Validation du nettoyage de la salle
• Validation de la qualité de lair

18
Personnels
19
Personnels

• Le personnel doit respecter les procédures
  reliées au salles blanches.
• Le personnel doit respecter une bonne hygiène.
• Tout personnel entrant dans les salles blanches
  doit reporter tout risque de contamination relié
  à leur condition.
• Le personnel ne peut pas entrer avec des
  vêtements ou articles risquant de contaminer les
  salles.
• Le personnel entrant dans les salles blanches
  doit porter un habit dédier aux salles blanches.

20
Personnels

• Le personnel (les opérateurs) impliqué dans le
  fabrication de produits stériles doit au minimum
  être entraîné sur les procédures suivantes
• Notions de base sur la microbiologie (formation
  sur les procédures)
• Technique d'habillage en salle blanche
• Remplissage de façon aseptique des produits.
• Circulation et travail en salles blanches

21
Personnels

• La qualification du personnel consiste à
• Vérifier et certifier leur technique d'habillage
  par l'échantillonnage de leur habits.
• Contrôler leur aptitudes à effectuer le travail
  aseptique en les faisant participer à un minimum
  de trois remplissages aseptiques simulés.
• Des échantillons sont pris sur les opérateurs
  pendant la fabrication.

22
Procédés de fabrication (remplissage)
23
Procédé de fabrication (remplissage)

• Il nest pas nécessaire de fabriquer un produit
  stérile dans un environnement stérile.
• La fabrication doit, par contre, se faire dans un
  environnement contrôlé (classe D au minimum). Le
  produit est ensuite transféré du côté stérile
  pour le remplissage.
• La fabrication des produits stériles se font avec
  de leau pour injection ou de leau purifiée. Si
  des gaz (comme lazote) sont impliqués, ils
  doivent respecter les normes des gaz de
  production.
• Tout matériau en contact avec le produit doit
  être sanitaire.

24
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Le remplissage du produit doit se faire dans une
  salle de classe A ou B, dépendant sil va être
  stérilisé de façon terminale ou non (à
  lautoclave).
• Un produit qui sera stérilisé à lautoclave peut
  être rempli en classe B (entourée dune classe C
  au minimum).
• Un produit qui est filtré (pas résistant à la
  chaleur), doit être rempli dans un environnement
  de classe A, cest-à-dire, sous des flux
  laminaire (entourée dune classe B au minimum).
• Des échantillons sont pris lors du remplissage
  pour analyser le produit et sassurer de sa
  stérilité (CQ).

25
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Le remplissage doit être tester pour voir sil
  est fait de façon aseptique. Cest ce quon
  appelle le  media fill .
• Simulation du procédé de remplissage (media
  fill)
• Communément appelé dans l'industrie  media
  fill  ou  broth trials   (remplissage
  aseptique).
• Définition Méthode utilisée pour évaluer un
  procédé de remplissage aseptique en utilisant un
  milieu de croissance microbienne et des
  procédures d'opération qui imitent de très près
  les procédures normales pour la remplissage de
  produits stériles.
• La simulation du procédé de remplissage se fait
  dans une phase PQ de validation.

26
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• Si le produit est filtré, en parallèle ou en
  pré-requis, le procédé de filtration qui est
  l'essence même de la stérilisation du produit en
  remplissage aseptique, doit-être validé
  spécifiquement pour le produit (solution) à
  filtrer.

27
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• Approche du pire cas
• Utilisation de composantes et équipement qui sont
  restés dans la zone post-stérilisation (maximum
  un mois),
• Avoir le maximum de personnel possible dans la
  salle de remplissage (tout personnel susceptible
  dêtre présent lors dun remplissage),
• Simuler les périodes de pause et la circulation
  du personnel,
• S'assurer que la durée du remplissage s'approche
  de façon réaliste de la durée normale de la
  fabrication d'un lot de produit ou l'excède
  légèrement.

28
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• Approche du pire cas (suite)
• Un minimum de 3000 contenants doivent-être
  remplis par exercice de simulation pour démontrer
  un assurance de stérilité de 10-3 soit un
  contenant sur mille trouvé contaminer avec une
  probabilité de 95.
• Tout le personnel devant être présent lors dun
  remplissage doit être qualifié, selon leur rôle
  pendant le remplissage.

