Taxonom

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Taxonomía Fungal

• La clasificación fungal es nueva y ha cambiado
• Clasificación, según Bar (1988)
• División Eumycota
• Subdivisión Mastigomycota
• Clase Chytridiomycetes
• Orden Spizellomycetales
• Familia Neocallimasticaceae

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Género

• El género es distinguido por la morfología
• Thallus Monocéntrico y policéntrico.
• Rizoide Filamentos y bulbos.
• Zoosporas Uni- o Multiflageladas
• Todos los géneros rizoides tiene filamentos,
  excepto las especies caecomyces.
• (Trinci et al. 1994)

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Especies

• Son separadas por sus características
  morfológicas y estructurales.
• Las Piromonas y Sphaeromonas se asumía que eran
  protozoarios por lo que fueron cambiados a
• Piromyces y Caecomyces
• (Trinci et al. 1994)

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Fungis Policéntricos

• Neocallimastix joyonii (Breton et al. 1989)
  Orpinomyces joyonii (Trinci et al. 1994) debido
  asu patrón de crecimiento policéntrico
• Ruminomyces y Anaeromyces tienen características
  similares al monocéntrico

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Aislamiento y Enumeración

• Han sido aislados de bovinos, ovinos, caballos,
  canguros y elefantes
• En heces y tractos gastrointestinales y fluido
  ruminal
• Orpinomyces fue aislado en charcos y pasturas de
  las vacas
• La dieta animal tiene efectos sobre las
  poblaciones fungales
• (Trinci et al. 1994)

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• La biomasa fungal es difícil determinar
• La estimaciónmétodo gravimétrico con digestión
  enzimática con quitina
• El conteo (103 107 ml) no provee una adecuada
  estimación fungal
• Para el tamaño de las poblaciones fungales se han
  utilizado diluciones en agar y otra soluciones

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Condiciones para aislamiento

• Anaerobiosis
• pH de 6.5 a 6.7
• T de 39
• Materiales para aislamiento
• Bufer Carbonato/Fosfato
• Fluido ruminal
• Resazurina (indicador redox)
• Carbohidratos
• Antibióticos

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Almacenamiento

• T de 39 C
• Fibra en agar
• Nitrógeno líquido
• Dimetilsulfóxido
• Enfriamiento a 1.5C
• Glicerol

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Cultivos y Almacenamiento

• Mantenidos por transferencia frecuente ( 2 a 7
  días).
• Algunas especies 24 a 48 horas.
• Otros Intervalos semanales.
• Isolados monocéntricos 2 a 3 días.
• Isolados policéntricos semanalmente.
• Mantenimiento largo en tiempo 39 oC en fibra
  Sisal embebida en agar.
• En nitrógeno líquido con dimetilsulfoxido como
  crioprotector para fungi anaeróbico sirve
  también para largo tiempo.

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• Preservación 1.5 oC por minuto hasta -70 oC con
  glicerol como crioprotector.
• Resucitados a 39 oC.
• Restos de esporas fungi ruminales,
• Esporas anaeróbicas de heces.
• Inducidas in vitro, no germinadas in vitro (Wubah
  et al., 1991b).

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• proceso de manipulación de formación y
  germinación de esporas método de conservación.
• Fungi anaeróbicos no son listados en la ATCC
  (American Type Culture Collection) como Fungi
  filamentosos o Protistas.

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6. Protozoarios Ruminales6.1 Introducción

• Basados en el tamaño relativo
• Primeros microorganismos ser descubiertos
• Muy móviles y viables en el rúmen y retículo
• Inmóviles y aparentemente desintegrados en el
  omaso y abomaso.
• Los Protozoarios celulares no identificados en
  intestino delgado.
• Utilizados como alimento.

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• Explicación de Sobrevivencia
• Especificidad del hábitat, esencialidad para el
  huésped.
• Defaunación.
• Alta especialización al rúmen o hábitat.
• Actividades metabólicas (relación bacterias y
  fungi).

