UTILIZACIN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

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UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA
UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

• Métodos y Técnicas de Estudio en Biología Celular

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UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA
UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

• Inmunoblotting (western blot), Dot/slot blot
• Inmunocitoquímica
• Inmunofluorescencia
• Inmunoprecipitación
• ELISA/EIA/RIA
• Cromatografía de inmunoafinidad
• Microscopia electrónica (morfología)

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Estructura de los anticuerpos
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Tipos de Anticuerpos
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Selección clonal Delección
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Selección clonal expansión
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Conceptos
Conceptos

• Inmunógeno, antígeno.
• Carrier BSA, KLH.
• Unión covalente (cross-linking) MBS,
  glutaraldehido, DSS.
• Péptidos inmunogénicos
• Proteínas nativas y desnaruralizadas.
• Otras moléculas
• Adjuvante de Freund completo e incompleto.
• Primera inmunización y recuerdos.

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Anticuerpos policlonales

• Inmunización del conejo
• Recuerdos
• Extracción de sangre
• Preparación del suero
• Purificación del anticuerpo (métodos opcionales)
• Caracterización del antisuero

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Anticuerpos policlonales
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Anticuerpos monoclonales

• Inmunización del ratón
• Extracción del bazo
• Preparación de hibridomas (mielomaB)
• Selección de los clones
• Producción y uso de anticuerpos

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Elección del tipo de anticuerpo
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Marcaje de Anticuerpos
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Marcaje de Anticuerpos para uso en Células
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Immunoblotting (western blot)
Immunoblotting (western blot)
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Inmunocitoquímica
Las flechas indican la presencia de neuronas con
hormona liberadora de la hormona del crecimiento
en el Núcleo Arcuato (cerebro) de rata de 4 meses.
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Inmunocitoquímica
Localización de la calbinding (calbindina) en
cerebelo de rata
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Microscopia (confocal e inmunofluorescencia)
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Inmunoprecipitación
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Inmunoprecipitación
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ELISA
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ELISA
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Cromatografía de inmunoafinidad
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Oro Coloidal
Internalización de transferrina marcada con oro
coloidal (6,6 nm) en células endoteliales. La
barra corresponde a 0,25 mM.
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Oro Coloidal
Internalización de transferrina marcada con oro
coloidal (6,6 nm). G aparato de Golgi Lu lumen
vascularLa barra corresponde a 0,25 mM.