29
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• Approche du pire cas (suite)
• Doit couvrir toutes les étapes du procédé
• filtration sur filtre 0.22µm
• remplissage sous les mêmes conditions et
  paramètres que le procédé à valider contenants,
  bouchons, vitesse, volume, taille maximum du lot.
• inclure toutes les manipulations aseptiques

30
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• Sélection du milieu test à utiliser
• Il serait couteux d'utiliser le produit lui-même
  pour des fins de validation, d'autant plus que le
  produit peut quelque fois présenter de
  l'inhibition à certains microorganismes.
• Il est recommandé d'utiliser un milieu de culture
  générale qui supportent la croissance d'un large
  spectre de microorganismes tel que "Soy Casein
  Digest Medium (SCDM)" ou "Tryptic Soy Broth
  (TSB)", et plus particulièrement les
  microorganismes isolés de l'environnement des
  salles blanches ou des tests positifs de
  stérilité (produits contaminés).

31
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• Évaluation des échantillons
• Tous les contenants remplis (minimum 3000)
  doivent être incubés à 35 2C pour 14 jours.
• Tous les échantillons doivent être observés après
  7 et 14 jours pour la présence de contaminants
  (milieu devient trouble).
• Un test positif de croissance doit être effectué
  pour démontrer la qualité du milieu test utilisé
  à supporter la croissance de microorganismes
  standards.
• Les données environnementales (particules totales
  et viables, échantillonnage de surfaces et
  d'opérateurs) doivent-être vérifier pour leur
  conformité aux spécifications établies.

32
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• Nombre et fréquence des simulations
• Un minimum de trois simulations rencontrant les
  spécifications doivent être effectuées pour
  considérer le procédé comme validé.
• Les simulations doivent être répétées
  périodiquement. La pratique courante dans
  l'industrie est de faire des simulations tous les
  trois mois sur chaque ligne de remplissage
  aseptique.

33
Procédé de fabrication (remplissage) (suite)

• Simulation du procédé de remplissage (suite)
• La simulation doit aussi être refaite lors de
  changement tel que
• changement majeur de l'équipement de remplissage
• modifications aux locaux de remplissages qui
  peuvent affecter la qualité des conditions
  environnementales
• augmentation du nombre d'opérateurs présents
• changement majeur au procédé et procédures
  d'opération
• Nouvel opérateur
• Une qualification doit être fait pour chaque
  opérateur

34
Procédé de fabrication (remplissage)

• Documentation pour le remplissage aseptique
• Comme pour chaque validation à effectuer, il doit
  y avoir un protocole de validation approuvé en
  place avant de démarrer la validation.
• Lors de l'exécution des remplissages aseptiques,
  on peut utiliser le format des formules types de
  fabrication pour documenter les données brutes de
  l'exécution de l'exercice simulé pour les fins de
  validation.
• Les résultats et conclusions de la validation
  doivent être documentés dans un rapport final.

35
Équipements
36
Équipements

• Les équipements utilisés en production doivent
  être conçus de façon à faciliter le nettoyage,
  désinfection ou stérilisation.
• Les équipements installés dans les salles
  blanches doivent être conçus à pouvoir être
  déplacés pour être entretenus ou réparés à
  lextérieur des salles blanches.
• Tous les équipements de production doivent faire
  parti dun programme dentretien préventif.

37
Équipements (suite)

• Chaque équipement ou pièces déquipement sont
  nettoyés après chaque fabrication.
• Les pièces en contact avec le produit sont soit
  lavées de façon manuel ou automatique. Peu
  importe la façon, la méthode de nettoyage doit
  être validée.

38
Stérilisation
39
Stérilisation

• Stérilisation des composantes et équipement de
  remplissage
• Flacons, fioles, ampoules sont normalement
  stérilisés au four à dépyrogénisation (250C pour
  minimum 30 minutes) pour réduire voir éliminer
  les contaminants mais aussi les substances
  pyrogènes.
• Bouchons (en caoutchouc), capuchons de métal
  sont normalement stérilisés à l'autoclave à la
  vapeur avec des cycles "overkill".
• Équipement de remplissage filtre 0.22µm pour
  filtration finale de la solution en vrac, tubes
  pour l'assemblage de la ligne, aiguilles de
  remplissage sont aussi normalement stérilisés à
  la vapeur avec des cycles "overkill".

