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EFECTO DE UN INMUNOMODULADOR SOBRE EL ENDOMETRIO DE YEGUAS SANAS Y RESISTENTES A ... Figura 1: momentos y grupos de YSR en los que se tomaron biopsias ... – PowerPoint PPT presentation

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1
PROYECTO PILOTO MODELO DE COOPERACION ENTRE
INVESTIGADORES Y PROFESORES DE CIENCIAS NATURALES
EFECTO DE UN INMUNOMODULADOR SOBRE EL ENDOMETRIO
DE YEGUAS SANAS Y RESISTENTES A ENDOMETRITIS.
J. Calles1, E. Fumuso2 1Becaria UNESCO 2Fac. de
Cs. Veterinarias U.N.C.P.B.A. Tandil-Argentina
Introducción
El uso de un extracto de pared celular de
Mycobacterium phlei aplicado a animales sometidos
al estímulo inflamatorio de la IA con semen
muerto redujo los niveles endometriales de
polimorfonuclerares en yeguas susceptibles a
endometritis a niveles comparables a los de
yeguas resistentes (YR) a endometritis (Fumuso et
al, 2003). Sin embargo no hay estudios previos
sobre el uso del inmunodulador en yeguas yasnas
sin ningún estímulo previo
 
Objetivo se evaluó el efecto de un
inmunomodulador (complejo de pared celular de
Mycobacterium phlei y DNA(MCC-V) administrado por
vía intrauterina, sobre el número leucocitos
polimorfonucleares (PMN) y mononucleares,
linfocitos y macrófagos (LM), en biopsias
endometriales de yeguas sanas y resistentes a
endometritis (YSR)
Materiales y Métodos
  • Yeguas Sanas y Resistentes a Endometritis (YSR,
    n16), inseminadas con semen muerto.
  • Selección de yeguas 48 hs post-inseminación
    (n7)
  • sin fluido intrauterino por ultrasonografía,
    con cultivo y citología exfoliativa negativa
  • y biopsia endometrial normal grado 1 (1).
  • Control del estro folículos mayores de 30 mm y
    edema uterino.
  • Las yeguas en estro fueron tratadas con un
    inmunomodulador (complejo de pared celular de
    Mycobacterium phlei y DNA, MCC-V, Bioniche Animal
    Health, Canadá).
  • Determinación de PMN cortes teñidos con
    Hematoxilina y Eosina en biopsias de endometrio,
    según los grupos de la figura 1
  • El número de células se obtuvo del promedio de
    12 campos con 1000 aumentos en el estrato
    compacto (EC) y en el estrato esponjoso (EE), de
    animales en estro (n7, grupo E) sin EPCM. Las
    yeguas en estro (n7), fueron tratadas con 1.500
    ug de MCC intrauterino (MCC-V, Bioniche Animal
    Health, Canadá y se tomaron biopsias 24 h
    pos-tratamiento (n7, grupo 24hPT), en peri
    ovulación (n7, grupo OvPT) y en diestro a los 6
    días pos-tratamiento (n7, grupo DPT). El número
    de células fue evaluado a doble ciego con un
    aumento de 100x y los resultados obtenidos (Fig
    2) se analizaron por ANVA, Imágenes 1, 2, 3 ,4,
    5 y 6).

Figura 1 momentos y grupos de YSR en los que se
tomaron biopsias de endometrio para el recuento
de PMN.
Grupos
Resultados
En la figura 2 se presentan los resultados
obtenidos
Imágenes 1, 2,
3, 4, 5, 6 Biopsias endometriales teñidas con
HE, con 100X-y su significancia estadística con
un plt0,05.
1
2
EL
EC
b
CM
e
g
3
4
d
f
PMN
d
c
d
c
f
c
a
a
a
f
c
5
6
Nº de células contadas en las biopsias de
endometrio de Yeguas Sanas y Resistentes a
endometritis (YSR), en el estrato compacto EC y
en el estrato esponjoso EE tomadas en estro (n7,
E) sin MCC-V, 24 h pos-tratamiento con MCC-V
(n7, 24hPT), en periovulación (n7, OvPT) y en
diestro a los 6 días pos-tratamiento (n7, DPT).
Para un mismo tipo celular y diferentes grupos,
letras diferentes difieren (plt0.05).
EC estrato compacto, EL epitelio luminal, EE
estrato esponjoso, PMN células
Polimorfonucleares, CM células mononucleares. 1
Estro EC sin tratamiento, 2 Estro EE sin
tratamiento, 3 EC, 24 h postratamiento, 4 EE,
24 h postratamiento, 5 EC, Ovulación
postratamiento,6 EE Ovulación postratamiento
Discusión y conclusiones
Estudios previos permitieron detectar que el MCC
actúa en el endometrio favoreciendo la producción
de citoquinas pro y antinflamatorias (Fumuso y
cols, 2003, 2006) que favorecen la remodelación
de tejidos y mejoran la condición uterina de
yeguas susceptibles a endometritis persistente
post-servicio. Sin embargo no se había probado en
yeguas sanas sin someterlas a ningún estímulo
inflamatorio. En este trabajo a las 24 hs pos
inmunomodulación se observa un incremento
significativo de PMN y LM en el EC. A nivel del
EE los LM también se incrementaron, no
detectándose diferencias entre el EC y el EE.
Ambos tipos celulares volvieron a la normalidad
pos ovulación y permanecieron bajos hasta el día
7 pos tratamiento. La presencia de linfocitos en
endometrio de la yegua ha sido descripta
previamente no difiriendo su presentación en
estro o diestro (Watson, 1993). Luego de la IA o
en casos de endometritis se ha visto incrementado
el número de PMN y linfocitos (Tuñon y cols,
2000, Watson, 1993). En este trabajo la respuesta
al MCC fue más importante en el EC que en el EE
probablemente por la administración intrauterina.
Así mismo la respuesta al MCC se mostró acotada
hasta la ovulación. Concluimos que el endometrio
de las YSR genera una respuesta al MCC con un
estímulo inflamatorio corto que podría favorecer
la remodelación celular y las condiciones
uterinas. Palabras clave yeguas, endometrio,
inmunomodulación
Bibliografía
Agradecimientos Hugo Ringelman y Mariana
Ciancaglini
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  • Fumuso E., et al. (2003). Veterinary Immunology
    and Immunopathology 96 31-41.
  • Watson ED, (1993) Equine Vet J. 25 120-4.
  • Tuñon A-M , Katila T, Magnusson U, NummijÃrvi A,
    Rodriguez-Martinez H. (2000) Theriogenology.1(6)
    835-41.
  • Kenney y Doig (1986) Kenney, R. and Doig, P.
    (1986). In Morrow, D. Current therapy in
    theriogenology. 2723-729 WB Saunders,
    Philadelphia.
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