DEFICIENCIA DE ALFA-1-ANTITRIPSINA

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DEFICIENCIA DE ALFA-1-ANTITRIPSINA

• UN MODELO DE ENFERMEDAD CONFORMACIONAL
• Maria Eugenia Ibañez
• Hospital Italiano de Buenos Aires
• Laboratorio Central

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Las serpinas-inhibidores de proteasas

• Muchos procesos biológicos requieren de un
  balance entre PROTEASAS que inician procesos
  proteolíticos esenciales para la vida y sus
  INHIBIDORES que limitan la actividad excesiva de
  estas proteasas.
• La FAMILIA DE INHIBIDORES DE PROTEASAS SERPINAS
  parecen controlar pasos claves intra y
  extracelulares.

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Las serpinas-inhibidores de proteasas
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Las serpinas-inhibidores de proteasas
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Alfa-1-antitripsina

• FUNCION
• La alfa-1-antitripsina es el inhibidor de
  proteasas mas abundante del suero humano
• Inhibe la elastasa leucocitaria (NE)(degrada la
  elastasa de las paredes alveolares)
• También inhibe otras proteasas como la tripsina,
  quimotripsina y trombina

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Alfa-1-antitripsina

• FISIOLOGIA
• Vida media 6-7 días
• Síntesis
• Hígado(99).Monocitos,macrófagos alveolares,
  cel.epiteliales parenquimales(acción local)
• Control de síntesis
• Aumenta en fase aguda (Il6,Endotoxinas C5a,
  Anafilotoxinas) y por estrógenos. No lo son Il1 y
  FNT (derivados de la estimulación monocíta).

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Alfa-1-antitripsina

• Características físicas
• Peso molecular 51 kDA
• Nº de cadenas polipeptídicas 1
• Nº de aminoácidos 394
• Contenido de carbohidratos 13
• Punto isoeléctrico 4.42-4.67

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Alfa-1-antitripsina

• GENETICA
• Localización cromosómica 14q 31-32
• Modo de transmisión alelos codominantes
  Variantes genéticas de 90
• Fenotipo más común Pi MM
• --------------------------------------------------
  ------------
• Fenotipos con concentraciones plasmáticas lt 40
• Pi Z, Pi SZ, Pi S, Pi null

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Alfa-1-antitripsina
ALELO CARACTERISTICAS
IPM 80 Poblacion Determina el Fenotipo Normal
IPS Tiene mayor frecuencia en España y Portugal.Resulta de la mutacion Glu 342 Lys que determina una disminucion de la concentracion de AAT lt 60
IPZ Mayor frecuencia en Suecia. Resulta de una mutacion Glu 264 Val que determina una disminucion de la concentracion de AAT lt al 15
IPSijama, IPMmalton Es el resultado de mutaciones que afectan el eje o bisagra de del bucle movil que contine al sitio reactivo.
IPNull Es el resultado de mutaciones que codifican para proteinas aberrantes o terminaciones prematuras que no codifican proteinas completas.
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Modo de transmisión
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Fenotipos de alfa 1 antitripsina
Normal (MM) No tiene el trastorno y no es portador de genes alterados.
Portador (MZ) Deficiencia de AAT leve o moderada es portador de un gen alterado y podria desarrollar sintomas de enfermedad.
Portador (MS) Deficiencia de AAT leve es portador de un gen alterado no esta claro si existe riedgo de desarrollar sintomas de enfermedad.
Deficiencia (ZZ) (ZS) Deficiencia de AAT moderada o severa es portador de dos genes alterados
Deficiencia (SS) Deficiencia leve a moderada de AAT es portador de dos genes alterados no esta claro si puede desarrollar sintomas de enfermedad.
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Alfa-1-antitripsina

• CARACTERISTICAS DE
  LABORATORIO
• Principal componente de la alfa 1 globulina en
  SPE
• La cuantificación se realiza por IDR,
  nefelometría, turbidimetría o electroinmunoensayo
• TODAS LAS MUESTRAS MENORES DE 70 MG/DL
  DEBERIAN SER TESTEADAS POR IEF PARA DETERMINAR SU
  FENOTIPO

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Alfa-1-antitripsina

• ISOELECTROENFOQUE
• El IEF es una técnica electroforética especial
  por la cual proteínas son separadas de acuerdo a
  su pI en un gradiente estable y continuo de pH.
  Es así como proteínas que difieren en solo 0.02
  unidades de pH en sus pI pueden ser
  excelentemente separadas.

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Alfa-1-antitripsina

• ASOCIASIONES CLINICAS
• El signo clínico más común de la deficiencia de
  a1antitripsina es la enfermedad pulmonar
  obstructiva crónica, la cual está marcadamente
  acelerada en fumadores.
• Hay una fuerte asociación entre deficiencia,
  cirrosis y cáncer primario hepático.

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Alfa-1-antitripsina

• ASOCIASIONES CLINICAS
• La enfermedad hepática es el primer signo clínico
  en niños.
• Es la principal causa genética de transplante
  hepático en niños.
• La presentación de la enfermedad varía
  dependiendo de la edad,velocidad de progresión y
  estado cuando se diagnostica

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Alfa-1-antitripsina

• ASOCIASIONES CLINICAS
• La enfermedad hepática ocurre en el 10-20 de
  todos los neonatos con deficiencia homocigota,
  pero la mayoría(70) tienen pruebas hepáticas
  alteradas.
• El principal signo de anormalidad hepática es el
  síndrome de hepatitis neonatal.
• Los signos de colestasis comienzan entre 4 días y
  2 meses después del nacimiento y pueden persistir
  hasta los 8 meses.

