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INSTITUTO DE HEMATOLOGÍA E INMUNOLOGÍA
DIAGNOSTICO INMUNOLOGICO DE LAS LEUCEMIAS
LINFOIDES CRONICAS
Autora Dra. Miriam de la Caridad Sánchez Segura
Coautores Dra. Vianed Marsán Suárez Lic.
Bertha B. Socarrás Ferrer Lic. Mercedes
Martínez machado Lic. René A. Rivero
Jiménez Dr. Porfirio Hernández Ramírez Dr.
Juan Manuel González González Dra. Consuelo
Macías Abraham
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MATERIAL Y MÉTODO
Total de pacientes estudiados con LLC 61
Edad promedio 59,6 años Rango de edad de 25 a
84 años Se aplicó para el inmunofenotipaje
celular el ultramicrométodo inmunocitoquímico
(UMICIQ) y una batería mínima de anticuerpos
monoclonales (AcMo) dirigidos contra antígenos
(Ags) linfoides y mieloides.
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BATERÍA MÍNIMA DE ANTICUERPOS MONOCLONALES
(AcMo) UTILIZADOS EN EL INMUNOFENOTIPAJE DE
CÉLULAS
AcMo Linaje de la célula que
identifica   Anti- CD2 (OKT11) Células T
Anti- CD 3(OKT3) Células T Anti- CD4(OKT4)
Células T Anti-CD5 (Cris 1 ) Células
T Anti- CD8 (OKT8) Células T Anti- CD19( B4)
Células B Anti- CD 20 (B1) Células
B Anti-CD21 (OKB7) Células B Anti-CD22 (Leu
14) Células B Anti- IgS Células B Anti-
cadena ? Células B Anti-cadena
? Células B Anti- HLA- DR Otros
Anti- CD11b (OKM1) Células mieloides Anti-
CD11c Células mieloides
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DIAGRAMA DE FLUJO DEL UMICIQ

• Aislamiento de células mononucleares.
• Ajuste a 4 x 10 6 células / ml y aplicar
• sobre láminas recubiertas con poli-L-Lisina.
• ?
• Fijación en vapores de formaldehído
• ?
•  Incubación con AcMo. Primera capa
• (21 determinaciones por lámina)
• ?
• Tinción con Cloronaftol
• (permite distinguir las células mieloides de las
  linfoides)
• ?
• Utilización del detergente Brij 56
• (cuando se trata de antígenos intracitoplasmáticos
  y de nucleo)
• ?
• Incubación con AcMo. Segunda capa para los
  antígenos de membrana
• y primera capa para los intracitoplasmáticos y de
  nucleo.
• ?
•  Aplicación de Ac conjugado con la enzima
  peroxidasa

Lavado con PBS
Lavado con PBS
Lavado con PBS
Lavado con PBS
Lavado con PBS
Lavado con PBS
Lavado con PBS
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FRECUENCIA RELATIVA DE SUBTIPOS DE LEUCEMIA
LINFOIDE CRÓNICA
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EXPRESIÓN ANTIGÉNICA MÁS FRECUENTE EN PACIENTES
CON LLC-T

7
EXPRESIÓN ANTIGÉNICA MÁS FRECUENTE EN PACIENTES
CON LLC-B

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CONCLUSIONES

• La frecuencia de la LLC durante un período de 9
  años en nuestra institución, así como el
  comportamiento fenotípico de la misma, es similar
  a la reportada por otros autores.
• El método de inmunofenotipaje aplicado en este
  trabajo resultó confiable para la caracterización
  inmunológica de los pacientes con LLC.
• Hubo prevalencia del sexo femenino entre los
  pacientes con LLC, lo que difiere de lo
  encontrado por otros autores.
• En relación con la frecuencia relativa de los
  subtipos de LLC hubo un mayor número de LLC-T de
  lo comunicado para esta entidad.

RECOMENDACIONES

• Generalizar la caracterización inmunológica, con
  el uso de este método, en otros centros de
  atención al paciente con LLC del país.