Travaux pratiques de mycologie

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Travaux pratiques de mycologie

• Veronica RODRIGUEZ-NAVA Aymeric MENARD
  Frédéric LAURENT
• Patrick BOIRON
• Laboratoire de Mycologie
• Faculté de Pharmacie, Lyon, France

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Aflatoxicoses
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Aflatoxicoses

• Aflatoxine B1
• Un des cancérigènes du foie les plus puissants

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Aflatoxicoses

• Aflatoxine M1
• Métabolite hydroxylé de B1
• Sélimine principalement dans le lait
• Toxicité voisine de celle de B1
• Très difficile de décontaminer un lait sans lui
  ôter une partie de sa valeur nutritive

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Aflatoxicoses

• Chez lanimal
• Intoxication aiguë
• Dégénérescence hépatique, hémorragies
• Fonction de lespèce canard, dinde, porc, bovin

• Intoxication chronique
• cirrhose et cancer
• hépatique à temps de
• latence long (rat 1 an
• singe 5 10 ans)

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Aflatoxicoses

• Extrapolation à lhomme très difficile
• Difficulté dévaluer la part qui revient aux
  aflatoxines

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Effets hépatiques tumoraux
Le cancer primitif du foie

• Carcinome hépatocellulaire
• Tumeur épithéliale maligne
• Souvent associé à une cirrhose
• Pronostic très sombre
• Présent dans les régions tropicales et
  sub-tropicales (Chine, Afrique Noire
  sub-saharienne)
• Diagnostic par la recherche de marqueurs tumoraux
  alfa-fto-protéine

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Effets hépatiques non tumoraux
Aflatoxines et kwashiorkor ?

• Découvert en 1933
• Résulte dun régime carencé en protéines mais
  contenant une quantité correcte en calories
• Apparaît à la période de sevrage du nouveau-né
  suite à un régime très riche en féculent
• Traitement supplémentation en protéine

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Effets hépatiques non tumoraux
Le kwashiorkor
Normal Kwashiorkor
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Effets hépatiques non tumoraux
Aflatoxines et marasme ?

• Touche les enfants des zones tropicales et
  sub-tropicales
• Carence en calories et en protéines
• Arrêt de la croissance entre le 6ème et le 24ème
  mois de naissance
• Fonte musculaire
• Pertes des réserves graisseuses
• Foie non palpable

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Effets hépatiquesnon tumoraux

• Aflatoxines et syndrome de Reye ?
• Encéphalopathie rare, aiguë, souvent mortelle
• Touche les enfants de tous les âges
• Fait suite à linfection par Haemophilus
  influenzae B le plus souvent
• Se manifeste par troubles de la conscience,
  vomissement, délire, irritation,
• Autres hypoglycémie, dème cérébral,
  dégénérescence graisseuse du foie et des reins,
• Evolution variable de quelques heures à quelques
  jours

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Effets hépatiques non tumoraux

• Autres
• Cirrhose
• Hépatite fulminante

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Effets non hépatiques

• Effets sur
• Le système respiratoire
• Le système rénal
• Le système gastro-intestinal
• Le système nerveux
• Le système reproducteur
• Le système immunitaire

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Ochratoxicose
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Propriétés physico-chimiques

• Ochratoxine A
• Métabolites moins toxiques
• Ochratoxines B et C
• 4-hydroxy-ochratoxine A et B
• 10-hydroxy-ochratoxine A
• Ochratoxines a et ß

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Toxicité de lochratoxine A

• Organe cible le rein ? néphrotoxicité
• Néphrotoxique chez tous les animaux testés, sauf
  les ruminants adultes
• Toxine incriminée a posteriori dans lorigine de
  certaines néphropathies animales et humaines
• Néphropathie porcine au Danemark
• Néphropathie endémiques des Balkans (NEB)
  maladie humaine chronique avec dégénérescence des
  tubules proximaux (1950) évolution lente,
  parfois mortelle
• Maladie des populations balkaniques 20.000 cas
  observés (OMS, 1982) étiologie inconnue mais
  les similitudes pathologiques ont fait suspecter
  une même origine fongique

