Slide sem t

1
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA
VETERINÁRIA DEPTO DE MEDICINA VETERINÁRIA
PREVENTIVA
BIOLOGIA MOLECULAR Agueda Castagna de
Vargas Eduardo Furtado Flores Elgion
Loreto Fernanda S.F.Vogel João Francisco C. de
Oliveira Sônia Bottom
2
Departamento de Medicina Veterinária
Preventiva MVP-824 - Biologia Molecular - Segundo
semestre de 2012 Sistemática aulas expositivas,
mini-seminários, aulas práticas/demonstrativas. Av
aliação prova (70) seminário (30) Quem
obtiver nota abaixo de B na prova - fará
exame. Seminário tema a ser designado na segunda
semana de aula (duração 20-30min) Horário sexta
feira 1330h um horário a combinar Bibliografia
Stryer (Bioquímica), Cell (Biologia Molecular da
Célula), Genes, Molecular Cell Biology
PROGRAMA PROGRAMA Professor
1 Introdução à Biologia Molecular EF
2 Estrutura e função do DNA EF
3 Estrutura e função do RNA EF
4 O código genético EF
5 Mecanismos genéticos fundamentais EF
5.1. Transcrição EF
5.2. Replicação EF
5.3. Recombinação/reparo e mutagênese SB
5.4 Regulação da expressão gênica SB
6 Análise e Manipulação de Ácidos Nucléicos SB
6.1 Análise e manipulação de DNA (géis de agarose, poliacrilamida, enzimas de restrição, REA) SB
6.2 Clonagem e expressão gênica (sistemas heterólogos, repórter genes, análise de expressão) AV
6.3 Southern/Northern blot (usos, tipos de sondas e de marcação) JF
6.4 PCR e suas variações JF
6.5 Sequenciamento/análise e comparação de sequencias EL
6.6 Outras técnicas (microarrays) JF
7 Proteínas FV
7.1 Aminoácidos, estrutura primária, secundária, terciária e quaternária FV
7.2 Tradução FV
7.3 Modificação pós-tradução, sorting, degradação FV
7.4 Análise de proteínas (gel de poliacrilamida, western blot, dot e slot blot) AV
7.4.1 Proteômica EL
8 Outras técnicas moleculares

3
O Dogma da Biologia Molecular
4
(No Transcript)
5

• DNA
• Estrutura e função
• Organização ou empacotamento
• Replicação
• Reparo
• Mutagênese
• Recombinação
• Transposição
• Análise e manipulação do DNA

6

• RNA
• Estrutura
• Tipos e funções
• Síntese (transcrição)
• Modificação (CAP, poliA, splicing)
• Transporte
• Tradução
• Degradação
• Análise e manipulação do RNA

7

• PROTEÍNAS
• Estrutura, composição e funções
• Síntese (tradução)
• Modificação (fosforilação, glicosilação)
• Sorting e transporte
• Degradação
• Análise e manipulação de proteínas

8
Noções de Biologia celular
9
A célula eucariota é altamente compartimentalizada
10
Membranas Celulares

• MEMBRANA PLASMÁTICA
• Define os limites celulares
• Mantém o gradiente químico extra-intracelular
• Transmite sinais para o interior celular
  (receptores)
• OUTRAS MEMBRANAS
• Mantêm a compartimentalização celular
• Mantêm as diferenças químicas entre as organelas
• Gradiente de íons servem p gerar energia
• Produção e transmissão de sinais

POSSUEM UMA ESTRUTURA COMUM
11
Estrutura das Membranas Celulares
12
Membranas Celulares

• Camada lipídica dupla (50) proteínas (50)
  
• Mantida por ligações não-covalentes
• Possuem uma estrutura dinâmica, fluída
• Camada lipídica BASE ESTRUTURAL
• Proteínas da membrana MEDIAM AS FUNÇÕES!

13
- Impermeáveis à maioria das moléculas
hidrossolúveis - Estrutura assimétrica interior
x exterior - Componente principal
FOSFOLIPÍDIOS - Possuem uma extremidade POLAR,
outra HIDROFÓBICA -Tbém COLESTEROL e
GLICOLIPIDIOS.
14
A camada lipídica
15
(No Transcript)
16
(No Transcript)
17
(No Transcript)
18
As Membranas são ASSIMÉTRICAS
19
As Membranas são fluídas
20
A MEMBRANA PLASMÁTICA
21
Proteínas de membrana
Ligadas a lipídios
Periféricas
Periféricas
22
(No Transcript)
23
(No Transcript)
24
(No Transcript)
25
Transporte de substâncias através da membrana
26
O Núcleo
27
(No Transcript)
28
(No Transcript)
29
(No Transcript)
30
(No Transcript)
31
(No Transcript)
32
Complexo Poro Nuclear (NPC)
33

• Nuclear Pore complex (NPC)
• 100-200/célula (yeast)
• milhares/célula (mamíferos)
• Estrutura muito grande (gt100.000kDa)
• Composto por 50-100 proteínas diferentes
• Permite passagem de pequenas moléculas (difusão
  passiva)
• Transporte ativo de grandes moléculas
• Mantém separação seletiva núcleo/citoplasma
• Importação de proteínas (NLS)
• Totalmente desintegrado/reconstruído na divisão
  celular

34
(No Transcript)
35
O retículo endoplasmático
36
(No Transcript)
37
RER síntese de proteínas Secretórias e de
membrana
SER síntese e modificação de lipídios e
carbohidratos
38
Aparelho de Golgi
39
Golgi processamento, modificação ,
empacotamento e distribuição de proteínas
40
(No Transcript)
41
Mitocôndrias
42
(No Transcript)
43
Ribossomos
44
(No Transcript)
45
(No Transcript)
46
(No Transcript)
47
CITOESQUELETO
48
(No Transcript)
49

• Funções
• Estrutural (forma, rigidez celular)
• Movimento celular (diapedese, migração
  tecidual)
• Fagocitose, endocitose, mov. Ciliar/vilosidades
• Organização/suporte das organelas
  intracelulares
• Transporte intracelular (vesículas, partículas)
• Separação dos cromossomos após replicação

50
Filamentos de actina Microtúbulos Fila
mentos intermediários
51
(No Transcript)
52
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA
VETERINÁRIA DEPTO DE MEDICINA VETERINÁRIA
PREVENTIVA
INTRODUÇÃO A BIOLOGIA MOLECULAR Agueda
Castagna de Vargas Eduardo Furtado Flores Elgion
Loreto Fernanda S.F.Vogel João Francisco C. de
Oliveira Sônia Bottom