Presentaci

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Universidad Mayor Glándulas y Sjögren
Evaluación de la expresión génica en células
epiteliales de glandulas salivales labiales de
pacientes con síndrome de Sjogren
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Universidad Mayor Titulo (sugerencia) Fracción
enriquecida en células epiteliales de GSL de
individuos controles.
Fracción enriquecida en estructuras epiteliales
glandulares provenientes de GSL de individuos
controles. A Vista panorámica que muestra acinos
de diferentes tamaños, 20X. B Corresponde a acino
que conserva su arquitectura estructural 100X. C
Acino que presenta interacciones con células
libres, 100X. D Grupo de tres acinos que
mantienen sus asociaciones 100X. E Ducto estriado
rodeado de una monocapa de células con aspecto
estructural mioepitelial, 100X. El aumento
corresponde a la magnificación original del
objetivo, sin considerar el aumento aportado por
la cámara de video.
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Universidad Mayor Titulo (sugerencia) Fracción
enriquecida en células epiteliales de GSL de
pacientes SS. No hay referencias a la flecha y
al triángulo en la figura D. Figura F cambiar
ceroso por seroso
Fracción enriquecida en estructuras epiteliales
glandulares provenientes de GSL de pacientes SS.
A Vista panorámica que muestra acinos de
diferentes tamaños, células libres y agregado de
células mononuclerares. 20X. B Corresponde a
acino mucoso con lumen dilatado y un foco de
células mononucleares 40X. C Células mucosas
libres, 100X. D Acino con pérdida de su
arquitectura normal, 60X. E Asociación de dos
acinos con lúmenes muy dilatados 60X. F dos
acinos uno mucoso a la izquierda y otro ceroso a
la derecha 60X. El aumento corresponde a la
magnificación original del objetivo, sin
considerar el aumento aportado por la cámara de
video.
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Universidad Mayor TCR y CD20 se representan con
un mayor nivel en el gráfico de la figura A, sin
embargo se observan menos marcados en los geles.
Da lasensación (mirándolo desde lejos) que TCR y
CD20 están más marcados en C3 que en C2, sin
embargo en los gráficos aparece al revés. D, E ,F
Gráficos
Niveles de los marcadores génicos específicos de
cada tipo celular en las suspensiones celulares
obtenidas desde GSL de individuos controles A, B
y C corresponden los productos de PCR
amplificados para los diferentes marcadores
analizados en tres individuos controles. D, E y F
graficos de los resultados densitométricos
expresados como el nivel de expresión del gen en
en estudio en relación a la expresión de GAPDH.
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Universidad Mayor Las diferencias entre P1 y P2
en vimentina no parecen ser tan notorias como
aparecen en el gráfico, además, P1 tiene mayor
marcación que P2 y en el gráfico está al revés
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Universidad Mayor Relación
Comparación de los niveles de relativos de
expresión para cada gen en estudio entre el grupo
control y el grupo de pacientes SS A y B
corresponden a los gráficos de las medias de los
niveles de expresión de cada gen determinados
como la relacion entre la cantidad de producto de
PCR obtenido para el gen en estudio y la cantidad
de producto de PCR obtenido para GAPDH. La barras
indican el error estándar de las determinaciones.
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(No Transcript)
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Pasos en un experimento de Microarray
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(No Transcript)
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Amplificacíon del RNA total
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Duplicado Analítico
Falsos Positivos
Duplicado Duplicado Biológico
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Características demográficas de la muestra
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Universidad Mayor Expresión
Análisis de agrupamiento de los resultados
generales Similitud en el patrón general de
expresíon
Lab ID Edad Biopsia
S-150 43 4.0
S-152 37 4.3
S-153 66 4.1
S-161 64 4.2
S-155 40 4.2
S-156 35 4.2
S-165 43 4.1
S-159 35 4.1
S-154 60 4.0
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Lab ID Edad Biopsia
S-159 35 4.1
S-165 43 4.1
S-150 43 4.0
S-154 60 4.0
S-156 35 4.2
S-155 40 4.2
S-161 64 4.2
S-152 37 4.3
S-153 66 4.1
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(No Transcript)
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MHC
Promedios Desv St. varianza Description
4.1 2.2 1.0 major histocompatibility complex, class II, DR alpha 
3.5 1.8 1.0 major histocompatibility complex, class II, DR beta 3 
3.4 1.8 0.9 MHC Class IIDM alpha 
3.4 1.3 0.6 major histocompatibility complex, class I, C 
3.3 1.7 0.7 major histocompatibility complex, class II, DQ beta 1 
2.9 1.1 0.5 MHC Class IHLA-C4 
2.8 1.2 0.5 major histocompatibility complex, class II, DP beta 1 
