Th1 - Th2 dans l

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Th1 - Th2 dans l allergie asthme

• Mise en évidence chez l atopique (homme)
• Dermatite atopique (biopsie cutanée)
• Bronches proximales (biopsie bronchique)
• Bronches distales (LBA)
• Rhinite allergique
• Muqueuse nasale (biopsie)
• ou produits de lavages nasaux
• è présence prédominante de lymphocytes T
  produisant l ARNm, soit IL4 ou IL5, ou
  élévation de cytokines dans les produits de
  lavage.
• Enfants atopiques défaut d INFg dans le sang
  cordal
• - Robinson, NEJM 1992- Brading, J Immunol 1996
• Chez l animal
• Inactivation IL4 è pas de réponse IgE
• Administration IL5 ou INFg?? hyperréactivité
  bronchique?? infiltration par les éosinophiles
• IL13 ? synthèse des IgE ? hyperréactivité
  bronchique ? infiltration par les éosinophiles/

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Analyse critique Th1 - Th2

• Augmentation du Th1 dans l asthme
• 1ère publication en 1991 INFg le récepteur
  soluble à l IL12 sont augmentés dans le sérum de
  patients asthmatiques.
• 2ème publication Magnan, AJRCCM, 2000, 161
• 69 patients
• 4 groupes
• non atopiques non asthmatiques,
• atopiques non asthmatiques
• non atopiques asthmatiques
• atopiques asthmatiques
• Corrélation entre l atopie et le taux d IL4
  (surnageant de sang total).
• Pas de corrélation entre l asthme et l IL4
• INFg dans le surnageant de sang total
• Les asthmatiques atopiques ou non atopiques gt aux
  contrôles 29,1 pg/ml45,5 pg/ml
• Atopiques idem que les contrôles.

3
(No Transcript)
4
Analyse critique Th1 - Th2

• Détection INFg dans le lymphocyte T CD8
• ? dans l asthme atopique par rapport aux témoins
• ? dans l asthme sévère
• è l asthme ne serait pas obligatoirement une
  maladie Th2 mais également Th1.

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Analyse critique Th1 - Th2

• Stimulation de la réponse Th1 è pas
  d amélioration de l inflammation et de
  l hyperréactivité bronchique.
• Chez la souris trois lignéesAvec l ovalbumine
  
• 1 qui produit du Th0
• 1 qui produit du Th1
• 1 qui produit du Th2
• Production de cellules T spléniques puis
  transfert des lignées cellulaires dans les souris
  SCID immunodéficientes
• Th2 è ? sécrétion mucus hyperréactivité
  bronchique
• Th0 è ? inflammation bronchique
• Th1 è ? infiltration pulmonaire. Pas
  d hyperréactivité bronchique.

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Analyse critique Th1 - Th2

• Th1 Th2 dans la souris è Th1 ne contrebalance
  pas le Th2
• Chez la souris
• toujours hyperréactivité bronchique
• ? éosinophiles
• Hansen et coll., J Clin Invest, 1999
• Chez l homme anticorps anti-IL5 pas d effet
  
• chez 16 asthmatiques allergiques,
• test de provocation bronchique à l allergène
• placebo
• 2,5 mg/kg anticorps anti-IL5
• 10 mg/kg anticorps anti-IL5
• pas d effet sur la réponse bronchique à
  l allergène
• pas d effet sur l hyperréactivité bronchique
• ? éosinophiles circulants dans les crachats
  induits.
• Leckie et coll., Lancet, 2000

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(No Transcript)
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(No Transcript)
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Théorie hygiéniste acquisition du terrain non
atopique

• Travail prospectif naissance è 2 ans.
• Évaluation par 6 mois.
• 2 groupes
• Atopiques (n 18).
• Non atopiques (n 13)
• Test de lymphoprolifération Dpt, chat,
  ovalbumine.
• IL4, IL5, IL9, INF? è ARNm (PCR) sur cellules
  mononucléées.
• Prescott et coll., Lancet, 1999, 353, 196

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Allergen-specific cytokine mRNA production by
mononuclear cells from atopic and non-atopic
individuals according to age.
Cytokine/ß-actin mRNA ratio (increase above
background)
Non-atopic
Atopic
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Cytokine/ß-actin mRNA ratio (increase above
background)
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Quels sont les facteurs étudiés dans
l apparition des maladies allergiques

• Facteurs protecteurs
• Les cadets.
• La grande taille de la famille.
• Père de classe sociale défavorisée.
• Né dans une ferme.
• Avoir passé la première année avec un chien.
• Transmission faeco-orale d infection.
• Présence d endotoxines dans l habitat.
• Mode de vie anthroposophique.
• Avoir grandi en Estonie plus qu en Finlande ou
  en Suède.

