??????? Luminescence Immunoassay

1
???????Luminescence Immunoassay
2

• ?.??
• ????????????????????????????????????????
  ?????
• ?????????????????????,??????????,??
  ??????????????????????,??????????????,????????????
  ??????????,??????????????

3

• 1.?????(Antigen , Antibody)
• ????????????????????
• ?????????,????????????????,???????????
• ?? (antibody . Ab) ??? (antigen . Ag)
  ????????????????
• ????????,??????????,??????????????????
•  

4

• (1)??
• ???,??,??,????,?????
• (2)??
• ????????(????-????)
• ????????????
• ??? a-??? ß-??? ?-???
• ?????ß -????? -????
• ????????????
• IgM . IgA . IgG . IgD?IgE
• ?M .?A.?G.?D.?E

5

• 2. ???????(RIA)
• 1959 Berson?Yallow
• ?????????????????????????
• ??????
• ????????????
• ????????(Ab)
• Ag Ab Ag-Ab
• ??????????????????,
• Ag Ag-Ab Ag-Ab Ag ( Ag-Ab )
• ??Ag,?????????????(Ag)??
• 1977 ??????????

6

• ????
• ??????????????
• ????(?,???,??)
• ??(?????,?????,???)
• ????????
• ??????,????
• ??
• ??????????????????,??????????????
• ??????????????????
• ????-??????????
•  

7
3 ??????

• ?????????
• ???????????
• ????????IgG??
• ??????????????
• ?????
• ????????????,?????????????????,???????,
  ????????????????????????,????????????,???450nm(???
  ???????600nm)???????,????????????????
• ??????????????

8
??????????????????
9

• 4.???????
• ???????
• ?????????
• ????????????????????
• ??
• ????
• ????
• ????,????????
• ?????,?????????

10

• ?.???????
• Fluonescense Immuuoassay
• 1.????
• (1)    ????
• a ????????????,??????????
• ???? ?em 325-350 nm (?ex 280 nm)
• ???NADH???? 430-470 nm
• (?ex 330-360 nm)
• ???em gt 500 nm

11

• b. ??????????? gt 50 nm
• c. ?????????????
• ?????????
• d. ???????,????????? ??????????
• e. ????????????????,?????????????
• ?ex ???vis?

12

• (2) ????
• ??? ?????
• ?????,?????????????????????????????
• ???????,?????????IgG????????.
•   ??????? ????????
• ??????,??????????,?????????,???????????,???????
  ??????????

13

• (3)  ?????
• ???????????????????????????
• ?Eu(?), Tb(?), Nd(?)?
• ß-?????
• ?-????????
• ?????
• ????
•  
•  ????????? life time 501000 ?s
• ????103106?
•  

14

• 2.??????????
• (1) ?????
• ????????????,??????,?????????(??)???,?????????
  ????????????????????????????????
•   ?????
• ?????
• ?????
• ??????
• ???
• ?????

15

• a.?????
• ??????????????????????????????
• b.?????
• ??????????????????????,?????????,?????????????
  ?????????????,???????????????
• c. ?????
•  

16

• d. ??????
• ?????????,????????,?????????????????,?????????
  ??
• ??????
• i) ????(F)????
• ???(R)????
• AgAgFAbR?(Ag-AbR) (AgF-AbR)
• Ag?????????????

17

• ii) ????????????
• Ag AbF AbR?AbF-Ag-AbR
• e. ???

18

• 2)??????
• ???????????,???????
• ??????????????????????????,???????????????????
  ????????????????,???????(???)????
• ??????
• ????????????????????
•   ??????????-----?????
•    

19

•   ???????
• ???????????????????????????????????10ns,??????
  ????????10-100µs??????????,??????????????

20
(No Transcript)
21
???????????(Time-resolved Fluorescence
Immunoassay)
22
(No Transcript)
23

• ?????????
•     ???????????
•     ?????
• ??
• ?????,??????
• ????

24

• ?.?????????
• ?????????????????,????????????
• 1.??????
•   ???,?????????
• ???
• ???
• ???
• 1,2-??????
• ??????
•   ???????
• ??????

25

• 2. ?????
• (1)????????????
• a.Luminol?????
• Luminol??????,???????
• Isoluminol??????????
•  Luminol??????????
• Isoluminol??????????
•  
• ????????????,?CL????,???????????

26
(No Transcript)
27

• b.???? ??????
•  ??
• ?????,??????????????,??????????????
• ??
• ???????
• c.??????
• ?????
• ?????????????,?????
• ???????
• ?????????????????

28

• (2)??????????
• ???????????????,??????????????
• a.?????(peroxidase , POD)
• Luminol H2O2
• ?POD?????
• b.?????,??????
• ?????,???,????????
• c.?????????
• ???,????,???,???

29

• (3) ????GOD?G-6-PDH
• ??????????,???????????????,????????,??????????
  ???
• ???
•  
• (4)?????????
• ????????,????,????,???????????????????

30

• ???(??????????)
• 
  ??????
• AgAg-LAb?Ag-AbAb-Ag-L?h?

31

• ???(??????????)
• 
  
• Sp-AbAg?Sp-Ab-Ag
• Sp-Ab-AgAb-L?Sp-Ab-Ag-Ab???????hv
• ??L???????????, Ag???, Ab???, Sp????

32
(No Transcript)
33
(No Transcript)
34
ACS 180

• ?????????,????ACS 180??????????????ACS
  180Plus?ACS 180sE???,2000???????ADVIACentaur?????
  ?
• ?????????????????????????????,???????????,????????
  10??????,?????????????

35
(No Transcript)
36
(No Transcript)
37
?????????ltEgt
38
Elesys (1010 2010 E-170)

• ??????(Roche)?Elecsys ECLIA??,?????????,????????,?
  ????????????????????????? ???????????????????????
  ????,?????????????,????????,????,?????????????????
  ??,????????????

39
(No Transcript)
40
(No Transcript)
41
(No Transcript)
42

• 3 ??????????????
• (1)??
• ????
• ??????
• ?????
• ????
• ????
• ???
• ??????
• ????????????

43

• (2)??
• ????????????????
• ????????????????
• ????????????
• ????????????
• ???????????????,????????????,????????????

44

• (3)????
• a.?????????
• b.????????????????
• ?,???????,??????
• ?????
• c.?????????,??????
• ????????????????