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Toxicité de lochratoxine A

• Néphropathie endémique des Balkans (BEN)
• Néphrotoxicité
• Céphalée fréquentes
• Douleurs lombaires
• Asthénie
• Anémie et amaigrissement
• Polyurie polydipsie langue rouge et goût
  amer
• Métabolisme long ? évolution lente et parfois
  asymptomatique ? atrophie rénale sévère

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Toxicité de lochratoxine A

• Immunotoxicité (lymphocytes T et B) et
  myelotoxicité (cellules NK) ? suppression de la
  réponse immunitaire lymphopénie
• Tératogénicité ? anomalies morphologiques
• Génotoxicité et mutagénicité (animal , homme
  ?) ? modification de la réparation de lADN ?
  cancérogène
• Neurotoxicité

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Quelques aliments pouvant contenir de
lochratoxine A
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Lochratoxine A dans lalimentation quotidienne

• Café
• Vin
• Céréales pain, bière

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Lochratoxine A dans le café

• Espèces fongiques responsables
• Aspergillus carbonarius
• Aspergillus ochraceus
• 4 étapes à risques
• Maturation
• Traitement
• Stockage
• Transport

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Consommation de café

• Lochratoxine est très soluble dans leau
• Dose journalière admissible 14 ng / kg de poids
  corporel / jour
• En moyenne 5 tasses / jour
• Adulte de 70 kg 0,4 ng / kg de poids corporel /
  jour
• Café source insignifiante dochratoxine A

Normes 3 µg / kg de café
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Lochratoxine A dans le vin

• Espèces fongiques responsables
• Aspergillus carbonarius
• Aspergillus niger
• Facteurs
• Climat et situation géographique
• Cépages
• Pesticides
• Traitement de moûts

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Consommation de vin

• Consommation modérée 150 ml / jour
• Adulte de 70 kg 0,27 ng / kg de poids corporel
  / jour
• Vin faible contribution à lingestion totale
  dochratoxine A
• Danger consommation de plusieurs litres de vin
  par jour

Normes 2 µg / litre de vin
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Lochratoxine A dans les céréales

• Normes
• 5 µg / kg dans les céréales brutes
• 3 µg / kg dans les produits céréaliers
  transformés

• France 1er exportateur de lUnion Européenne
• Source principale dochratoxine A
• Penicillium verrucosum apparaît après la récolte
  ? contamination par ochratoxine A difficilement
  contrôlable

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Lochratoxine A dans le pain

• Lochratoxine A se concentre dans les sons
• La farine blanche est moins contaminée que la
  farine complète
• Panification ? faible
  de la concentration
  dochratoxine A

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Lochratoxine A dans la bière

• Maltage sans influence ? malt contaminé
• Brassage ? de 20 lochratoxine A du malt
• Fermentation ? de 50 lochratoxine A du moût
• ? 30 à 40 de lochratoxine A du malt retrouvés
  dans la bière
• Consommation modérée 0,5 litre / jour
• Adulte de 60 kg 0,165 ng / kg de poids corporel
  / jour
• Pas de risques sérieux pour la santé

Normes 0,02 µg / litre de bière
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Conclusion

• Lochratoxine A fait partie intégrante de notre
  alimentation
• Les facteurs influençant la production
  dochratoxine A sont difficiles à contrôler
• La mise en place de pratiques agricoles nest pas
  possible dans tous les pays
• Ladoption de normes au sein de lUE est
  compliquée par des habitudes alimentaires
  différentes
• La mise en place de normes nest pas sans impact
  économique

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Conclusion

• Quantité dochratoxine A dans une alimentation
  quotidienne ?

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Pénicilliotoxicoses
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Pénicilliotoxicoses

• Substances responsables
• Islandicine et lutéoskyrine
• Penicillium islandicum, P. brunneum, P. citrinum
• Substrat riz (blé ?)
• En relation avec lésions hépatiques, cancer
  primitif du foie
• Rubratoxine
• Penicillium rubrum, P. purpurogenum
• Substrat céréales
• En relation avec allergènes, asthmes et rhume des
  foins
• Citrinine
• Penicillium citrinum, Aspergillus terreus
• Patuline
• Penicillium expansum, Byssochlamys nivea et B.
  fulva, Aspergillus clavatus

