Diapositiva 1

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• SISTEMA GASCROMATOGRAFICO
• - Sorgente di gas di trasporto
• Iniettore
• Colonna capillare gascromatografica
• Rivelatore
• Registratore

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GAS DI TRASPORTO (FASE MOBILE DELLA COLONNA)
elio, azoto, idrogeno, argon. Caratteristiche
importanti - purezza,
- scarsa reattività,
- capacità di
separazione.
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SISTEMA DI INIEZIONE

• FUNZIONI
• Introduzione del campione
• Evaporazione del campione
• Ingresso del gas di trasporto
• Collegamento alla colonna

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COLONNA CAPILLARE

• - È il cuore del sistema gascromatografico,
  dove avviene la separazione
• delle sostanze
• - È un tubo aperto di vetro o di metallo con
  diametro interno di 0,1 0,5 mm e
• una lunghezza di decine di metri
• - È costituta da due fasi
• 1) una fase fissa depositata
  lungo le pareti interne della colonna
• 2) una fase mobile, ossia il
  gas di trasporto che attraversa la colonna.

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Il cromatogramma è un istogramma con i valori del
tempo di ritenzione sulle ascisse, e delle
abbondanze sulle ordinate.
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(No Transcript)
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Analisi gascromatografica
Cromatogramma
tempo di ritenzione
area del picco
Analisi qualitativa
Analisi quantitativa
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RETTA DI TARATURA
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Ogni picco del cromatogramma corrisponde a un
componente del campione iniettato, ed è
contraddistinto da un abbondanza relativa e da
uno specifico valore del tempo di ritenzione. Il
tempo di ritenzione di ogni molecola è un valore
relativo, che dipende dal tipo di fase
stazionaria, dalla lunghezza della colonna, dalla
pressione del gas e dalla temperatura del
forno. Utilizzando lo stesso sistema
gascromatografico nelle stesse condizioni di
analisi, il tempo di ritenzione rimane una
caratteristica costante e fondamentale per
lidentificazione di ogni molecola della
miscela.
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Lo spettrometro di massa
1) il sistema di entrata 2) la sorgente ionica,
il cuore dello spettrometro, in cui le molecole
neutre vengono trasformate in ioni e si
frammentano 3) lanalizzatore, in cui gli ioni
vengono separati in funzione del rapporto
massa/carica (m/z) 4) il rivelatore, in cui gli
ioni vengono raccolti ed i segnali inviati, dopo
amplificazione, al registratore che converte le
informazioni contenute nei segnali in uno spettro.
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SORGENTE IONICA
1) M e- M 2e-
M1
M3 2) M
M2 M4 , etc.

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Ogni molecola ha una frammentazione unica
e caratteristica che, come una vera e propria
impronta digitale, ci permette di identificare
e di risalire alla molecola madre.
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Analizzatore a quadrupolo
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RIVELATORE a moltiplicazione di elettroni
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Spettro di massa della 5,7-dimetossicumarina MW
206
OCH3
M 206 M - CH3 191 M - CH3CO 163 M -
CH3CO CH3 148 M - CH3CO CH3CO 120
OCH3
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Nelle analisi GC MS, sono alla fine disponibili
due dati sufficienti e fondamentali per
lidentificazione e la quantificazione di un
composto incognito
1) il tempo di ritenzione
2) lo spettro di massa
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Analisi GC-MS della 5,7-dimetossicumarina standard
OCH3
H3CO
M - CH3 191 M - CO 178 M - CH3CO 163 M
- CH3CO CH3 148 M - CH3CO CO 135 M -
CH3CO CH3CO 120
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FLAVONOIDI

• FUNZIONI
• colore dei frutti e dei fiori
• protezione UV
• fitoalessine
• fenomeni simbiontici
• deterrenti alimentari.

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• Campferolo
• Attività
• antiossidante
• antiprotozoica
• antivirale
• anticarcinogenica

• Quercetina
• Attività
• antiossidante
• anti-infiammatoria
• antiaggregante
• vasorilassante
• anticarcinogenica

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CUMARINE

• FUNZIONI
• antimicrobiche
• allelopatiche
• schermatura dagli UV
• deterrenti alimentari.

CUMARINA (1,2-BENZOPIRONE)
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7-idrossicumarina (Umbelliferone) Attività
chemoprevenzione del cancro
6,7-dimetossicumarina (Scoparone) Attività
antiossidante, vasorilassante, antiasmatico
Psoralene (furanocumarina lineare) Attività
cura di eczemi e psoriasi
Angelicina (furanocumarina angolare) Attività
antiinfiammatoria
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ALCALOIDI

• La prima medicina del genere umano
• Composti vegetali farmacologicamente attivi
  contenenti un atomo di azoto

• nicotinici (la nicotina, ha un effetto sia
  stimolane che deprimente sul sistema nervoso)
• benzilisochinolinici (morfina, codeina,
  papaverina, berberina, sanguinarina)
• indolici (vincristina, vinblastina, vincamina,
  stricnina, chinina, aimalicina)
• pirrolidinici (cocaina, atropina)
• pirrolizidinici e piperizidinici
• purinici (caffeina)
• curari (toxiferina).

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TERPENI
Metaboliti vegetali costruiti da unità ripetute
di molecole di isoprene C5
monoterpeni C10 responsabili del profumo di
numerose piante (il mentolo della
menta) sesquiterpeni C15 deterrenti alimentari
(il gossipolo) o molecole aromatiche (il
bisabololo della camomilla) diterpeni C20
fitoalessine (il casbene del ricino) e precursori
delle GIBBERELLINE triterpeni C30 deterrenti
alimentari (lazodiractina, che inibisce il senso
di fame e il lupeolo, precursore delle
SAPONINE) tetraterpeni C40 precursori di
licopene, carotenoidi e xantofille.
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Estrazione in metanolo

• polverizzazione delle foglie essiccate
• aggiunta di metanolo
• agitazione per 2 ore a temperatura ambiente
• centrifugazione a 4000 x g per 10 minuti
• altri due processi estrattivi del pellet
• filtrazione attraverso un sistema di vuoto
• concentrazione con un evaporatore rotante
• analisi al gascromatografo-spettrometro di massa
  (GC-MS).

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Microestrazione in fase solida (SPME)

• estrazione rapida senza solventi
• assorbimento e concentrazione degli analiti del
• campione sulla superficie della fibra
• desorbimento degli analiti nelliniettore del
• gascromatografo.

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Estrazioni SPME 1) diretta
2) spazio di testa (HS)
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I) assorbimento II) desorbimento al GC

• SPME dellestratto
• trasferimento del campione nella vial e
  salatura
• agitazione e riscaldamento del campione fino a
  50C
• acidificazione
• estrazione per un intervallo di tempo variabile
• desorbimento della fibra al gascromatografo.

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Identificazione della 5,7-dimetossicumarina
nellESTRATTO in METANOLO
OCH3
H3CO
5,7-dimetossicumarina
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(No Transcript)
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(No Transcript)