ANTICORPII MONOCLONALI

1
ANTICORPIIMONOCLONALI
2
SISTEMUL IMUNITAR

• Immunis scutit
• Sistemul imunitar totalitatea proceselor
  biologice, a organelor, a celulelor, a produsilor
  celulari care asigura protectia impotriva
  infectiilor
• Imunitatea
• Nespecifica
• Specifica

3
ANATOMIA SISTEMULUI IMUNITAR
Amigdale si adenoide
Ganglioni limfatici
Vase limfatice
Timus
Ganglioni limfatici
Splina
Placi Peyer
Apendice
Maduva hematogena
4
CELULELE SISTEMULUI IMUNITAR
Macrofag
Mastocit
PMN eozinofil
Eritrocite
Maduva
PMN bazofil
Monocit
Megacariocit
Os
Celula stem hematopoetica
Celula stem multipotenta
Celula progenitoare mieloida
PMN neutrofil
Plachete
Celula progenitoare limfoida
Celula dendritica
Limfocit T
Celula NK
Limfocit B
5
ACTIVAREA LB SI PRODUCEREA DE ANTICORPI
Anticorp circulant
Antigen
Rec. de Ag specific LB
Celula prezentatoare de Ag
HLA clasa II si Ag procesat sunt expuse
Procesarea Ag
Antigen
HLA clasa II
LB
Limfokine
Anticorpi
Celula prezentatoare de Ag
Th activat
Plasmocit
6
ANTICORPII
Lanturi grele
Lanturi usoare
Paratop
Regiune constanta
7
ANTICORPII
IgA, IgD, IgE, IgG
IgA
IgM
8
PRODUCEREA ANTICORPILOR MONOCLONALI
Antigen
Fuzionarea celulelor ? HIBRIDOM
Mielom
Plasmocite producatoare de Ac
Testarea clonelor
Cultivarea hibridoamelor
Clonele dorite se cultiva sau se congeleaza
Hibridoamele se separa si se cultiva
Mentinerea hibridoamelor in soareci
Anticorpii monoclonali sunt purificati
9
PRODUCEREA ANTICORPILOR MONOCLONALI

1. Antigenul (celule, componente ale membranei
   celulare, microorganisme, etc.) se injecteaza
   soarecelui
2. Cand titrul de anticorpi serici a crescut
   corespunzator, se realizeaza splenectomia si se
   colecteaza LB
3. Se obtine hibridomul prin fuzionarea LB murine
   cu celule provenite din mielom
4. Se cultiva hibridoamele si se colecteaza
   anticorpii

10
PROBLEME

• HAMA human anti-mouse antibodies
• Dupa 10-14 zile
• Eruptie cutanata (urticarie)
• Bronhospasm
• Hipotensiune
• Soc anafilactic

11
TEHNICI DE INGINERIE GENETICA

• Soareci transgenici (gene pentru Ig umane)
• Mab himerici
• Regiuni variabile murine
• Regiuni constante umane
• Mab umanizati
• Regiuni hipervariabile murine
• 95 umani
• Bacteriofagi/plasmide

12
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

• Diagnostic
• Terapie
• Cercetare

13
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

• Diagnostic
• Imunohistochimie
• Imunofluorescenta
• Radioimunodetectie (RIA)
• Medicamente
• Hormoni
• Proteine
• Toxine
• Droguri
• Imunodetectie enzimatica (ELISA)

14
IMUNOHISTOCHIMIE DIRECTA
15
IMUNOHISTOCHIMIE INDIRECTA
16
IMUNOHISTOCHIMIE
17
IMUNOHISTOCHIMIE
18
IMUNOFLUORESCENTA
19
IMUNOFLUORESCENTA
20
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

• Terapie
• Infliximab TNFa
• Abciximab GpIIb/IIIa
• Omalizumab IgE
• Rituximab CD20
• Alemtuzumab CD52
• Trastuzumab HER2
• Bevacizumab VEGF

21
IMUNOTERAPIE
Radioizotop
Herceptin
Factor de crestere
Herceptin blocheaza receptorul
Anticorp
Antigen
Celula tumorala mamara
Distrugerea celulei tumorale
Cresterea se opreste
22
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI

• Cercetare
• Imunohistochimie
• Identificarea unor molecule
• Purificarea unor structuri