40
Stérilisation (suite)

• Tout produit stérile doit subir une stérilisation
  terminale (à la vapeur), à moins que le produit
  soit sensible à la chaleur.
• La stérilisation du produit peut soit se faire
  dans un stérilisateur à la vapeur, dans un
  réacteur ou par filtration.
• Si un produit est filtré, il doit être rempli
  dans un environnement de classe A, avec au moins
  une classe B autour.
• Un produit qui est stérilisé de façon terminale
  peut être rempli dans un environnement de classe
  B ou classe A avec au moins une classe C autour.

41
Stérilisation (suite)

• Filtration
• La filtration est une méthode courante de
  stérilisation des produits en solution qui sont
  par la suite remplis dans des contenants
  stérilisés sous conditions aseptiques.
• La filtration est effectuée avec un filtre de
  0.22 microns.
• Un filtre stérilisant, est un filtre qui, en
  présence d'un challenge biologique tel que la
  bactérie Pseudomonas diminuta (P. diminuta,
  diamètre moyen de 0.3µm) à une concentration
  minimum de 107 organismes par cm2 de la surface
  du filtre, produira un effluent stérile.
• Lintégrité du filtre doit être testée avant et
  après chaque filtration.

42
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale
• La stérilisation terminale implique
• Le produit fini, complètement assemblé et scellé,
  est soumis à un procédé de stérilisation
  généralement stérilisation à la vapeur.
• Fournit une niveau d'assurance de stérilité (SAL)
  de 10-6 une chance sur un million d'avoir un
  contenant contaminé.

43
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Détermination de la charge microbienne du produit
  à stériliser
• La charge microbienne aussi appelée le
  "bioburden" du produit à stériliser aidera à
  déterminer la létalité à appliquer (Fo) ainsi que
  le challenge biologique (type et concentration du
  challenge) à utiliser pour la stérilisation
  terminale d'un produit "stérile".
• Il est d'autant plus nécessaire de déterminer la
  charge microbienne car la majorité des produits
  liquides sont sensible à la chaleur et ne peuvent
  donc pas être stériliser en cycles "overkill".

44
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Autres éléments importants à considérer pour la
  stérilisation terminale sont
• prendre les mesures nécessaires lors de la
  fabrication du produit pour minimiser
  l'introduction de contaminants autres que le
   bioburden  naturel déjà mesuré
• travailler en environnement contrôlé
• faire des études de distribution de la chaleur et
  pénétration de la chaleur dans la chambre de
  l'autoclave

45
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Sélection du challenge biologique
• Le microorganisme le plus couramment utilisé
  comme challenge biologique dans la stérilisation
  à l'autoclave est le Geobacillus
  Stearothermophilus. Étant une bactérie sporulent,
  elle est très résistante à la chaleur.
• La concentration et la nature du challenge
  biologique est basée sur le bioburden du produit.
  Le challenge doit être équivalent sinon supérieur
  à celui du produit.
• Dans les cas ou le G. stearothermophilus ne
  peut-être utilisé car il n'est pas représentatif
  du bioburden du produit (étant trop résistant) le
  Bacillus subtilis peut-être utilisé.

46
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Sélection du challenge biologique (suite)
• Les organismes les plus résistants (isolés des
  produits) à la chaleur ont une valeur D dau
  moins 1.0 minutes à 121C. Normalement, les
  organismes isolés des produits ne présentent
  aucune résistance à la chaleur (car
  non-sporulant), il est adéquat d'utiliser
  arbitrairement la valeur D 1.0 minutes à 121C
  pour les fins du calcul, ce qui demeure très
  conservateur.
• La valeur D d'organismes peut-être déterminée en
  utilisant un BIER vessel (Biological Indicator
  Evaluator Resistometer). Il s'agit d'un petit
  autoclave à la vapeur.