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La patuline

• La patuline peut contaminer divers aliments
  fruits (pomme), légumes, céréales,
• Conséquences
• Modifications des caractères organoleptiques
• Dépréciation des valeurs nutritionnelles
• Risques pour le consommateur
• Répercussion économique

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Toxicité endocrinienne

• Modifications des taux des hormones thyroïdiennes
  et sexuelles
• Augmentation de la sécrétion de testostérone par
  hyperstimulation des cellules de Leydig
• Baisse du taux de T3
• Pas daction sur la TSH et la GH

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Toxicité immunologique (1)Action sur la réponse
cellulaire

• Baisse des lymphocytes T
• Diminution et suppression de lactivité oxydative
  des macrophages

Source Llewellyn et al. 1998
Source Escoula et al. 1988
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Toxicité immunologique (2)Action sur la réponse
humorale

• Diminution de la libération de nombreuses
  cytokines (IL 2, IL 4, IL 5, INF ?) à cause de
  la baisse des cellules productrices
• Discordances des résultats pour les
  immunoglobulines
• Certaines études ne trouvent pas de modifications
  significatives
• Dautres observent une baisse passagère des IgM,
  IgA et IgG

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Génotoxicité

• Modifications chromosomiques
• Anomalie du fuseau mitotique
• Altérations des chromatides
• Augmentation des translocations
• Interaction avec lADN
• Stoppe la réplication
• Provoque des cassures simples et doubles brins

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Effets cancérigènes

• Cest une mycotoxine difficile à classer
• Peu détudes réalisées chez lanimal
• Résultats contradictoires
• Pas détude possible chez lhomme et peu de
  données épidémiologiques
• Par conséquent, le CIRC ne peut pas se prononcer
  sur la carcinogénicité pour lhomme

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Etablissement de normes

• Le choix sest fait à partir
• Détudes toxicologiques
• Détudes épidémiologiques en fonction des classes
  dâge
• De critères techniques et économiques
• La limite est fixée à 50 µg / kg
• Cependant, certains pays veulent passer à 25 µg /
  kg pour protéger les jeunes enfants

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Conclusion

• Contaminant fréquent des produits à base de
  pommes
• Mycotoxine avec une toxicité certaine chez les
  animaux et supposée chez lhomme
• Diminution des contaminations en améliorant les
  conditions de stockage et de transformation
• Réduction de lexposition des consommateurs grâce
  à la mise en place de normes

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Conclusion

• Attention aux cidres et compotes
• Attention aux petits pots pour bébés

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Fusariotoxicoses
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Fusariotoxicoses

• Nivalénol (NIV) et fusarénones
• Sesquiterpènes très toxiques
• Fusarium nivale sur Graminées
• Altération des cellules du tissu hématopoïétique
  des os, de la rate et des ganglions lymphatiques
• Fumonisines
• Récemment découvertes
• Fusarium graminearum sur maïs
• Expérimentation en cours
• Trichothécènes
• Fusarium tricinctum sur millet, orge et blé, F.
  graminearum, Trichothecium roseum, etc.
• Toxine T-2, diacétoxyscirpénol (DAS),
  deoxynivalénol (DON), zéaralénone, etc.

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Fusariotoxicoses

• Toxine T2
• A lorigine de lAleucie toxique alimentaire
  (ATA) villages sibériens décimés (1932)
• Sévit actuellement dans lOural et lest sibérien
• Spécifique de la géographie et de la climatologie
  (céréales et grains moisis)
• Signes cliniques significatifs
• Gastro-entérite
• Stade leucopénique et manifestations nerveuses
• Stade hémorragique fragilisation des
  capillaires, gangrène du pharynx, mort par
  étouffement dans 30 des cas)
• Traitement symptomatique, mais effet
  immunodépresseur de la toxine

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Fusariotoxicoses

• Diacétoxyscirpénol (DAS)
• Désordres gastro-intestinaux
• Toxicose des grains moisis (porcs)
• Hautement toxique (vomissement, somnolence, mort)
• Guerre biologique ?

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Fusariotoxicoses

• Zéaralénone
• Effets oestrogènes
• Porc hypertrophie de la vulve, atrophie des
  ovaires et avortement fréquent
• Recherche en cours pour régulariser les troubles
  de la ménopause chez la femme