Production et Utilisation de PseudoParticules Virales VLP de Rotavirus pour limmunisation de souris

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Projet de Spectroscopie
Validation dune méthode de dosage simultané de
trois vitamines
Dimitri MILLARD Romain ULRICH 22/03/06
Responsables Monsieur Bernard HANQUET
Madame Christine STERN
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Introduction

• But Dosage simultané de trois vitamines
• 1) Vitamine B1 ou thiamine
• 2) Vitamine B6 ou pyridoxine
• 3) Vitamine B9 ou acide folique

• Principe Mesure de labsorbance des trois
  vitamines par UV-visible (Cary1E Varian)
• Déduction de la concentration par la
  méthode des moindre carrée et la loi de
  beer-lambert.

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Vitamines
- Généralités
? Découverte en 1911 par FUNCKEN, qui a mis en
évidence un composé, la thiamine, indispensable à
la vie (amine et vital ? vitamine) ?
Lorganisme a besoin de très petites quantités
pour maintenir son homéostasie ? Non
synthétisées par lorganisme ? Apportées
majoritairement par lalimentation ? Vitamines
B hydrosolubles ? Composés organiques C, H,
O, N

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(No Transcript)
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Matériels et méthodes
1.1 Pourquoi utiliser lUV ?
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1.2 Préparation des échantillons (100 mg/L)
Solution Mère vitamine ? Acide folique m
0,1003g dans une fiole de 1 L ? Thiamine m
0,1007g dans une fiole de 1 L ? Pyridoxine m
0,1000g dans une fiole de 1 L
Solution tampon acétate à 0,2mol/L ? Acide
acétique (18M) V 5,55 mL dans un bécher puis
qsp 500 ml deau distillée ? Ajout de soude
jusquà pH 5,5 (mesure avec un pH-mètre)
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Préparation des solutions fille
But Identifier chaque vitamine par son spectre
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Résultats et discussions
2.1 Identification des vitamines
Thiamine (20 mg/L)
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Pyridoxine (20 mg/L)
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Acide folique (20 mg/L)
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2.2 Stabilité dans le temps
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2.3 Problème rencontré
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Il y a toujours des particules en suspension gt
Absorbance augmente
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2.4 Validation de la méthode de dosage
- Vérification de la concentration dune solution
connue à laide de la méthode des moindres carrés
- Détermination, à partir des absorbances
mesurées à des longueurs donde caractéristiques
de lélément des coefficients dabsorption
moléculaire (e) concentrations de chaque
vitamine
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- Détermination de e1 0,00108 L/mg
e2 0,03377 L/mg
- Résolution du système suivant Absl1 e11C1
e11C2
Absl2 e12C1 e22C2
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Discussions

• Se placer à la longueur donde caractéristique
  de lélément à doser et faire une acquisition
  pour être plus précis
• Chauffage pour dissoudre lacide folique
• Autre concentration pour lacide folique
• - Essayer un autre solvant MAIS problème gt
  absorbe dans lUV

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Conclusion

• Technique assez rapide et facilement réalisable
• Calcul des moindres carrés facilité par les
  logiciels
• Étude peu coûteuse

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Bibliographie

• F. Aberásturi, A. I. Jiménez, F. Jiménez, and J.
  J. Arias, 2001, UV-Visible First-Derivative
  Spectrophotometry Applied to an Analysis of o
  Vitamin Mixture, Journal of Chemical Education,
  Vol. 78, No. 6
• Greg Dado and Jeffrey Rosenthal, 1990,
  Simultaneous Determination of Cobalt, Copper, and
  Nickel by Multivariate Linear Regression, Vol.
  67, No. 9
• Cours de Nutrition Cellulaire et Moléculaire de
  M1 Biologie Santé mention Qualité des Aliments,
  Nutrition

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Merci de votre attention Nous restons à votre
entière disposition pour répondre à vos questions