2.8 1.1 0.7 major histocompatibility complex, class II, DP alpha 1 
2.7 1.9 0.9 major histocompatibility complex, class II, DQ alpha 1 
2.5 1.2 0.5 major histocompatibility complex, class II, DQ beta 1 
Expresado en cultivos en respuesta aINF-?
Aumenta en pacientes en pacientes 74 delas
céllas ductales positivas. Aumenta en
pacientes en pacientes 58 delas céllas ductales
positivas. Aumenta en pacientes en pacientes
11 delas céllas ductales positivas. Clin.
Immunol. Immunopathol. 1996 80(1)55-66 Aumenta
su expresión en respuesta a TNF-alfa en culivos
de GSL
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Citoquinas y relacionados
Promedios Desv St. varianza Description
2.70 1.83 1.00 CD62LL-selectinLAM-1leukocyte adhesion molecule-1 
2.74 1.78 0.84 IL-2 receptor beta chain 
3.05 1.44 2.99 CXCR4CXC chemokine receptor 4L3 
2.05 0.98 0.48 chemokine (C-C motif) ligand 19 
2.03 0.77 0.28 LD78 betaalmost identical to MIP-1 alphachemokine 
2.26 0.92 0.40 MCP-1MCAFsmall inducible cytokine A2JEchemokine 
5.75 4.19 1.71 MigHumigchemokine targeting T cells 
2.84 1.27 0.65 MIP-1 betaAct-2H400SIS-gammachemokine 
1.91 0.75 0.29 transforming growth factor, beta 1
2.57 1.35 0.51 transforming growth factor, beta 2 
2.09 0.61 0.31 IL-6 
CXCR4 se expresa en las células T que se acumulan
en un distribución periductal en GSL con SS.
Receptor de quimoquina acopladoa prot. G. Se
expresa en células del sistema inmune y en el
SNC. IL-2 R es necesario para mantener el
programa de activación de los LT
MIP-beta y MCP-1 se expresan tempranamente en las
glandulas inflamadas de ratones MRLlpr y luego se
upregula ha propuesto que esta chemoquinas
podrían participar en la inducción de
sialoadenitis autoinmune en ratones. Mig se
encuentra aumentada en en los ductos de GSL de
pacientes SS.
mRNa de IL-6 ha sido detectada en celulas
epiteliales de pacientes SS. TGF-beta 1 es
fuertemente expresada en ductos de GSL normales y
con SS, pero no se expresa por células HLS-DR
positivas que son rodeadas por LT. Recientemente
se ha detectado un leve expresión en celulas
acinares.
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(No Transcript)
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Transduccion de señales mediada por INF-alfa
Promedios Desv St. varianza Description
2.61 0.96 0.37 ISGF3 gammaIFN alpha/beta-responsive transcription factor ISGF3 gamma subunit (p48) 
2.61 1.02 0.47 MxAinterferon-induced cellular resistance mediator protein 
2.38 1.62 0.85 Interferon-induced 56-KDa protein 
2.25 1.12 0.66 interferon, alpha-inducible protein (clone IFI-6-16) 
2.21 0.90 0.56 Interferon-inducible protein 9-27interferon-induced 17kDa membrane protein 
2.11 0.90 0.58 interferon, alpha-inducible protein (clone IFI-6-16) 
2.11 1.42 0.80 interferon-induced protein with tetratricopeptide repeats 2 
2.05 0.97 0.41 interferon induced transmembrane protein 1 (9-27) 
1.91 0.63 0.31 interferon stimulated gene 20kDa 
20
Proteínas que se asocian a modificaciones que
hemos observado las glandulas de los pacientes
con SS.
Proteínas asociadas a secreción Proteínas asociadas a secreción Proteínas asociadas a secreción Proteínas asociadas a secreción
Promedios Desv St. varianza Description
2.73 1.79 0.79 synaptotagmin I 
2.22 1.20 0.38 syntaxin 11 
Proteínas que unen filasmentosde actina Proteínas que unen filasmentosde actina Proteínas que unen filasmentosde actina Proteínas que unen filasmentosde actina
Promedios Desv St. varianza Description
2.45 0.95 0.43 coactosin-like 1 (Dictyostelium) 
2.18 0.97 0.40 villin 2 (ezrin) 
2.15 0.76 0.28 actin related protein 2/3 complex, subunit 2, 34kDa 
1.92 0.58 0.25 moesin 
Proteína de Uniones estrechas Proteína de Uniones estrechas Proteína de Uniones estrechas Proteína de Uniones estrechas
Promedios Desv St. varianza Description
2.00 0.89 0.39 claudin 4 
Interactua con filamentos de F.actin y
transientemente con G-actina, se ha observado su
expresión en leucositos y celulas dendriticas
Pertenece a la familia de las porteínas ERM,
actua como puente entre la mb. Plasmática y el
cioesqueleto de actina. Se ha demostrado su
participación en la sinapsis inmunológica
(LT-APC). Es un cimponente del microvilli
intestinal. El complejo arp23 esta implicado
en el control de la polimerización de
actina. Pertenece a la familia de las
porteínas ERM. Es expresada en diferentes tejidos
se localiza en los filopodios y otras
protrusiones celulares que son importantes para
el reconocimiento célula-célula.
21
Diferenciación estructural ????
Promedios Desv St. varianza Description
0.77 1.16 4.022 intelectin 

Promedios Desv St. varianza Description
5.33 1.98 0.559 lactotransferrin 

Promedios Desv St. varianza Description
2.86 1.69 0.543 transferrin 

Promedios Desv St. varianza Description
2.11 1.50 0.909 metallothionein 1G 
1.91 1.23 0.867 metallothionein 1H 
2.28 1.32 0.589 metallothionein 1L 

Promedios Desv St. varianza Description
1.98 0.69 0.359 laminin receptor 1 (ribosomal protein SA, 67kDa)