Pseudomonas aeruginosa

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Pseudomonas aeruginosa
La bactérie , sa sensibilité aux
antibiotiques , son antibiogramme.
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INTRODUCTION
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• Bactérie de lenvironnement
• Pathogène opportuniste
• Infections graves
• Résistance aux antibiotiques

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La bactérie
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• 1882 Charles GESSARD
• En latin puons pus cyaneus bleu
  foncé
• Espèce type du genre PSEUDOMONAS
• Bactérie ubiquitaire
• Saprophyte environnement
  humide eau et sol
• Pathogène opportuniste chez les malades
  immunodéficients
• Facteurs de pathogénicité
• Résistance (ATB et ATS)
• Infections nosocomiales (8 à 10 selon
  ACAR) et communautaires

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Habitat Réservoirs
EAUX Rivière , eaux usées , boues activées ,
eau de piscine,
eaux minérales , eaux thermales, eaux de boisson
. VEGETAUX Légumes , Salades ,
fruits , fleurs et aliments
ENVIRONNEMENT HOSPITALIER
Matériel chirurgical ( humidificateur ,
barbotteur , KT , endoscopes) ,
Solutions antiseptiques (Eosine aqueuse)
Solutions de nettoyage
des lentilles de contact
Médicaments et produits cosmétiques
Lieux humides , lavabos , baignoires ,
cuvettes , éponges , porte-savon
HOMME Expectorations,
urines , pus ORL , pus articulaires , PV ,
liquide pleural , selles ,
zones humides (périné , creux axillaire )
Colonisation
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• Pouvoir pathogène
• Infections
• Infections oculaires kératites, abcès de
  cornée, endophtalmies
• Infections cutanées bénignes ou graves Ectyma
  Gangrenosum, infections de plaies chirurgicales,
  infections chez les brûlés
• Infections respiratoires (mucoviscidose)
• Otites
• externes aiguës ou malignes
• moyennes chroniques
• Colonisation
• Origine endogène
• muqueuses pharyngées et intestinales colonisées
• adhésion et multiplication
• Transmission
• croisée manuportée
• solution aqueuse ou équipement contaminé

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Mortalité des IN Très élevée jusquà 50-70
au cours des pneumopathies jusquà 30-50 au
cours des septicémies
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P. aeruginosa CARACTERES
BACTERIOLOGIQUES MORPHOLOGIE
petit bacille fin
1.5-3µ x 0.5-0.8 µ
Gram très
mobile (vol de moucheron) en AEROBIOSE
asporulé ,
SLIME Couche mucoïde
donnant un aspect muqueux à la
culture et une plus grande
virulence ( soppose à la phagocytose)

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Caractères morphologiques
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Caractères culturaux
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Colonies la 
Colonies sm
Colonies M
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Culture facile sur milieu nutritif
simple Bactérie aérobie stricte Culture entre 8C
et 41C Production de pyocyanine et de
Pyoverdine Dégage une odeur arome de Jasmin par
production dorthoamino-acétophénone
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Caractères biochimiques
Oxydase , Catalase , réduction des nitrates
jusquau stade N2 Métabolisme respiratoire (MEVAG
Oxydatif) TSI Lactose - , Saccharose - , H2S
, Gaz- (pente gris métallisée) Citrate , ADH
, Acetamide
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Sa sensibilité aux antibiotiques
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Résistances Naturelles Pénicillines G, A et
M C1G, C2G et certaines C3G Cotrimoxazole
Macrolides, Cyclines Chloramphénicol
Quinolones de première génération Kanamycine
Rifampicine, glycopeptides, ac. fusidique
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Molécules actives Carboxypenicillines
ticarcilline Ureidopenicillines
Piperacilline TicarcillineAcide clavulanique
piperacilline Tazobactam Monobactames
Aztreonam Carbapénèmes Imipénème ,
Méropénème ceftazidime, cefsulodine, céfépime,
cefpirome Aminosides gentamicine,
tobramycine, amikacine, nétilmicine,isépamicine
Fluoroquinolones Ciprofloxacine colimycine
fosfomycine
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Mécanismes de résistance de P. aeruginosa
Résistance acquise 1. Modification de la
perméabilité 2. Hyper expression efflux actif 3.
modification de la cible 4. Hydrolyse enzymatique
Résistance naturelle 1. imperméabilité 2.
Systèmes defflux actifs 3. Hydrolyse
enzymatique ( excéphalosporinase chromosomique
bas niveau)
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ATB
Inactivation enzymatique (naturelle ou acquise)
Efflux actifs (naturels) hyper expression
(acquise)
Imperméabilité (naturelle ou acquise)

Modification de la cible (acquise)
Cellule bactérienne
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Mécanismes de R. acquise aux ß-Lactamines
ENZYMATIQUES -Penicillinases
transférables (PSE , OXA ,TEM)
-Cephalosporinases déreprimées -BLSE
(PER-1 , OXA , TEM, SHV) -Imipénèmase
(IMP-1) NON ENZYMATIQUES - perte de la
porine D2 (modification de la perméabilité)
- Hyper expression defflux actif -
modification structurale du LPS (modification de
perméabilité) - modification daffinité
des PLP (modification de cible)
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Résistance aux Aminosides