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Rôle des infections vie dans une ferme

• Bavière Autriche Canada 5-7 ans 8-10
  ans 12-19 ans 10163 2283 1199
• Rhume des foins 0,5 10,3 / 3,1 0,58 (0,2 -
  0,99) (0,46 - 0,75)
• Asthme 0,65 3,9 / 1,1 0,59 (0,3 - 1,0) (0,37 -
  0,95)
• Sifflement 0,55 0,7 (0,36 - 0,86) (0,51 -
  0,95)
• Exposition animaux 0,41 0,48 (0,23 - 0,74) (0,3
  - 0,7)
• Riedler et coll., Clin Exp Allergy 2000, 30
• Von Ehrenstein et coll., Clin Exp Allergy, 2000,
  30
• Ernst et coll., AJRCCM, 2000, 161, 1563

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Endotoxines

• 61 enfants.
• 9 à 24 mois.
• 10 enfants è TC () à un allergène.
• Enfants sensibilisés 9,3 µg/g.
• Enfants non sensibilisés 20,7 µg/g
• Gereda et al., Lancet, 2000, 355

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Exposition aux endotoxines

• Poussière
• A. 39 habitations avec animaux.
• B. 15 habitations sans animaux.
• C. 30 témoins.
• Cuisine
• A. 14 µg/g 11 - 18 µg/g
• B. 0,5 µg/g 0,30 - 0,89 µg/g
• C. 0,3 µg/g 0,3 - 0,5 µg/g
• Von Mutius, Clin Exp Allergy, 2000

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Exposition aux endotoxines

• Mesure des endotoxines
• Dans lair et la poussière
• Strasbourg et Haut-Doubs (logement rural et
  ferme laitière)
• Différence entre STRG et haut-Doubs dans les
  concentrations dendotoxines dans la poussière et
  dans lair.
• Barnig et coll, en préparation

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Lien génétique et exposition

• Rôle des Toll- Like Recepteurs
• Polymorphisme d1 nucleotide pour TLR2 et TLR4
• TLR2/-16934 augmentation de lasthme chez les
  enfants de fermiers
• TLR4 / polymorphisme en pos 896hétérozygote
  faible répondeur au LPS et moins dasthme
• TLR4 usuels plus dasthme avec les endotoxines
• Werner et al, JACI 2003
• Eder et al, JACI 2004

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Lien génétique et exposition

• le CD14 recepteur pour les endotoxines
• Fixation des endotoxines avec TLR 4
• Remplacement Cytosine par Thymine sur une paire
  de base 260 (SNP)
• 437 femmes
• Williams et al,
  soumis

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Lien génétique et exposition

• Mesure
• IgE totales, Ig E spécifiques
• Fel d 1, Can f 1, endotoxine dans la poussière
• Pas de lien entre animal et endotoxine
• Pas de lien animal et polymorphisme CD14
• Genotype CC (35)
• Rel inverse Endotoxine et IgE
• Genotype CT ou TT (65)
• Rel entre Endotox et IgE
• 
  Williams et al,soumis

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Lymphocytes T régulateurs dans lallergie et
lasthme
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Dogme Th1/Th2 et allergie

• Balance Th1/Th2 avec inhibition mutuelle
• H Rupture balance
• Th1 maladies auto-immunes
• Th2 maladies allergiques
• IL-4 et IL-13 synthèse IgE
• IL-5 activation et attraction PN éosinophiles
• Rhinite allergique
• Asthme allergique
• Dermatique atopique
• Romagnani, J Allergy Clin Immunol, 2000

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Dogme Th1/Th2 et allergie

• Dogme insuffisant
• Asthme allergique inflammation Th1 (IFN-?)
• Hansen et al, J Clin Invest, 1999
• Infections parasitaires switch Th2
• protection contre lallergie et lasthme
• Yasdanbakhsh et al, Science, 2002
• ? prévalence maladies allergique et auto-immunes
• Sheikh et al, J Allergy Clin immunol, 2003
• è Lymphocytes T régulateurs

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Treg et asthme

• Animal
• Données contradictoires et peu abondantes
• Production IgE
• Réponse Th2 et éosinophilie bronchique
• Hyperréactivité bronchique
• Van Oosterhout and Bloksma, Eur Respir J, 2006

