Nested PCR

1
Nested PCR
2
Nested PCR to metoda, w której stosuje sie dwie
pary starterów - zewnetrzne i wewnetrzne. Reakcja
amplifikacji odbywa sie w dwóch
etapach. Produkty powstale w fazie pierwszej
(preegzystujace produkty amplifikacji ), staja
sie nastepnie matryca dla wewnetrznej pary
primerów.
3
SCHEMAT METODY Wyizolowanie DNA Pierwsza
amplifikacja z zastosowaniem pierwszej pary
primerów (polozonych bardziej zewnetrznie) - ok.
40 cykli Druga amplifikacja z zastosowaniem
drugiej (polozonej bardziej wewnetrznie
internal primers ) pary primerów 15- 20 cykli
4
(No Transcript)
5
Zalety metody Nested PCR Mniejsza mozliwosc
amplifikacji niepozadanych
sekwencji Podwyzszona specyficznosc
Podwyzszona czulosc