TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS (TSA) OU ANTIBIOGRAMA

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TESTE DE SUSCEPTIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS
(TSA) OU ANTIBIOGRAMA
Thiago C. Nascimento
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Conceito Teste para verificar o comportamento
dos microrganismos (sensibilidade ou resistência)
in vitro, frente a diversos antimicrobianos,
para a escolha do antimicrobiano ideal.

• Indicações
• Para microrganismos isolados e identificados
  como agentes causadores de infecção
• Quando o microrganismo causador da infecção
  apresenta, estatisticamente, grande variabilidade
  no espectro de resistência ou tendência à mesma.
• Ex Staphylococcus aureus, Pseudomonas sp.

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Dispensado Para microrganismos cuja
sensibilidade não apresenta variação ao longo do
tempo. Ex Neisseria meningitidis, Streptococcus
pyogenes (sensíveis à penicilina G)
Os resultados servem de base para

1. Nortear a escolha do agente antimicrobiano mais
   adequado
2. Predizer a chance de sucesso de um esquema
   terapêutico.

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O diagnóstico laboratorial das doenças
infecciosas começa com a indicação clínica
adequada do exame microbiológico, o que requer
conhecimento da epidemiologia e da fisiopatologia
do processo infeccioso
Cultura Antibiograma
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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Rede Brasileira de Monitoramento da Resistência
Microbiana (ANVISA)
Laboratórios brasileiros
CLSI
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Tipos de Teste
1. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar
2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).

1. Diluição em tubo ou em placa
2. Teste E (Teste epsilométrico).

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1. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Princípio medida do halo de inibição (mm)
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1. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
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2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
CIM

• Diluição em tubo

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
11 12
0,0625µg/mL -1024,0 µg/mL
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2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).

• Diluição em placa

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0,0 µg/mL
0,0625 µg/mL
0,125µg/mL
?
0,25µg/mL
0,5µg/mL
1,0µg/mL
2,0µg/mL
4,0µg/mL
8,0µg/mL
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2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
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2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
Vários estudos demonstram que a CIM determinada
pelo Etest apresenta concordância com os métodos
de diluição em ágar ou tubo, para dierentes
antimicrobianos, em geral, com uma variação
permitida de /- 1 diluição.
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2. Quantitativo determinação da concentração
inibitória mínima (CIM).
B. Teste E (Teste epsilométrico).
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DEMONSTRAÇÃOE INTERPRETAÇÃO
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2. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Halo de leitura em mm

• Ausência de halo resistência
• Presença de halo sensibilidade ou resistência

Leitura
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2. Qualitativo método de difusão de discos em
ágar (Kirby-Bauer)
Medir os halos de cada placa distribuída
Anotar os resultados
Consultar o CLSI
Resultado

• Sensível
• Resistente
• Resistência Intermediária

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Correlação entre tamanho do halo e CIM
Quando os halos de inibição são correlacionados
aos valores logarítmicos da CIM, pela análise de
regressão linear, encontra-se uma relação linear
consistente demonstrando que o halo de inibição é
inversamente proporcional à CIM daquele
antimicrobiano
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Do ponto de vista clínico, o que significa dizer
que uma bactéria é sensível, resistente, ou
apresenta resistência intermediária?

• Resistente significa que a bactéria não é
  inibida pelas concentrações de antimicrobiano
  alcançadas pelas doses habituais e há grande
  chance de falha terapêutica a bactéria cresce
  na concentração sérica máxima do antimcrobiano
  no paciente

• Resistência intermediária isolados cujas CIMs
  são próximas à concentração sérica máxima obtida
  por aquele antimicrobiano

• Sensível a categoria sensível implica que a
  infecção causada pela bactéria isolada pode ser
  adequadamente tratada com a dosagem recomendada
  para aquele tipo de infecção e para aquela
  espécie bacteriana, portanto o antimicrobiano
  pode ser utilizado para o tratamento

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Os resultados dos TSA devem ser muito bem
interpretados pela equipe do laboratório de
microbiologia, antes que o relatório final seja
emitido ao médico.
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Fatores que influenciam o resultado do TSA

• 1. Composição química do meio de cultura ágar
  Muller-Hinton, com 4 a 6 mm de espessura
• 2. Densidade do inóculo 108 células/mL
• 3. Temperatura 35ºC a 37ºC
• 4. Concentração dos antimicrobianos nos discos
• 5. Validade e conservação dos discos
• 6. Ação e estabilidade da droga
• 7. Tempo de incubação 18 a 24h

6.1 . Algumas drogas podem sofrer hidrólise nas
primeiras horas de incubação
6.2 . Velocidade de crescimento maior que
velocidade de difusão da droga
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Antimicrobianos de espectro estreito x
Antimicrobianos de amplo espectro
Antimicrobianos de escolha x Antimicrobianos
de reserva
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Triste Realidade
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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Obrigado