47
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Sélection du challenge biologique (suite)
• Connaissant le challenge biologique à utiliser,
  on peut calculer la létalité désirée (F0) pour
  obtenir un assurance de stérilité de 10-6.
• La valeur de F0 désirée se calcule comme suit
• Fo Dvalue(121.1) (Logpopulation LogSAL)
• Il est important durant la validation de la
  stérilisation terminale de confirmer que la
  valeur de F0 calculée est suffisante pour obtenir
  un SAL de 10-6. Ceci est accomplie par
  l'exposition de contenants inoculés avec à la
  bonne concentration du challenge biologique (G.
  Stearothermophilus en ampoule) et disposés à
  l'intérieur de la chambre d'autoclave dans les
  zones froides identifiées lors des études de
  pénétration de la chaleur.
• L'inoculation du challenge peut se faire
  directement dans le produit (ce qui peut-être
  couteux) ou dans une solution équivalente
  (comparable pH, viscosité, densité) capable de
  supporter la croissance du challenge et ne
  possédant pas de propriétés inhibitrices.

48
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Contrôle des paramètres de stérilisation
• Pour la stérilisation terminale (autoclave à la
  vapeur) les paramètres à contrôler sont
• La valeur de F0 finale de tous les thermocouples
  utilisés
• La période de stérilisation à 121C
  (sterilisation hold time)
• Les phases du cycle pré-vacuum, air injection,
  stérilisation, refroidissement
• Chaque contenant inoculé avec le challenge
  biologique est positionné à coté d'un contenant
  qui contient un thermocouple pour mesurer la
  température du produit durant le cycle de
  stérilisation et ainsi obtenir la valeur de F0.

49
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Évaluation des échantillons
• Les contenants inoculés doivent être incubés dans
  l'heure ou au maximum 4 heures suivant la
  stérilisation à 55-60C pendant au moins 7 jours.
• Les échantillons doivent être observés pour
  croissance microbienne (turbidité de la solution)
  à chaque jour d'incubation.
• Si il y a croissance, l'identité du
  microorganisme doit être déterminé pour prouver
  qu'il s'agit bien du challenge inoculé.
• On doit reproduire trois cycles de stérilisation
  rencontrant toutes les spécifications établies
  pour déclarer un cycle de stérilisation terminale
  valide.

50
Stérilisation (suite)

• Stérilisation terminale (suite)
• Les spécifications sont
• Paramètres du cycle de stérilisation sont
  reproductibles et dans les valeurs établies F0 ,
  température, durée des phases du cycle, pression
  dans la chambre.
• Aucune croissance observée dans les contenants
  inoculés avec le challenge.
• Culture positive et numération adéquate du
  challenge dans un contenant non-exposé à la
  stérilisation.

51
Stérilisation (suite)

• Stérilisation dans un réacteur
• Le produit fini est stérilisé avant de le
  lembouteiller.
• La stérilisation se fait avec la vapeur
  directement dans le réacteur contenant le
  produit.
• Se fait de cette façon quand le contenant du
  produit ne peut être stériliser à la vapeur et
  que le produit résiste à la chaleur.

52
Stérilisation (suite)

• Requalification périodique
• Tout comme les remplissages aseptiques, les
  cycles de stérilisation à l'autoclave ou dans un
  réacteur doivent faire l'objet d'une
  requalification périodique.
• De fait, ces requalifications sont faites sur une
  base annuelle pour chaque type de
  charge d'autoclave étant définis par le format
  de contenants, le volume par contenants, la
  quantité de contenants par charge, la
  configuration de la charge. Ou ça peut être fait
  avec les produits pire cas ( worst case ).

53
Références
54
Références

• Validation of Steam Sterilization Cycles,
  Techical Monograph No.1, Parenteral Drug
  Association, 1978.
• Validation of aseptic pharmaceutical processes.
  Frederick J. Carleton James P. Agalloco, Marcel
  Dekker, New York,1986. (ISBN 0-8247-7362-4)
• Guidelines on sterile drug products produced by
  aseptic processing. CDER, FDA, June 1987.
  (www.fda.gov)
• Lignes directrices des Bonnes Pratiques de
  Fabrication, PPT, Santé Canada, 2002.
  (www.hc-sc.gc.ca/hpb-dgps/therapeut)
• ISO 14644-1