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• Protozoas Flagelados.
• Baja población
• Zoosporas Fúngicas (decrecimiento)
• Limitados
• Esquema de Clasificación ha cambiado algunas
  veces en 30 años.
• Terminología difícil
• Referencia a Holotrichs y Entodiniomorphs

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• Papeles en el rumen
• Clasificación de efectos
• Medio ambiente del rumen
• Componentes de la sangre
• Metabolismo y digestión en el rumen
• Sobre el animal
• Fermentación de carbohidratos solubles
• Holoctrichs como principal degradador
• Entodinromorphs
• Procurar incrementar la población de Holotrichs

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• Digestión de almidón
• Entodiniomorphs como principales degradadores
• Isotricha
• Uso como fuente de energía o síntesis
  intracelular de polisacáridos
• Principales productos

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Digestión de Carbohidratos Estructurales

• Actividad celulolítica (orden entodiniomorfos)
• Epidinium caudatum, Eudiplodium maggii,
  Ostrocadinium dilobum y varias Spp Entodinium
• Holotricha
• Enzimas que degradan hemicelulosa (10 géneros,
  entodiniomorfos, subfamilias Diplodiniinae y
  Ophryoscoliceneae.
• Baja actividad Orden holotricha

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• Monosacáridos, disacáridos y oligosacáridos
• Spp de protozoarios poseen la hidrolasa
  glicosidica
• Pectina es depolimerizada por los protozoarios
  (metanol, ac. Galacturónico o poligalactoranidos)

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Digestión de la Proteína

• Los entodiniomorfos digieren la caseína insoluble
• Son importante en la degradación de proteínas
  insolubles
• Sp isotricha (caseína soluble e insoluble)
• Mayor actividad proteolítica en el citoplasma

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Absorción y digestión de bacterias

• -Gutierrez 1955. Isotricha. No se desarrolla sin
  bacterias.
• -Probablemente bacterias proveen mayoría de N
  para crecimiento.
• -Inhabilidad para biosintetizar o interconvertir
  aminoácidos (E. caudatum.
• -Pérdida gradual de enzimas.
• -Compuestos preformados por crecimiento de
  bacterias
• -Protozoarios pueden absorber lt 1 de total
  bacterial / minuto concentrados.

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• Productos de digestión de bacterias
• Aminoácidos , 50 retenido
• VFA Amonia
• ? Amoniácidos bacterianos en el animal,
  ?digestibilidad de proteina protozoaria.
• Limitado pasaje ruminal.
• Relacionado con ? normal después de alimentación.

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Cambios en población de protozoarios

• Establecimiento de poblaciones
• Contacto directo en etapas jóvenes.
• Presencia en la boca de la madre
• Saliva en las plantas
• Aerosoles entre animales

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Variación en el horario Diferencias entre
entodiniomorfos y holotricos Alimentación 1 /
día, entodiniomorfos ? 5-6 horas / ?gradual 20 a
22 hrs. Holotrichs, pico momentos antes o
después de alimentación / ? Entodiniomorfos
Diluciones asociadas a alimentación. Y cambios en
crecimiento celular. Migraciones
celulares Paredes rumen, retículo y porción
ventral.
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OTROS FACTORES QUE AFECTAN LA CONCENTRACION DE
PROTOZOARIOS

• DIETA ? forraje concentrado
• 20 40 de concentrado maximiza la ?
  protozoarios?
• ? 60 ? entodinium
• El efecto del concentrado se puede disminuir
  controlando el consumo
• FRECUENCIA DE ALIMENTACION
• GEOGRAFICAS i.e. Polyplastron multivesiculatum
• VARIACION ANIMAL i.e. Ophryoscolecidae y
  Caloscolex

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(No Transcript)
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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(No Transcript)
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Clasificación de los ProtozoariosRuminales
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Identificación de Protozoos ruminales

• Como nombrar las partes de un protozoo.
• Parte bucal hacia delante se le marca a las 12
  hrs.
• La parte mas cercana al observador se le
  denomina superficie superior y la contraria se le
  denomina superficie inferior.