RESISTANCE NATURELLE
ACQUISE
Kanamycine
- Non enzymatique

- Enzymatique


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Mécanismes de résistance acquise
Résistance non enzymatique
Inhibition du
transport actif (perméabilité)
Efflux (Mex XY-OprM)
Mutation ribosomale (cible)
Résistance
enzymatique
(AAT , ANT , autres enzymes ) Associations
fréquentes
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Résistance aux Fluoroquinolones

• Diminution daffinité de la cible
• DNA gyrase- topoisomérase II,
  sous-unités A (gyrA)
• topo-isomérase IV (parC)
• Imperméabilité
• porines (oprF) , LPS
• Hyper expression de divers systèmes defflux
• Associations fréquentes

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Son antibiogramme
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Technique Méthode de diffusion en gélose

• Fiche technique n1 Bactéries non exigeantes
  (fascicule Standardisation de lantibiogramme en
  Médecine humaine à léchelle nationale selon les
  recommandations de lOMS 4ème édition 2005)
• Inoculum 0,5 MF
• Ensemencement de 2 boîtes rondes (90mm ø) de
  milieu Mueller-Hinton

24mm
CAZ
TCC
TOB
CIP
IMP
ATM
FOS
GM
PIP
TIC
AN
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Liste des antibiotiques à tester

• Ticarcilline (TIC)
• Ticarcilline Acide Clavulanique (TCC)
• Pipéracilline (PIP)
• Ceftazidime (CAZ)
• Aztreonam (AZM)
• Imipeneme (IMP)
• Gentamicine (GM)
• Tobramycine (TOB)
• Amikacine (AN)
• Ciprofloxacine (CIP)
• Fosfomycine (FOS)

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• Contrôle de qualité
• souche Pseudomonas aeruginosa ATCC
  27853
• Lecture
• Mesurer avec précision à laide dun pied à
  coulisse , les diamètres des zones dinhibition ,
  à lextérieur de la boîte fermée.
• Comparer ces diamètres aux valeurs critiques
  de la table de lecture n10 page 100 du fascicule
  de Standardisation .
• Classer la bactérie dans lune des catégories
  S , I , R
• Lecture interprétative nécessite de connaître
  les mécanismes de résistances de Pseudomonas
  aeruginosa .

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Lecture et interprétation
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Molécules à tester
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Bêtalactamines
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Phénotype Sauvage TIC S PIP S TCC S CAZ
S ATM S IPM S
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Phénotype sauvage Présence dune
céphalosporinase chromosomique inductible Amp
C (Antagonisme entre TIC substrat et
linducteur IPM)
antagonisme
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Phénotype sauvage Céphalosporinase
chromosomique inductible Substrats TIC ,
CAZ Inducteur IMP
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• Expression dune pénicillinase
• Haut niveau
• Résistance à la TIC et à la PIP
• Restauration par lAcide Clavulanique de
  lactivité de la TIC

Pseudomonas aeruginosa PSE-1
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• Expression dune Pénicillinase bas niveau
• Résistance à la TIC et sensibilité à la PIP
• Restauration de lactivité de la TIC par lacide
  clavulanique

Pseudomonas aeruginosa PSE-3
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• Expression dune autre Pénicillinase bas niveau
• Résistance à la TIC et à la PIP
• Restauration faible de lactivité de la TIC par
  lacide clavulanique

Pseudomonas aeruginosa OXA-4
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Phénotype Céphalosporinase déréprimée
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Phénotype Céphalosporinase déréprimée
Hyperproduction de la Céphalosporinase
chromosomique (mutation)
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Phénotype BLSE
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(No Transcript)
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BLSE Image de Synergie entre TCC
(TicarcillineAcide Clavulanique) et Aztreonam
(ou Ceftazidime)
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Phénotype BLSE
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Altération Porine D2
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Altération Porine D2
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Phénotype Carbapénèmase VIM-2
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Phénotype hyper expression defflux actif
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Autres molécules
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Phénotype Sauvage GM S TOB S AMK S
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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Données de résistance (RI) aux antibiotiques de
P.aeruginosa pour lannée 2005 -Réseau AARN
Antibiotiques 2005 (n2228)
Ticarcilline 17
Pipéracilline 17,2
Ceftazidime 13,2
Imipenem 10,7
Gentamicine 20,3
Tobramycine 17
Amikacine 9,2
Pefloxacine 31,7
Ofloxacine 21,6
Ciprofloxacine 15
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CONCLUSION Bactérie saprophyte donc naturellement
multi résistante Nombreux mécanismes de
résistance acquise avec fréquente intrication de
plusieurs mécanismes Difficultés thérapeutiques
car Multi résistanceterrain