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Alfa-1-antitripsina

• ASOCIASIONES CLINICAS
• La regresión clínica espontánea es común, aunque
  las anormalidades bioquímicas persistan.
• Una minoría de los niños homocigotas(3), que
  representan solo el 30 de los que presentan
  colestasis al nacer, progresan a cirrosis y falla
  hepática.

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Alfa-1-antitripsina

• Evolución de la enfermedad hepática en niños y
  adolescentes
• Se estudiaron 200.000 neonatos
• 127 presentaron el fenotipo Pi ZZ
• 14 Colestasis (9 severas)
• 8 Enf.hepática leve
• 52 Alteración discreta de ALT
• El seguimiento se realizó a los 12 y 18 años
• El 80 de los niños no presentaron signos de
  enf.hepática.
• Sverge-Erikson-Hepato
  logy-1995.

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Alfa-1-antitripsina

• El marco de la deficiencia Z es la acumulación
  de alfa-1-antitripsina en el RE de los
  hepatocitos
• La polimerización de la proteína es un proceso
  dependiente de la concentración y
  temperatura.Además está marcadamente estimulada
  por la presencia de algunos ácidos biliares.

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(No Transcript)
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Alfa-1-antitripsina

• Diagnóstico de la deficiencia
• Debe ser considerado en
• Evaluación inicial de todo paciente con
  enf.obstructiva pulmonar
• En pacientes con enf.hepática sin historia previa
  de alcoholismo o hepatitis viral
• En niños con hepatitis neonatal, cirrosis juvenil
  o test de función hepática cronicamente
  alterados.

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Alfa-1-ANTITRIPSINA SERICA En Niños Con
Enfermedad HEPATICA CRONICA

• Sorroche P., Legal S., Duca P., Ousset C., Busoni
  V., DAgostino,D.
• Servicio De Gastroenterología- Hepatología-
  Centro de Transplante hepático- Dpto.de Pediatría
  y Laboratorio Central.
• Hospital Italiano De Buenos Aires

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Introducción

• La deficiencia de a-1-antitripsina es uno de los
  desórdenes genéticos mas comunes entre
  caucásicos, con una frecuencia de entre 1/2000 a
  1/7000 para el alelo PiZ.
• La enfermedad se caracteriza por concentraciones
  séricas muy bajas de la proteína (15 del
  normal).
• Su expresión clínica es diferente, desde el
  enfisema en adultos a la enfermedad progresiva
  hepática en la infancia. Estas entidades están
  asociadas a la deficiencia homocigota.
• Eriksson S.,J.Hepatology
  199930 34-39

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Introducción

• La enfermedad en la infancia tiene presentación
  variable dependiendo de la edad de comienzo y el
  estado del paciente al diagnóstico.
• Entre un 10-15 de los PiZZ desarrollan
  enfermedad hepática. De ellos un 5 requieren
  transplante dentro de los primeros 4 años de
  vida.
• El daño hepático se debe a una polimerización
  patológica de la variante Z de a-1-antitripsina
  antes de su secreción del hepatocito.(Enf.
  Conformacional).
• Francavilla,R.et al.J. of Hepatology
  200032986-992
  Carrel,R. N Engl J Med,200234645-53

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Objetivos

• Evaluar y correlacionar la concentración sérica
  de a-1-antitripsina con los distintos fenotipos y
  utilizar la concentración como una prueba para la
  función diagnóstica

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Materiales y métodos

• Se estudiaron 199 niños (0.2 a-18 a) que
  consultaron por diferentes hepatopatías o eran
  familiares directos de enfermos PiZZ.
• El dosaje de a-1-antitrpsina se realizó por
  nefelometría (Array 360 System,Beckman Inst.).

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Materiales y métodos

• Los fenotipos se determinaron por IEF en
  agarosa(LKB, anfolito Sigma ph 4.2-4.9), seguido
  de inmunofijación con anticuerpos monoespecíficos
  anti alfa-1-antitripsina.
• Se correlacionó el dosaje de alfa-1-antitripsina
  con el fenotipo encontrado.Se estableció
  sensibilidad y especificidad

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Resultados IRelacion entre el dosaje de alfa 1
antitripsina y distintos fenotipos.

• FENOTIPO N Pobl. Dosaje de a-1-Antitrpsina
• 
  mg/dL SD
• MM 120 60.3 165 56.2
• MS 32 9.5 144 63.2
• MZ 25 12.6 109 28.8
• ZZ 19 16.1 36 8.6
  plt0.0001
• SS 2 1.0 82 10.5
• SZ 1 0.5 93 10.2

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Resultados II

• Estableciendo un límite de corte de 50 mg/dL, la
  sensibilidad para la detección de un Pi ZZ fue
  del 94.7 y la especificidad fue del 99.4.

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Resultados IIIEvolución clínica de 10 pacientes
con fenotipos ZZ

• 4 TxH (40) 6.3 a ( 3-10 a)
• 1 Falleció 3.5 a
• (en lista de espera)
• 5 Vivos 3.2 a (1.6-5 a)
• (en seguimiento sin indicación de Tx)
• TxH Transplante Hepático

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Calle Paciente Fenotipo A
Pretrasplante PiZZ B Padre PiMZ C Madre PiMZ D
Hermano PiMZ E Postrasplante PiM1
A
B
C
D
E
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Conclusiones

• En niños con enfermedad hepática crónica, el
  dosaje de a-1-AT adquiere valor diagnóstico.
• Un nivel sérico de alfa-1-antitripsina inferior a
  50 mg/dL indica deficiencia Pi ZZ.