Praktikum - mikrobiologie

1
Praktikum - mikrobiologie
2
Úkol c.1 Pozorování kvasinek v tekutém živném
roztoku

• Materiál cerstvé droždí(kvasnice), cukr,
  Lugoluv roztok
• Pomucky potreby pro mikroskopování, kádinka,
  podložní a krycí sklícka,která musí být vždy
  rádne omytá a odmaštená, bunicitá vata, kapátko
• Postup práce Do kádinky nalijeme asi 50ml vlažné
  vody a pridáme cajovou lžicku cukru a nadrobíme
  malé množství kvasnic. Vše zamícháme a necháme
  stát pri pokojové teplote asi 15 min. po této
  dobe odebereme vzorek suspenze kapátkem,
  preneseme jej na podložní sklícko, prikryjeme
  krycím sklíckem a pozorujeme preparát objektivy o
  postupne zvyšujeme zvetšení 20x, 40x prípadne 60x.

3
Definice mikroorganismu

• Mikroorganismy jsou velká a rozruznená skupina
  organismu žijících samostatne jako jednotlivé
  bunky nebo shluky nediferencovaných bunek.

4
Mouchy se líhnou pouze z much(Larvy much
nevznikají z masa)
5
Nicolas Appert (1810) objev konzervace potravin
na základe Spallanzaniho poznatku
6
Systém-3 základní nadríše

• Archaebakterie
• Eubakterie
• bakterie
• sinice
• Eukaryota
• houby plísne a kvasinky
• rostliny
• živocichové

7
Archaebakterie

• extrémní podmínky
• napr. horké sirné prameny, solná jezera,
• nejsou patogenní

8
Eubakterie

• pravé bakterie
• sinice

9
Živné pudy

• studium mikroorganismu celé populace
• mnohé bakterie auxotrofní organismy
• agar z ruduchy u JV pobreží Asie a J Kalifornie
• (paní Hessová, Koch)
• tuhne pri teplote 45
• Šikmé agary živné roztoky na
  Petriho miskách

10
Bakterie rostou v médiu o vhodném složení
11
Požadavky na médium ideální médium nejlépe
vyhovující danému kmeni bakterie

• Médium Prvky, živiny

Zdroj energie Zdroj uhlíku Zdroj
biogenních prvku Voda Rustové faktory
12
Typy médií

• Minimální - chemicky definovaná (bez biologických
  extraktu)
• Minerální - minimální médium, pouze z
  anorganických komponent a organického zdroje
  uhlíku nebo bez nej (CO2)
• Komplexní - médium obsahující chemicky presne
  nedefinovaný extrakt z biologických materiálu
• (napr. silný hovezí vývar pro bakterie)

13
Ruzné typy ockování na Petriho misky
14
Metoda mikrobiologie
Aseptická práce Cisté kultury Sterilizace
15
Izolace redení cisté kultury na misce
Schéma izolace cisté kultury
16
Voda z bazénu
17
Aerobní, anaerobní, fakultativní, mikroaerofilní,
aerotolerantní organismy
18
Rust bakteriální bunky
19
Nestejnomerné delení bakteriálních bunek
20
Doba zdvojení organismu (hod)
21
Velikost bunek prokaryot a eukaryot

22
Tvary bakteriálních bunek
23
Tvary bunek ve svetelném mikroskopu
24
Tvary bakteriálních koloní
25
Další delení bakterií G a G-(podle typu
bunecné steny)
Grampozitivní bakteriie

• kolem cytoplazmatické membrány mají jednobunecnou
  stenu z peptidoglykanu
• Gramovo barvení modrofialová barva
• Gramnegativní bakterie
• nad peptidoglykanovou bunecnou stenou mají další
  membránovou strukturu
• Gramovo barvení cervená barva

26
Diferenciální Gramovo barveníG(modré) a G-
bunky (ružové) pro srovnání v jednom preparátu
27
Grampozitivní bakterie
28
Gramnegativní bakterie
29
Cetnost bakterií v ruzných prostredích
30

• Hodnocení Kvasinková bunka je snadno
  pozorovatelná pod mikroskopem. Pri dostatecném
  zvetšení uvidíme jednotlivé bunky kulovitého nebo
  oválného tvaru i jejich shluky. Pokud je droždí
  cerstvé mužeme pozorovat i delení bunek pucením
• Další pozorováníU kvasinek mužeme pozorovat
  struktury uvnitr bunky glykogen- zásobní
  polysacharid, který nám poslouží k urcení
  fyziologického stavu bunky. Preparát si
  pripravíme tak, že na mírne zaschlou suspenzi
  kvasinek na podložním skle kápneme primerené
  množství Lugolova roztoku, prikryjeme krycím
  sklíckem a pozorujeme. V jednotlivých kvasinkách
  uvidíme zretelne odlišené cervenohnedé cásti
  obsahující glykogen a prítomné bílkoviny budou
  zbarveny žlute. Kvasinky v dobrém fyziologickém
  stavu-tedy mladé bunky obsahují více bílkovin-
  uvidíme je tedy žlute. Starší kvasinky mají
  naopak více glykogenu a proto jsou uvnitr
  hnedocervené

31
Kvasinky saccharomyces cerevisae
32
Tvary kolonií kvasinek
33
Úkol c.2. Pozorování bakterií trvalé preparáty

• Pomucky mikroskop, pomucky k mikroskopovaní, TP
• Postup práce Pod mikroskopem pozorujte ruzné
  tvary bakterií a zakreslete do sešitu.
• Dále pozorujte G a G- bakterie.