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Treg et asthme

• Homme
• Déficit fonctionnels in vitro des Tr1 chez les
  asthmatiques corticorésistants
• Hawrylowicz et al, j allergy Clin Immunol, 2002
• ? Ly T CD4CD45RO producteurs IL-10 (Tr1 ?) chez
  lasthmatique sévère instable
• Karlsson et al, J Exp Med, 2004

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Treg et allergie

• Déficit fonctionnels in vitro Ly T CD4CD25 des
  sujets avec pollinose allergique surtout lors de
  la saison pollinique
• Ling et al, Lancet, 2004
• Akdis et al, J Exp Med, 2004
• ? Ly T CD4CD25 producteurs IL-10 (Tr1?) dans
  les cultures de PBMC de sujets ayant reçu 1 an de
  désensibilisation spécifique au pollen de
  graminées
• Francis et al, J Allergy Clin Immunol, 2003

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(No Transcript)
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The role of cells

• T cells response grass pollen
• Healthy controls (n9)
• Atopic controls (n12)
• Grass pollen allergic patients (n11)
• During
• Outside
• PBMC
• Isolation CD4 CD25- and CD4 CD25
• Coculture (6 days) with the allergens
• Proliferation measurement CD4 CD25- (H3-
  thymidine)

the grass pollen season
Ling et al., Lancet, 2004
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The role of cells

• T cells response
• Inhibition of CD4 CD25- proliferation was weaker
  in the atopic group versus non atopic group

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The role of cells

• T Cells response birch pollen

Clin Exp Allergy, 2004
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The role of cells

• T Cells response birch pollen
• During the birch pollen season
• Controls (n10)
• Patients with pollinosis to birch pollen (n10)
• PBMC
• CD4
• CD25 and CD25 high
• Culture with pollen allergen
• CD4/ CD25-, CD4/CD25
• Proliferation
• IL13 and IL5 measurement

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The role of cells
Same proportion of CD25
36
The role of cells
Same inhibition of proliferation CD25- with CD25
37
The role of cells
Absence of suppression of IL13 production in
coculture of allergic patients
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The role of cells
Absence of suppression of IL5 production in
coculture of allergic patients
39
Treg et allergie

• ? CD4CD25CD45RO (nTreg?) dans sang
  périphérique chez les enfants guéris dune APLV
• Karlsson et al, J Exp Med, 2004

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Lympho T reg dans la desensibilisation
41
Conclusion

• 2 types de Treg identifiées
• Treg naturelles
• Treg adaptives (Tr1 et Th3)
• Peuvent intervenir à différents niveaux dans
  lallergie et lasthme
• Progression à la maladie allergique et/ou
  asthmatique
• Sévérité maladie
• Persistance maladie
• Immunothérapie spécifique

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Th17 théorie

• Cellules de lhypersensibilité retardé (HSR)
  lymphocytes CD8 de type TH1
• Coffman et Mosmann, J Immunol, 1986
• Résultats basés sur œdème de patte de souris
• Injection TH1 -gt œdème
• Injection TH2 -gt pas dœdème

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Hypothèse TH1/TH2 remise en question

• Modèle animal de lencéphalite expérimentale
  allergique
• Selon lhypothèse TH1 de lhypersensibilité
  retardée

Prédiction Observée
- Administration dINF ? devrait aggraver lEAE Amélioration
- Souris KO pour INF ? devrait résister ci EAE Aggravation EAE
- Anticorps anti INF ? gt Protection de lEAE Aggravation
- Souris KO pour le TNF devrait résister à lEAE Aggravation
- TNF devrait aggraver lEAE Protection de lEAE
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Hypothèse TH17

• IL23 diffère légèrement IL12
• IL23 à la différence de IL12 nentraîne pas de
  protection de TH1
• Les souris sans gène pour lIL 23 résistent à
  lEAE
• IL23 stimule les lymphocytes qui produisent
  lIL17, lIL et le TNF a
• Les anticorps anti IL17 diminuent lEAE

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TH17 Auto-immunité

• Les souris KO pour lIL17 font des EAE moins
  sévères.
• INF ? et TNF stimulent la sécrétion de TH1
• VCAM1
• Fixation des lymphocytes par les a1 intégrines
• Anticorps antia1 intégrine gt meilleur traitement
  pour la sclérose en plaque
• Une fois adhérence du TH1 obtenue gt favorise
  adhésion des lymphocytes TH17 et des Treg
• Souris sans IL17 gt pas darthrite
• gt pas dasthme allergique
• Facteur de transcription pour IL17
• TOR?T
• Souris déficiente en TOR?T gt ? EAE

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Steinman, Nature Médecine, 2007